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牛疱疹病毒1型gG/TK双基因缺失株对豚鼠免疫保护效力的研究
被引量：
1
1
作者
杨姣
王琛
+5 位作者
王安平
陈颖钰
李庆妮
胡长敏
陈曦
郭爱珍
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1275-1281,共7页
为了评价牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gG/TK双基因缺失株(BoHV-1 gG-/TK-)免疫保护效力,本研究以豚鼠作为该缺失株免疫效力评价模型,将16只豚鼠随机平均分4组,3组为免疫组,1组为对照组。免疫组分别肌肉注射106 TCID50/只(低剂量组)、107 TCID...
为了评价牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gG/TK双基因缺失株(BoHV-1 gG-/TK-)免疫保护效力,本研究以豚鼠作为该缺失株免疫效力评价模型,将16只豚鼠随机平均分4组,3组为免疫组,1组为对照组。免疫组分别肌肉注射106 TCID50/只(低剂量组)、107 TCID50/只(中剂量组)和108 TCID50/只(高剂量组)BoHV-1 gG-/TK-株,接种后21 d以相同剂量和方式加强免疫;对照组以相同方式接种DMEM培养基。免疫前及免疫后测定各组豚鼠直肠温度,观察临床症状,同时免疫后PCR检测排毒情况,进行安全性试验,结果显示,接种BoHV-1 gG-/TK-株后各组豚鼠体温均正常,首免后5 d,中剂量和高剂量组豚鼠出现鼻腔分泌物,持续3 d,而低剂量组和对照组无明显临床症状;排毒检测结果显示,各实验组豚鼠免疫后均不排毒。一免后采集血清,分别利用gB抗体检测试剂盒和微量细胞中和试验检测各组豚鼠抗体水平,结果显示,该缺失株可诱导豚鼠产生gB抗体、中和抗体,这两种抗体水平分别在首免后7 d和21 d升高,持续时间分别为28 d和35 d,加强免疫后各免疫组豚鼠中和抗体急剧升高,首免后35 d高剂量组豚鼠中和抗体水平显著高于其他免疫组和对照组;同时利用试剂盒检测各组豚鼠血清中IFN-γ的表达水平,结果显示,首免后5 d免疫组豚鼠血清中IFN-γ含量达到峰值,持续时间为2 d;对以上数据分析显示,3个剂量免疫组豚鼠血清中抗体水平和IFN-γ含量与免疫剂量呈正相关,并显著高于对照组。首免后35 d 4组豚鼠均以107 TCID50/只经鼻腔接种wt BoHV-1强毒进行攻毒试验,试验结果显示,攻毒后4组豚鼠均体温正常,仅对照组分离到病毒;各组均有豚鼠出现鼻腔分泌物,高剂量组2只,持续1 d,另外两个剂量组各1只,均持续7 d,而对照组3只,最长持续11 d;肺组织的病理变化显示,高剂量组豚鼠肺组织几乎无病变,另外两个剂量组豚鼠肺脏有不同程度损伤,而对照组表现为肺泡结构消失,局部坏死和炎性细胞浸润等。综上所述,BoHV-1 gG-/TK-株能诱导豚鼠体液免疫和细胞免疫,108 TCID50/只以下的剂量为肌注安全剂量,当免疫剂量为108 TCID50/只时能抵抗强毒株攻击,免疫效力最高,而106 TCID50/只~107 TCID50/只可产生部分保护效果。本研究为建立牛传染性鼻气管炎(IBR)疫苗的豚鼠评价模型奠定了基础,同时也为IBR基因工程疫苗的研制提供重要基础数据。
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关键词
牛疱疹病毒1型
牛传染性鼻气管炎病毒
基因缺失
免疫保护
豚鼠
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职称材料
题名
牛疱疹病毒1型gG/TK双基因缺失株对豚鼠免疫保护效力的研究
被引量：
1
1
作者
杨姣
王琛
王安平
陈颖钰
李庆妮
胡长敏
陈曦
郭爱珍
机构
华中
农业
大学
动物
