动物胚胎育种及应用中的技术策略 被引量：5

1

作者 李延鹤 刘军 +1 位作者 张涌 权富生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1954-1960,共7页

随着动物分子育种及动物胚胎工程技术的发展,生产、选择具有预期基因型的胚胎,已经成为现实。动物胚胎育种或动物胚胎工程技术育种将成为动物育种中一个重要的技术途径和手段。动物胚胎育种研究主要包括:(1)动物育种方案中胚胎工程技术... 随着动物分子育种及动物胚胎工程技术的发展,生产、选择具有预期基因型的胚胎,已经成为现实。动物胚胎育种或动物胚胎工程技术育种将成为动物育种中一个重要的技术途径和手段。动物胚胎育种研究主要包括:(1)动物育种方案中胚胎工程技术的应用及应用中的技术选择和优化;(2)不同类型动物胚胎育种体系的建立及育种方案实施过程中防止群体近交等问题的研究;(3)动物胚胎育种遗传进展和生物安全等方面的科学评估。动物胚胎育种在应用方面的技术策略可归纳为几个方面:以扩繁为策略的胚胎育种;以转基因或基因修饰为策略的新品种创制育种;以品种种质资源保存和利用为策略的动物胚胎保种。动物胚胎育种是对传统动物育种理论的发展和完善,也是胚胎工程技术应用于畜牧生产中的体现,在加快动物遗传改良、本品种选育以及新品种培育等方面具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 动物育种 动物胚胎工程技术 动物扩繁 基因修饰 动物保种

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非模式生物转录组研究 被引量：79

2

作者 刘红亮 郑丽明 +2 位作者 刘青青 权富生 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期955-970,共16页

转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organ... 转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organism)具有许多模式生物不具备的特征,其转录组研究对解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题具有重要意义。但由于非模式生物缺乏参考基因组信息,传统的转录组研究方法操作复杂,实验周期长,花费大,使得其转录组研究进展缓慢。新一代高通量RNA测序技术(RNA-seq)完全改变了转录组学的研究模式,迅速成为研究非模式生物转录组的先进技术。文章详细论述了近年来利用RNA-seq技术进行非模式生物转录组研究的进展情况,从样品准备、高通量DNA测序以及生物信息学分析等方面介绍了利用RNA-seq技术研究非模式生物转录组的一般流程及方法,并对其中有待进一步研究的问题进行了展望。 展开更多

关键词 转录组 非模式生物 RNA-SEQ

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参与调节哺乳动物精子运动的离子通道研究进展 被引量：3

3

作者 何琪富 高峰 +2 位作者 吴盛辉 张涌 权富生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2708-2722,共15页

精子运动能力是精子完成自然受精、实现自然条件下精子-卵母细胞融合的必要条件。精子从雄性附睾经生殖道进入雌性生殖道的过程中,其运动形式可以在很短的时间内根据环境的变化而做出改变,表明精子膜蛋白(离子通道)参与精子运动的调节,... 精子运动能力是精子完成自然受精、实现自然条件下精子-卵母细胞融合的必要条件。精子从雄性附睾经生殖道进入雌性生殖道的过程中,其运动形式可以在很短的时间内根据环境的变化而做出改变,表明精子膜蛋白(离子通道)参与精子运动的调节,离子通道的正常表达和受精过程密切相关。目前研究发现Ca^(2+)、K^(+)、Na^(+)等离子通道均参与精子膜极化、运动、获能和顶体反应等生理过程,且通过膜片钳和电生理学等技术初步了解精子离子通道的作用分子机制和拓扑结构。本文就参与调节精子运动的Ca^(2+)、pH、电压门控Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)通道的生理功能和拓扑结构进行了总结,期望能为精子离子通道的调节机制和功能研究提供全面的信息,促进动物生殖生物学的发展。 展开更多

