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水产饲料中复方硝基酚钠的高效液相色谱法分析
1
作者
邢丽红
冷凯良
+3 位作者
孙伟红
李兆新
付树林
孙晓杰
《饲料工业》
北大核心
2015年第12期53-57,共5页
研究旨在建立一种检测水产饲料中复方硝基酚钠含量的高效液相色谱方法。饲料经乙腈提取,正己烷液液萃取净化,无水硫酸钠脱水,碱性条件下浓缩后,以0.1%磷酸溶液-甲醇溶液（体积比63？？37）为流动相,经C18色谱柱分离,紫外检测波长280 nm...
研究旨在建立一种检测水产饲料中复方硝基酚钠含量的高效液相色谱方法。饲料经乙腈提取,正己烷液液萃取净化,无水硫酸钠脱水,碱性条件下浓缩后,以0.1%磷酸溶液-甲醇溶液（体积比63？？37）为流动相,经C18色谱柱分离,紫外检测波长280 nm下分离检测。结果表明,对硝基酚钠、邻硝基酚钠和5-硝基邻甲氧基苯酚钠的检出限均为0.5 mg/kg,定量限均为1.0 mg/kg。该方法在0.5~20μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r2〉0.999。添加水平为1~20 mg/kg时,对硝基酚钠、邻硝基酚钠和5-硝基邻甲氧基苯酚钠的回收率分别为84.5%~96.6%、74.0%~89.2%和78.5%~95.8%,批内相对标准偏差及批间相对标准偏差均〈15%。经验证该方法操作简便,准确性和重现性良好,可用于水产饲料中复方硝基酚钠含量的测定。
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关键词
高效液相色谱
水产饲料
复方硝基酚钠
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职称材料
太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类α-1,2-岩藻糖基转移酶的密码子优化与原核表达
被引量：
2
2
作者
姚琳
江艳华
+5 位作者
李风铃
朱文嘉
郭莹莹
姜薇
翟毓秀
王联珠
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2016年第1期74-79,共6页
牡蛎消化组织内存在的类A型血型组织抗原是其特异性富集诺如病毒的主要原因,FUT2(Fucosyltransferase 2,α-1,2-岩藻糖基转移酶)是A型血型组织抗原合成的关键酶。本研究在前期克隆了太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类FUT2基因cDNA全长的...
牡蛎消化组织内存在的类A型血型组织抗原是其特异性富集诺如病毒的主要原因,FUT2(Fucosyltransferase 2,α-1,2-岩藻糖基转移酶)是A型血型组织抗原合成的关键酶。本研究在前期克隆了太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类FUT2基因cDNA全长的基础上,根据大肠杆菌密码子偏爱性优化并合成了类FUT2基因,插入原核表达载体pRSET A构建pRSET-mof,将其转化大肠杆菌BL21,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导。经SDS-PAGE分析显示,在37℃、IPTG终浓度为0.8 mmol/L的条件下,诱导4 h后出现大小约为46 k Da的特异性目的条带。利用His亲和层析柱纯化及超滤管浓缩目的蛋白,得到单一条带,说明纯化效果良好。Western blot分析显示,目的蛋白与抗6×His标签单克隆抗体、抗人FUT2单克隆抗体均能发生特异性反应,表明优化后的太平洋牡蛎类FUT2基因在大肠杆菌系统中成功表达。本研究结果为今后研究太平洋牡蛎类FUT2基因的功能,进一步探索牡蛎特异性富集诺如病毒的分子机理奠定了基础。
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关键词
太平洋牡蛎
类FUT2基因
密码子优化
原核表达
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职称材料
题名
水产饲料中复方硝基酚钠的高效液相色谱法分析
1
作者
邢丽红
冷凯良
孙伟红
李兆新
付树林
孙晓杰
机构
农业部
水产品
质量
安全
检测与
评价
重点
实验室
农业部
水产品
质量
安全
风险
评估
实验室
(
青岛
)
中国
水产
科学研究院
黄海
水产
研究所
出处
《饲料工业》
北大核心
2015年第12期53-57,共5页
基金