医学院
农业
微
生物
国家
重点
实验室
农业部反刍动物生物制品重点实验室
湖北省
动物
疫苗工程技术研究中心
动物
生物
药物教育部工程研究中心
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第12期1275-1281,共7页
基金
国家重点研发计划(2017YFD0500904)
国家现代农业(肉牛/牦牛)产业技术体系(CARS-37)
全国农业科研杰出人才及其“牛病防治基础与技术创新团队”专项资金。
文摘
为了评价牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gG/TK双基因缺失株(BoHV-1 gG-/TK-)免疫保护效力,本研究以豚鼠作为该缺失株免疫效力评价模型,将16只豚鼠随机平均分4组,3组为免疫组,1组为对照组。免疫组分别肌肉注射106 TCID50/只(低剂量组)、107 TCID50/只(中剂量组)和108 TCID50/只(高剂量组)BoHV-1 gG-/TK-株,接种后21 d以相同剂量和方式加强免疫;对照组以相同方式接种DMEM培养基。免疫前及免疫后测定各组豚鼠直肠温度,观察临床症状,同时免疫后PCR检测排毒情况,进行安全性试验,结果显示,接种BoHV-1 gG-/TK-株后各组豚鼠体温均正常,首免后5 d,中剂量和高剂量组豚鼠出现鼻腔分泌物,持续3 d,而低剂量组和对照组无明显临床症状;排毒检测结果显示,各实验组豚鼠免疫后均不排毒。一免后采集血清,分别利用gB抗体检测试剂盒和微量细胞中和试验检测各组豚鼠抗体水平,结果显示,该缺失株可诱导豚鼠产生gB抗体、中和抗体,这两种抗体水平分别在首免后7 d和21 d升高,持续时间分别为28 d和35 d,加强免疫后各免疫组豚鼠中和抗体急剧升高,首免后35 d高剂量组豚鼠中和抗体水平显著高于其他免疫组和对照组;同时利用试剂盒检测各组豚鼠血清中IFN-γ的表达水平,结果显示,首免后5 d免疫组豚鼠血清中IFN-γ含量达到峰值,持续时间为2 d;对以上数据分析显示,3个剂量免疫组豚鼠血清中抗体水平和IFN-γ含量与免疫剂量呈正相关,并显著高于对照组。首免后35 d 4组豚鼠均以107 TCID50/只经鼻腔接种wt BoHV-1强毒进行攻毒试验,试验结果显示,攻毒后4组豚鼠均体温正常,仅对照组分离到病毒;各组均有豚鼠出现鼻腔分泌物,高剂量组2只,持续1 d,另外两个剂量组各1只,均持续7 d,而对照组3只,最长持续11 d;肺组织的病理变化显示,高剂量组豚鼠肺组织几乎无病变,另外两个剂量组豚鼠肺脏有不同程度损伤,而对照组表现为肺泡结构消失,局部坏死和炎性细胞浸润等。综上所述,BoHV-1 gG-/TK-株能诱导豚鼠体液免疫和细胞免疫,108 TCID50/只以下的剂量为肌注安全剂量,当免疫剂量为108 TCID50/只时能抵抗强毒株攻击,免疫效力最高,而106 TCID50/只~107 TCID50/只可产生部分保护效果。本研究为建立牛传染性鼻气管炎(IBR)疫苗的豚鼠评价模型奠定了基础,同时也为IBR基因工程疫苗的研制提供重要基础数据。
关键词
牛疱疹病毒1型
牛传染性鼻气管炎病毒
基因缺失
免疫保护
豚鼠
Keywords
Bovine herpesvirus type 1
Bovine infectious rhinotracheitis virus
gene deletion
protective immune response
guinea pig
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛疱疹病毒1型gG/TK双基因缺失株对豚鼠免疫保护效力的研究
杨姣
王琛
王安平
陈颖钰
李庆妮
胡长敏
陈曦
郭爱珍
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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