关键词 精子 离子通道 精子运动 Ca^(2+)/K^(+) 拓扑结构

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哺乳动物精子发生中减数分裂的起始 被引量：1

4

作者 李明昭 刘维帅 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期910-915,共6页

生殖细胞的发生、增殖和分化是生命科学领域研究的重要课题之一.生殖是所有动物赖以生存的基础,精子发生是完成繁殖所必须经历的过程,其最终目的是源源不断地产生单倍体精子.精子发生过程本身是一个复杂特殊的细胞增殖与分化过程,其中... 生殖细胞的发生、增殖和分化是生命科学领域研究的重要课题之一.生殖是所有动物赖以生存的基础,精子发生是完成繁殖所必须经历的过程,其最终目的是源源不断地产生单倍体精子.精子发生过程本身是一个复杂特殊的细胞增殖与分化过程,其中减数分裂是精子发生最重要的步骤,但关于减数分裂如何精确起始的分子机制仍知之甚少.已有报道发现,维甲酸(RA)调控Stra8可能是哺乳动物减数分裂起始的机制之一,Nanos2、Boule对RA-Stra8通路具有重要的调控作用.本文对哺乳动物精子发生中减数分裂起始的相关研究进展进行综述. 展开更多

关键词 减数分裂 精子发生 Nanos2 Boule Stra8 维甲酸

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性别控制技术在家畜生产中的应用研究进展 被引量：6

5

作者 谢晓刚 李丹 +5 位作者 薛增迪 张芮琪 史宏昭 薛嘉 马乃祥 权富生 《山西农业科学》 2022年第3期433-438,共6页

哺乳动物性别控制技术是指通过人为手段对哺乳动物的正常生殖过程进行干预,使得雌性动物生产出符合人们期望性别后代的生物技术。随着现代畜牧业的快速高质量发展,高效精确的性别控制技术已成为提高家畜生产经济效益的重要研究方向。文... 哺乳动物性别控制技术是指通过人为手段对哺乳动物的正常生殖过程进行干预,使得雌性动物生产出符合人们期望性别后代的生物技术。随着现代畜牧业的快速高质量发展,高效精确的性别控制技术已成为提高家畜生产经济效益的重要研究方向。文章对家畜性别控制理论研究进展及性别控制主要方法,如X、Y精子分离(流式细胞仪分离法、免疫学分离法)、胚胎性别鉴定、调节母畜生殖道环境、不同温度解冻冻精、分子生物学技术(RNA干扰、基因敲除)进行综述,分析各种不同性别控制技术的优缺点和应用范围。随着生命科学领域的快速发展,人们将能够进一步阐明哺乳动物性别决定机制,研制出更加高效、快速、准确、经济的性别控制方法,并将其应用于生产实践,结合体外受精、胚胎分割、胚胎移植、体细胞核移植等生物学技术,促进现代畜牧产业快速高质量发展。 展开更多

关键词 性别控制 畜牧业 家畜 生物技术

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动物种质资源冷冻保存研究和展望 被引量：1

6

作者 曹旭阳 黄敏 +5 位作者 康健 董翔宸 王莹 高峰 吴盛辉 权富生 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期117-123,共7页

动物种质资源冷冻保存是动物种质资源保护的重要组成部分,在防止动物种质资源的濒危、灭绝、丢失以及增加活体保种的遗传多样性、防止群体近交衰退等方面具有重要作用。论文介绍了我国动物种质资源的特点以及相关动物种质资源保护理论,... 动物种质资源冷冻保存是动物种质资源保护的重要组成部分,在防止动物种质资源的濒危、灭绝、丢失以及增加活体保种的遗传多样性、防止群体近交衰退等方面具有重要作用。论文介绍了我国动物种质资源的特点以及相关动物种质资源保护理论,在此基础上详细综述了国内外精子冷冻、卵母细胞冷冻、胚胎冷冻以及体细胞冷冻技术的发展和研究进展,结合动物种质资源保护应用中的实际,提出了未来冷冻保存在动物种质资源保护利用中需要解决的科学问题和技术问题。论文对于我国目前开展的动物种质资源保护和研究具有重要的参考价值。 展开更多

关键词 动物种质资源 精子 卵母细胞 体细胞 胚胎 冷冻技术

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乳房炎奶牛组织和血液病理学研究进展 被引量：11

7

作者 齐宏亮 李婧 +1 位作者 张涌 高明清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第8期99-102,共4页

