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家蚕核型多角体病毒增殖关键基因的鉴定被引量：1: 1; 作者董非凡何倩 +3 位作者董战旗胡志刚蒋亚明潘敏慧《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期422-427,共6页; 选择家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)基因组中可能与病毒增殖相关的8个基因dbp、lef-2、lef-3、lef-7、lef-10、lef-11、p143和vp1054作为候选基因,利用家蚕内源性microRNA骨架构建候选基因的干扰载体,并采用RNA干扰(RNA interference,RNAi... 展开更多; 关键词家蚕核型多角体病毒增殖关键基因 RNA干扰抗病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-11基因在病毒感染宿主细胞中的表达特征被引量：1: 2; 作者董战旗胡楠 +4 位作者陈婷婷董非凡蒋亚明鲁成潘敏慧《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期274-280,共7页; 杆状病毒晚期表达因子(late expression factor,LEF)是参与病毒基因组DNA复制和病毒基因转录调控的一个重要家族,该家族成员LEF-11为13 k D的小分子蛋白质。通过比对目前已经测序的63种杆状病毒基因组序列,发现LEF-11的编码基因lef-11... 展开更多; 关键词家蚕核型多角体病毒晚期表达基因lef-11 DNA复制表达时相; 在线阅读下载PDF 职称材料

家蚕细胞中过表达家蚕核型多角体病毒核衣壳蛋白VP39抑制BmNPV的增殖被引量：3: 3; 作者胡楠董战旗 +1 位作者陈婷婷潘敏慧《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1222-1228,共7页; 【目的】家蚕Bombyx mori核型多角体病毒(Bm NPV)核衣壳蛋白VP39为病毒装配所必需。本研究旨在初探VP39在病毒侵染家蚕细胞过程中的功能及特征,以期为家蚕抗病毒研究提供研究基础。【方法】本研究通过构建原核表达载体,诱导原核表达得... 展开更多; 关键词家蚕核型多角体病毒 VP39 抗病毒病毒增殖亚细胞定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定被引量：2: 4; 作者董战旗张军 +2 位作者胡楠鲁成潘敏慧《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期76-81,共6页; 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ie1基因是BmNPV DNA复制的必需基因,其编码的IE1蛋白能够反式转录激活杆状病毒早期基因的表达.为了进一步研究IE1蛋白在家蚕核型多角体病毒感染宿主过程中具体的功能,研究通过PCR扩增BmNPVie1基因片段,亚克隆... 展开更多; 关键词家蚕家蚕核型多角体病毒 IE1 原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

对家蚕抗核型多角体病毒的研究策略及研究进展被引量：3: 5; 作者董战旗潘敏慧《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期139-146,共8页; 由家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)引发的家蚕血液型脓病是生产上危害最为严重的蚕病之一。国内外学者从研究家蚕的抗病遗传规律、选育对病毒具有抵抗力的家蚕品种,一直到应用现代分子生物学技术研究病毒的基因组、转录组和蛋白组,研究病毒... 展开更多; 关键词家蚕家蚕核型多角体病毒抗性分子机制抗性育种素材; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕核型多角体病毒增殖关键基因的鉴定被引量：1: 1; 作者董非凡何倩董战旗胡志刚蒋亚明潘敏慧; 机构西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期422-427,共6页; 基金国家自然科学基金项目(No.31472152) 现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22); 文摘选择家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)基因组中可能与病毒增殖相关的8个基因dbp、lef-2、lef-3、lef-7、lef-10、lef-11、p143和vp1054作为候选基因,利用家蚕内源性microRNA骨架构建候选基因的干扰载体,并采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术对上述候选基因进行干扰试验,筛选病毒增殖的关键基因,以期为开辟家蚕抗Bm NPV研究新路径打下基础。对8个候选基因的RNA干扰试验显示:干扰lef-7对Bm NPV的增殖没有明显影响;对lef-2和lef-11表达的干扰效率最高,达到90%以上,其中干扰lef-11后病毒对细胞的感染率仅为9.16%,远远低于对其他基因干扰后的感染率。依据试验结果初步确认8个病毒增殖相关基因中,lef-11对病毒增殖的影响最大。; 关键词家蚕核型多角体病毒增殖关键基因 RNA干扰抗病毒; Keywords Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Proliferation Key gene RNA interference Antivirus; 分类号 S884.51 [农业科学—特种经济动物饲养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-11基因在病毒感染宿主细胞中的表达特征被引量：1: 2; 作者董战旗胡楠陈婷婷董非凡蒋亚明鲁成潘敏慧; 机构家蚕基因组生物学国家重点实验室农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期274-280,共7页; 基金国家自然科学基金项目(No.31272505 31172269 +1 种基金 314721-52) 中央高校基本业务费专项(No.XDJK2015D002); 文摘杆状病毒晚期表达因子(late expression factor,LEF)是参与病毒基因组DNA复制和病毒基因转录调控的一个重要家族,该家族成员LEF-11为13 k D的小分子蛋白质。通过比对目前已经测序的63种杆状病毒基因组序列,发现LEF-11的编码基因lef-11在除宿主为双翅目昆虫的Cuni NPV外的所有杆状病毒基因组中都存在,暗示lef-11基因可能在包括家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)在内的杆状病毒复制过程中行使重要功能。通过RT-PCR检测和Western blotting分析lef-11基因及其编码蛋白质在Bm NPV侵染的家蚕卵巢培养细胞Bm N中的转录与表达时相,其转录本从侵染后6h开始持续表达,蛋白质从侵染后12 h开始持续表达。