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湖州地区典型水产养殖池塘中抗菌药物的污染特征 被引量:6
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作者 徐磊 孙博怿 +2 位作者 盛鹏程 施沁璇 罗毅志 《江苏农业科学》 2019年第11期210-210,211-214,共5页
在水产养殖业中,抗菌药物作为防治细菌性疾病的药物和生长促进剂被大量的应用,不可避免地造成了抗菌药物在水环境中的残留,引发一系列环境问题。利用固相萃取和超高效液相串联质谱技术调查6种磺胺类、4种四环素类和6种喹诺酮类抗菌药物... 在水产养殖业中,抗菌药物作为防治细菌性疾病的药物和生长促进剂被大量的应用,不可避免地造成了抗菌药物在水环境中的残留,引发一系列环境问题。利用固相萃取和超高效液相串联质谱技术调查6种磺胺类、4种四环素类和6种喹诺酮类抗菌药物在湖州地区典型水产养殖池塘中的含量水平,揭示其在湖州地区典型水产养殖环境中的污染现状与分布特征。在养殖水、底泥中分别检测到9、13种抗菌药物,平均浓度在0.1~428.8、10.0~3681.6ng/kg之间,其中养殖水中以磺胺类为主,底泥中以四环素类和喹诺酮类为主。抗菌药物在底泥和水中的分布可采用底泥-水分配系数(Kd)来解释分析。在不同养殖模式下,抗菌药物的污染程度存在巨大差异。 展开更多
关键词 抗菌药物 底泥 水产养殖区 湖州地区 分配系数 污染特征
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中华鳖胚胎组织原代细胞培养技术的研究 被引量:1
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作者 曹铮 林锋 +2 位作者 卢淑娟 吕孙建 刘莉 《江苏农业科学》 2019年第6期141-143,共3页
基于当前市场上中华鳖商业化细胞缺乏,不利于开展其病害防控研究的现状,以中华鳖胚胎为对象,采用组织块原代培养技术,从孵育15~20 d的受精卵中获得适宜的胚胎组织,经抗生素、乙醇消毒,通过无菌条件下将组织块均匀分散贴壁在细胞瓶中,... 基于当前市场上中华鳖商业化细胞缺乏,不利于开展其病害防控研究的现状,以中华鳖胚胎为对象,采用组织块原代培养技术,从孵育15~20 d的受精卵中获得适宜的胚胎组织,经抗生素、乙醇消毒,通过无菌条件下将组织块均匀分散贴壁在细胞瓶中,然后于30℃恒温培养箱中贴壁培养4 h后加入无血清M199培养基多次清洗,从而获得了中华鳖胚胎组织原代细胞;在此基础上分别对中华鳖胚胎细胞传代培养条件、冻存与复苏等进行系统性研究,初步确定中华鳖胚胎细胞培养温度为26℃,M199或L-15培养基,血清浓度为15%(体积分数),通常7 d传代1次;二甲亚砜冻存保藏后,细胞复苏生长状况正常。 展开更多
关键词 中华鳖 胚胎 原代细胞 培养
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不同养殖模式下加州鲈鱼肉质比较分析 被引量:22
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作者 周聃 崔雁娜 +4 位作者 周冬仁 盛鹏程 吴琦芳 戴志远 郝贵杰 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第6期146-149,共4页
为分析循环水养殖和池塘养殖下加州鲈鱼肉质区别,探索循环水养殖模式优点。采集同龄段、同一饲料喂养的2种养殖模式下的加州鲈鱼,通过测定加州鲈鱼的基础营养成分、肉质相关指标和质构特性(TPA分析)来评价2种养殖模式下鲈鱼肉质,并采用... 为分析循环水养殖和池塘养殖下加州鲈鱼肉质区别,探索循环水养殖模式优点。采集同龄段、同一饲料喂养的2种养殖模式下的加州鲈鱼,通过测定加州鲈鱼的基础营养成分、肉质相关指标和质构特性(TPA分析)来评价2种养殖模式下鲈鱼肉质,并采用扫描电镜,对2种加州鲈鱼进行观察,分析其微观结构差异。结果显示,循环水养殖加州鲈鱼较池塘养殖比,其粗蛋白含量显著提高(P<0.05),粗脂肪含量显著降低(P<0.05);滴水损失率、冷冻渗出率和蒸煮损失率均高于池塘养殖组(P<0.05);循环水养殖组鲈鱼鱼肉硬度、胶着性和咀嚼性均高于池塘养殖组(P<0.05),肌纤维排布更加整齐致密。说明循环水养殖的加州鲈鱼的鱼肉营养和肉质均有一定程度的提升,适宜进一步推广和研究。 展开更多