奶牛乳房炎是由于机体代谢和生理状态改变、乳房损伤及接触传染性或环境性病原微生物等引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一。论文从临床症状、组织学变化及血液病理学角度综述了近年来奶牛乳房炎的最新研究进展,为奶牛乳房炎的... 奶牛乳房炎是由于机体代谢和生理状态改变、乳房损伤及接触传染性或环境性病原微生物等引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一。论文从临床症状、组织学变化及血液病理学角度综述了近年来奶牛乳房炎的最新研究进展,为奶牛乳房炎的诊断、治疗和预防提供参考资料。 展开更多

关键词 奶牛乳房炎 组织病理学 血液学 急性时相蛋白

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MiR-302/367在体细胞向多能性干细胞重编程中的作用 被引量：1

8

作者 朱海鲸 唐芙蓉 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1002-1009,共8页

MicroRNA-302／367（miR-302／367）发现于2003年，是一类长度在21～22nt的miRNA簇，与多能性干细胞自我更新及多向分化有重要关系．在体细胞向多能性干细胞重编程中具有重要作用．miR-302／367簇中各miRNA具有相对保守的种子区及靶基... MicroRNA-302／367（miR-302／367）发现于2003年，是一类长度在21～22nt的miRNA簇，与多能性干细胞自我更新及多向分化有重要关系．在体细胞向多能性干细胞重编程中具有重要作用．miR-302／367簇中各miRNA具有相对保守的种子区及靶基因，主要通过抑制靶基因蛋白质的翻译，从而促进间质．上皮转化（mesenchymal-epithelial transition，MET）、抑制细胞周期、调控细胞分化相关基因及表观遗传水平等方式促进体细胞向多能性细胞重编程．本文对miR-302／367的发现、结构、miR．302／367在多能性细胞中的作用及在体细胞向多能性干细胞重编程中的作用及其机理等做一综述． 展开更多

关键词 微小核糖核酸簇302 367 体细胞重编程 微小核糖核酸簇

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microRNA-139对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响 被引量：1

9

作者 王轶敏 张琬 +5 位作者 张蔚然 代阳 刘新峰 李新 郭宏 丁向彬 《天津农学院学报》 CAS 2016年第2期6-10,共5页

为探究microRNA-139(miR-139)在体内对小鼠失神经腓肠肌是否具有一定的作用,本研究建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,然后将10 nmol miR-139 inhibitors注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后qRT-PCR检测miR-139的表达量,比较肌肉湿重和... 为探究microRNA-139(miR-139)在体内对小鼠失神经腓肠肌是否具有一定的作用,本研究建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,然后将10 nmol miR-139 inhibitors注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后qRT-PCR检测miR-139的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,RT-PCR和Western blot检测MHC的表达量,研究miR-139表达改变对肌肉发育的影响。结果显示:与对照相比,miR-139 inhibitors注射后显著增加失神经肌肉萎缩部位的肌纤维直径,说明miR-139对体内肌肉的发育分化过程具有一定的调控作用。 展开更多

关键词 小鼠 失神经 肌萎缩 microRNA-139

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山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化 被引量：2

10

作者 杜珊 马保华 +3 位作者 李亮亮 刘军 赵晓娥 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期159-166,共8页

为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了... 为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200V)、不同电击时长(5、10、15、20ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条件对山羊乳腺上皮细胞进行人β-防御素3基因转染,经过G418筛选,最终获得单克隆细胞,同时对获得的单克隆阳性细胞进行体外诱导表达,并对诱导产物进行Western blotting鉴定。结果表明,不同遗传背景的细胞对转染效率的影响较小,而第1代培养的细胞转染效率要显著高于传代细胞,乳腺上皮细胞在电压180V、电击时长15ms、电击1次的条件下转染效率最高,优化条件下转染、筛选和扩增后获得稳定表达人β-防御素3蛋白的单克隆乳腺上皮细胞。研究工作为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺特异性表达载体的检测提供参考资料。 展开更多