当利用DNA聚合酶特异抑制剂阿非迪霉素(aphidicolin)阻断Bm NPV病毒基因组DNA复制之后检测LEF-11的表达受到抑制,暗示LEF-11的表达起始于病毒DNA复制之后。以上结果表明:BmNPV lef-11基因在杆状病毒中非常保守,是一个晚期表达基因,可能不直接参与病毒的起始复制,而是参与病毒的大规模复制过程。; 关键词家蚕核型多角体病毒晚期表达基因lef-11 DNA复制表达时相; Keywords Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Late expression factor gene lef-11 DNA replication Expression pattern; 分类号 Q939.4 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕细胞中过表达家蚕核型多角体病毒核衣壳蛋白VP39抑制BmNPV的增殖被引量：3: 3; 作者胡楠董战旗陈婷婷潘敏慧; 机构西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1222-1228,共7页; 基金国家自然科学基金项目(31272505 31172269 +1 种基金 31472152) 中央高校基本业务费专项资金(XDJK2015D002); 文摘【目的】家蚕Bombyx mori核型多角体病毒(Bm NPV)核衣壳蛋白VP39为病毒装配所必需。本研究旨在初探VP39在病毒侵染家蚕细胞过程中的功能及特征,以期为家蚕抗病毒研究提供研究基础。【方法】本研究通过构建原核表达载体,诱导原核表达得到多克隆抗体,以Western blot验证VP39表达时相;构建真核表达载体,转染细胞后以免疫荧光手段观测VP39表达定位及影响病毒增殖现象。【结果】制备了VP39多克隆抗体。VP39在病毒感染后大量定位于家蚕细胞核,部分定位于胞质,而过表达的VP39定位于家蚕细胞胞质;过表达VP39后抑制Bm NPV感染家蚕细胞。【结论】在Bm N-SWU1细胞中过表达VP39会影响Bm NPV的扩散,导致Bm NPV感染细胞数目大量减少。该结果为VP39调控宿主与病毒的相互作用提供了新的思路。; 关键词家蚕核型多角体病毒 VP39 抗病毒病毒增殖亚细胞定位; Keywords Bombyx mori nucleopolyhedrovirus VP39 anti-virus virus proliferation subcellular localization; 分类号 Q965.8 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定被引量：2: 4; 作者董战旗张军胡楠鲁成潘敏慧; 机构家蚕基因组生物学国家重点实验室农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室; 出处《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期76-81,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(31272505 31172269); 文摘家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ie1基因是BmNPV DNA复制的必需基因,其编码的IE1蛋白能够反式转录激活杆状病毒早期基因的表达.为了进一步研究IE1蛋白在家蚕核型多角体病毒感染宿主过程中具体的功能,研究通过PCR扩增BmNPVie1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET32,获得重组质粒pET32-IE1,经测序正确后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株.通过IPTG诱导融合蛋白原核表达后,初步纯化收集抗原,免疫新西兰大白兔,制备IE1多克隆抗体.应用制备的免疫兔血清进行Western-blot分析,结果显示多克隆抗体能特异识别BmNPV的IE1和IE0蛋白.免疫荧光结果同样显示IE1蛋白定位于宿主细胞核病毒复制中心.IE1抗体制备的成功为进一步研究IE1在病毒感染家蚕中的作用机理奠定了基础.; 关键词家蚕家蚕核型多角体病毒 IE1 原核表达多克隆抗体; Keywords Bombyx mori Bombyx mori nucleopolyhedrovirus IE1 prokaryotic expression polyclonalantibody; 分类号 S851.347.31 [农业科学—预防兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名对家蚕抗核型多角体病毒的研究策略及研究进展被引量：3: 5; 作者董战旗潘敏慧; 机构家蚕基因组生物学国家重点实验室农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期139-146,共8页; 基金国家自然科学基金项目(No.31472152,31572466) 现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22); 文摘由家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)引发的家蚕血液型脓病是生产上危害最为严重的蚕病之一。国内外学者从研究家蚕的抗病遗传规律、选育对病毒具有抵抗力的家蚕品种,一直到应用现代分子生物学技术研究病毒的基因组、转录组和蛋白组,研究病毒的侵染规律及与蚕体的互作,基于RNAi和CRISPR/Cas9技术培育转基因抗病毒素材等,已经取得了诸多进展。本文系统总结近10年来有关家蚕抗Bm NPV研究在上述各个方面取得的重要成果,并对未来家蚕抗病毒机制研究和抗病毒分子育种趋势以及亟需解决的科学与技术问题进行探讨,以期为不断深入的家蚕抗病毒研究提供参考。; 关键词家蚕家蚕核型多角体病毒抗性分子机制抗性育种素材; Keywords Bombyx mori BmNPV Resistant molecular mechanism Breeding material with resistance; 分类号 S884.5 [农业科学—特种经济动物饲养] Q939.4 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	家蚕核型多角体病毒增殖关键基因的鉴定	董非凡何倩董战旗胡志刚蒋亚明潘敏慧	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-11基因在病毒感染宿主细胞中的表达特征	董战旗胡楠陈婷婷董非凡蒋亚明鲁成潘敏慧	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	家蚕细胞中过表达家蚕核型多角体病毒核衣壳蛋白VP39抑制BmNPV的增殖	胡楠董战旗陈婷婷潘敏慧	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定	董战旗张军胡楠鲁成潘敏慧	《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	对家蚕抗核型多角体病毒的研究策略及研究进展	董战旗潘敏慧	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2017	3	在线阅读下载PDF 职称材料