2014年国家水产品质量安全风险评估项目[GJFP2014009]
"十二五"国家科技支撑计划项目[2012BAD29B06]
文摘
研究旨在建立一种检测水产饲料中复方硝基酚钠含量的高效液相色谱方法。饲料经乙腈提取,正己烷液液萃取净化,无水硫酸钠脱水,碱性条件下浓缩后,以0.1%磷酸溶液-甲醇溶液（体积比63？？37）为流动相,经C18色谱柱分离,紫外检测波长280 nm下分离检测。结果表明,对硝基酚钠、邻硝基酚钠和5-硝基邻甲氧基苯酚钠的检出限均为0.5 mg/kg,定量限均为1.0 mg/kg。该方法在0.5~20μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r2〉0.999。添加水平为1~20 mg/kg时,对硝基酚钠、邻硝基酚钠和5-硝基邻甲氧基苯酚钠的回收率分别为84.5%~96.6%、74.0%~89.2%和78.5%~95.8%,批内相对标准偏差及批间相对标准偏差均〈15%。经验证该方法操作简便,准确性和重现性良好,可用于水产饲料中复方硝基酚钠含量的测定。
关键词
高效液相色谱
水产饲料
复方硝基酚钠
Keywords
HPLC
aquatic feeds
compound sodium nitrophenolates
分类号
S816.17 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类α-1,2-岩藻糖基转移酶的密码子优化与原核表达
被引量：
2
2
作者
姚琳
江艳华
李风铃
朱文嘉
郭莹莹
姜薇
翟毓秀
王联珠
机构
农业部
水产品
质量
安全
检测与
评价
重点
实验室
农业部
水产品
质量
安全
风险
评估
实验室
(
青岛
)
中国
水产
科学研究院
黄海
水产
研究所
潍坊市
产品
质量
检验所
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2016年第1期74-79,共6页
基金
国家自然科学基金(31101883)
科技部科技基础性工作专项(2013FY113300)共同资助
文摘
牡蛎消化组织内存在的类A型血型组织抗原是其特异性富集诺如病毒的主要原因,FUT2(Fucosyltransferase 2,α-1,2-岩藻糖基转移酶)是A型血型组织抗原合成的关键酶。本研究在前期克隆了太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类FUT2基因cDNA全长的基础上,根据大肠杆菌密码子偏爱性优化并合成了类FUT2基因,插入原核表达载体pRSET A构建pRSET-mof,将其转化大肠杆菌BL21,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导。经SDS-PAGE分析显示,在37℃、IPTG终浓度为0.8 mmol/L的条件下,诱导4 h后出现大小约为46 k Da的特异性目的条带。利用His亲和层析柱纯化及超滤管浓缩目的蛋白,得到单一条带,说明纯化效果良好。Western blot分析显示,目的蛋白与抗6×His标签单克隆抗体、抗人FUT2单克隆抗体均能发生特异性反应,表明优化后的太平洋牡蛎类FUT2基因在大肠杆菌系统中成功表达。本研究结果为今后研究太平洋牡蛎类FUT2基因的功能,进一步探索牡蛎特异性富集诺如病毒的分子机理奠定了基础。
关键词
太平洋牡蛎
类FUT2基因
密码子优化
原核表达
Keywords
Crassostrea gigas
FUT2 like gene
Codon optimization
Prokaryocyte expression
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水产饲料中复方硝基酚钠的高效液相色谱法分析
邢丽红
冷凯良
孙伟红
李兆新
付树林
孙晓杰
《饲料工业》
北大核心
2015
0
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下载PDF
职称材料
2
太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类α-1,2-岩藻糖基转移酶的密码子优化与原核表达
姚琳
江艳华
李风铃
朱文嘉
郭莹莹
姜薇
翟毓秀
王联珠
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2016
2
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职称材料
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