关键词 山羊乳腺上皮细胞 电穿孔 转染效率 人β-防御素3基因 诱导表达

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性控奶山羊精液X和Y精子分离比例检测方法的建立 被引量：2

11

作者 何琪富 王宇飞 +3 位作者 张康 康健 张涌 权富生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期107-115,共9页

旨在建立可以定量计算奶山羊精液中X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法,用以检测经过分离的奶山羊精液X和Y精子的数量和比例,为性控技术的开发和生产应用提供技术支撑。本研究选择X、Y染色体中特异基因F9及ZFY片段设计引物,建立... 旨在建立可以定量计算奶山羊精液中X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法,用以检测经过分离的奶山羊精液X和Y精子的数量和比例,为性控技术的开发和生产应用提供技术支撑。本研究选择X、Y染色体中特异基因F9及ZFY片段设计引物,建立标准曲线,优化荧光定量PCR反应体系和条件。通过对阳性标准品梯度稀释以及对60支已知纯度的性控精液进行测定(3次重复)来检验方法的敏感性和可靠性。结果显示,所建立的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,X和Y精子检测灵敏性分别为47和51 copies·μL~(-1);利用该方法对商品化的奶山羊性控冷冻精液中X和Y精子的数量和比例进行计算,其结果与销售公司提供的X和Y精子的纯度无显著差异(P>0.05),表明该方法结果可靠。本研究建立的计算奶山羊X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,灵敏度高,结果可靠,为计算奶山羊精液分离后X、Y精子数量及比例提供了快速可靠的方法。 展开更多

关键词 X和Y精子分离 实时荧光定量PCR 性别控制 奶山羊

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抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备 被引量：2

12

作者 张鸯 陶明亮 +1 位作者 路保通 靳亚平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第3期27-32,38,共7页

【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用... 【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水抗体;采用间接ELISA、单克隆抗体亚型检测试剂盒、免疫印记技术、曲线拟合方案等分别鉴定单抗效价、亚型、特异性和亲和力等特性。【结果】免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5 000以上,细胞融合克隆率为98.96%,阳性克隆率为30.18%,筛选出2株抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤细胞,其培养上清效价均达到1∶800,腹水单抗效价分别为1∶105和1∶2×105,亲和常数分别为2.5×106和2.3×106。制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的亚型均为IgG1类型。【结论】制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体具有较高的效价和较强的亲和力,可用于进一步研究Zhangfei蛋白在机体中的生理作用。 展开更多

关键词 Zhangfei蛋白 抗体效价 细胞融合 单克隆抗体 特异性

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抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2单克隆抗体的制备

13

作者 马延森 李晓 +4 位作者 陈志 兰向丽 武小椿 靳亚平 刘伟 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第3期33-38,共6页

【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21... 【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),进行诱导表达,通过GST亲和层析法纯化GST-Atac2融合蛋白。以GST-Atac2为抗原免疫8周龄的Balb/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株,检测抗体的特异性、效价和亚型,并检测其亲和常数。【结果】PCR扩增获得了目的片段。成功构建了GST-Atac2融合蛋白表达载体,于37℃下220r/min振摇5h,当IPTG终浓度为0.1mmol/L时,GST-Atac2在E.coli BL21(DE3)中高效表达,GST-Atac2融合蛋白大小约为30ku,与预期结果一致。获得1株稳定分泌抗Atac2抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C7。单抗1C7能够特异地识别GST-Atac2蛋白,效价为1∶2×105;亚型鉴定表明其重链为IgG1,所得单克隆抗体的亲和常数为2×105。【结论】获得了1株特异性好、能够稳定分泌抗果蝇Atac2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。 展开更多

关键词 果蝇 Atac2 原核表达 单克隆抗体

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AICAR通过激活Foxc1信号抑制小鼠F9细胞增殖

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作者 艾志营 杨丽萍 +4 位作者 邵婧婧 吴勇延 史晓燕 杜娟 郭泽坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期880-886,共7页