关键词 循环水养殖 池塘养殖 加州鲈鱼 基础营养成分 质构特性 微观组织结构
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黄颡鱼鲇鱼爱德华氏菌弱毒株的分离、鉴定及免疫原性 被引量:2
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作者 徐洋 尹文林 +4 位作者 姚嘉赟 蔺凌云 袁雪梅 潘晓艺 沈锦玉 《江苏农业科学》 2018年第20期187-190,共4页
为了研发1种黄颡鱼鲇鱼爱德华氏菌弱毒活疫苗,以开展候选弱毒株的筛选,从湖州地区患"裂头病"的黄颡鱼体内分离到1株细菌,暂命名为AW30726K。应用理化特性及16S rRNA对其进行鉴定,并展开致病性和免疫原性研究。结果显示,AW307... 为了研发1种黄颡鱼鲇鱼爱德华氏菌弱毒活疫苗,以开展候选弱毒株的筛选,从湖州地区患"裂头病"的黄颡鱼体内分离到1株细菌,暂命名为AW30726K。应用理化特性及16S rRNA对其进行鉴定,并展开致病性和免疫原性研究。结果显示,AW30726K为鲇鱼爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri),该菌对黄颡鱼(100±2) g的LD50为9. 33×109CFU/mL,不同免疫途径下的活菌免疫保护率为74%~100%,血清抗体效价均在21 d达到峰值,且免疫效果以注射免疫为最佳,而浸泡与口服免疫效果相近。上述研究表明,新分离的AW30726K为鲇鱼爱德华氏菌弱毒株,能有效防御鲇鱼爱德华氏菌的感染,可作为弱毒疫苗的候选株。 展开更多
关键词 黄颡鱼 鲇鱼爱德华氏菌 弱毒株 分离鉴定 免疫原性
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三疣梭子蟹血清凝集素的生物学特性 被引量:1
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作者 郝贵杰 王春琳 +6 位作者 林锋 母昌考 徐洋 袁雪梅 潘晓艺 姚嘉赟 沈锦玉 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第1期220-223,共4页
对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果表明:三疣梭子蟹血清凝集素对鲫鱼、中华鳖、草鱼、鸡和人类A、B、O型血细胞没有凝集作用,但是对小鼠、兔的血细胞表现出较强的凝集活性,其中对小鼠血... 对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果表明:三疣梭子蟹血清凝集素对鲫鱼、中华鳖、草鱼、鸡和人类A、B、O型血细胞没有凝集作用,但是对小鼠、兔的血细胞表现出较强的凝集活性,其中对小鼠血细胞的血凝活性达到2^10,对兔血细胞的血凝活性达到2^8;盐度对其凝集活性有较大影响,Na Cl浓度在0.6 mol/L以上时基本失活;凝集素活性最适p H值为6.0-7.4;血清凝集素对Ca^2+、Mg^2+离子有明显的依赖性,EDTA可以明显抑制其凝集活性;糖抑制结果表明,血清凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺及N-乙酰甘露糖胺特异性抑制;对血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区;聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,主要蛋白条带在72-95 ku。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 血清凝集素 凝集活性 聚丙烯凝胶电泳
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黄颡鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性 被引量:1
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作者 徐洋 蔺凌云 +4 位作者 尹文林 姚嘉赟 潘晓艺 袁雪梅 沈锦玉 《江苏农业科学》 2018年第9期174-176,共3页
采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为... 采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为B10-C3和F6-F2,并对这2株单抗的特性进行分析。2株单抗的亚级份测定均为IgG2a;腹水抗体效价为1∶(7.29×10~5);2株单抗具有Western-Blot反应特性,能识别黄颡鱼免疫球蛋白的重链;单抗F6-F2对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为20 ng,单抗B10-C3对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为39 ng;2株单抗都与黄颡鱼免疫球蛋白发生特异性结合,而与鲇鱼、鳗鲡、鲫鱼、草鱼、鳊鱼、鲈鱼、鳜鱼和白鱼等血清免疫球蛋白无交叉反应。上述结果表明,B10-C3和F6-F2这2株单抗具有高度灵敏和特异等特点,可用于黄颡鱼病原早期诊断和免疫应答水平监测,同时揭示了同目不同属的鲇鱼和黄颡鱼血清Ig之间的相似度较低。 展开更多
关键词 黄颡鱼 免疫球蛋白 单克隆抗体
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一株中华鳖气单胞菌噬菌体的分离及功能鉴定 被引量:8
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作者 吕孙建 刘莉 +2 位作者 曹铮 卢淑娟 林锋 《江苏农业科学》 2018年第2期108-111,共4页
中华鳖是我国主要的名优淡水养殖品种,但病害频发严重影响了鳖养殖业的可持续发展。特别是滥用抗生素造成食品安全和生态安全问题,已引起人们高度关注,寻找替代抗生素对中华鳖疾病进行预防及治疗迫在眉睫。从中华鳖养殖塘中分离得到气... 中华鳖是我国主要的名优淡水养殖品种,但病害频发严重影响了鳖养殖业的可持续发展。特别是滥用抗生素造成食品安全和生态安全问题,已引起人们高度关注,寻找替代抗生素对中华鳖疾病进行预防及治疗迫在眉睫。从中华鳖养殖塘中分离得到气单胞菌噬菌体1株,经透射电子显微镜观察确定为肌尾噬菌体科噬菌体。该噬菌体为宽噬噬菌体,对中华鳖及对虾发病养殖塘中分离得到的嗜水气单胞菌及副溶血弧菌均有明显的抑制效果,该噬菌体浸染的细菌培养基能形成明显的噬菌斑。此外,经体外试验,发现该噬菌体能够有效治疗中华鳖的腐皮病。本研究分离得到的噬菌体能够有效抑制水产常见致病菌,为后续抗生素代替治疗方法的研发提供了一定理论依据。 展开更多
关键词 中华鳖 气单胞菌噬菌体 副溶血弧菌 嗜水气单胞菌
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宽谱噬菌体NTHP01的生理特征及噬菌作用 被引量:4
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作者 吕孙建 袁雪梅 +3 位作者 刘莉 卢淑娟 杭小英 施伟达 《江苏农业科学》 2019年第3期132-135,共4页
针对1株从中华鳖养殖塘中分离得到的宽谱噬菌体NTHP01(保藏号:CGMCC No. 9623),对其感染复数、潜伏期和裂解期、热稳定性、pH稳定性等理化特性展开研究,探讨了氯化镁促噬菌体感染的最佳浓度,并考察了该噬菌体的噬菌谱。结果显示,噬菌体N... 针对1株从中华鳖养殖塘中分离得到的宽谱噬菌体NTHP01(保藏号:CGMCC No. 9623),对其感染复数、潜伏期和裂解期、热稳定性、pH稳定性等理化特性展开研究,探讨了氯化镁促噬菌体感染的最佳浓度,并考察了该噬菌体的噬菌谱。结果显示,噬菌体NTHP01的最佳感染复数为0.01,潜伏期和裂解期分别为150、60 min,最适温度为30℃,最适pH值为7,氯化镁终浓度为4 mmol/L时对噬菌体的感染促进作用最佳。此外,结果显示噬菌体NTHP01宿主范围宽,能够有效抑制来自不同水产养殖品种的细菌,包括嗜水气单胞菌、脑膜脓毒性黄杆菌、迟缓爱德华氏菌、副溶血性弧菌、维氏气单胞菌、腐败希瓦菌、温和气单胞菌等。研究结果为噬菌体NTHP01的规模化制备及今后在水产养殖细菌性病害防治中的应用奠定了良好基础。 展开更多
关键词 噬菌体 生理特征 抑菌作用 宿主范围
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