为了探索5-氨基咪唑-4-氨甲酰核糖核苷(AICAR)抑制小鼠F9细胞(F9 embryonal carcinoma cells)增殖的作用机制,本文构建了Foxc1的慢病毒真核表达载体,通过实时定量PCR、免疫荧光染色、双荧光素酶报告基因检测系统以及细胞增殖检测试验,探... 为了探索5-氨基咪唑-4-氨甲酰核糖核苷(AICAR)抑制小鼠F9细胞(F9 embryonal carcinoma cells)增殖的作用机制,本文构建了Foxc1的慢病毒真核表达载体,通过实时定量PCR、免疫荧光染色、双荧光素酶报告基因检测系统以及细胞增殖检测试验,探索AICAR抑制小鼠F9细胞的增殖作用机制.结果发现,AICAR可以在RNA和蛋白水平促进Foxc1的基因表达,并可以作用于核转录因子κB通路.另外在培养液中添加AICAR或过表达Foxc1都能抑制F9细胞的增殖.信号通路报告载体检测发现Foxc1可以激活核转录因子κB通路以及细胞周期相关的通路.总之,本研究证明,AICAR通过激活Foxc1通路及其下游多条信号通路来抑制F9细胞增殖. 展开更多

关键词 5-氨基咪唑-4-氨甲酰核糖核苷(AICAR) FOXC1 F9细胞 增殖

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Luman-N端融合蛋白单克隆抗体的制备

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作者 兰向莉 李晓 +1 位作者 马延森 靳亚平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第2期1-6,共6页

【目的】制备小鼠抗Luman-N端融合蛋白单克隆抗体。【方法】将GST-Luman-N端载体转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳,用电洗脱的方法纯化融合蛋白;以纯化的融合蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/... 【目的】制备小鼠抗Luman-N端融合蛋白单克隆抗体。【方法】将GST-Luman-N端载体转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳,用电洗脱的方法纯化融合蛋白;以纯化的融合蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,利用间接ELISA方法筛选阳性孔,采用有限稀释法进行亚克隆,筛选具有抗体分泌活性的单克隆细胞株;应用Western Blot、间接ELISA等方法进行克隆株稳定性、抗体特性的鉴定。【结果】获得1株能稳定分泌抗Luman-N端融合蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2C8),其腹水ELISA单抗效价为1∶1×107。亚型鉴定和亲和力常数分析表明,2C8产生的单克隆抗体亚型为IgG2b型,其亲和力常数约为1×107。Western Blot分析证明,该株单抗能与原核表达的Luman-N端融合蛋白特异性结合,与GST-LRF-N端融合蛋白没有特异性结合。染色体分析结果表明,2C8细胞株染色体数目为(53±2)对。【结论】获得了抗Luman-N端融合蛋白的抗体,该抗体具有良好的特异性和结合活性,可用于对Luman-N端蛋白的进一步研究。 展开更多

关键词 Luman—N端融合蛋白 间接ELISA 单克隆抗体

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PD0325901和CHIR99021促进牛体细胞克隆胚胎体外发育的研究

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作者 吴新颖 桑元坤 +2 位作者 王勇胜 张涌 华松 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第9期23-30,共8页

【目的】选取MAP2K和GSK3的抑制剂PD0325901、CHIR99021(简称2i)对牛体细胞核移植(SCNT)胚胎进行处理,研究这2种小分子物质对胚胎发育及其多能性基因(OCT4、SOX2、KLF4、DPPA3、CDX2、GATA4、NANOG)表达的影响。【方法】以牛皮肤成纤维... 【目的】选取MAP2K和GSK3的抑制剂PD0325901、CHIR99021(简称2i)对牛体细胞核移植(SCNT)胚胎进行处理,研究这2种小分子物质对胚胎发育及其多能性基因(OCT4、SOX2、KLF4、DPPA3、CDX2、GATA4、NANOG)表达的影响。【方法】以牛皮肤成纤维细胞为供体,牛MⅡ期卵母细胞为受体,构建牛SCNT胚胎,采用添加2i(PD0325901 0.4μmol/L,CHIR99021 3μmol/L)的胚胎培养液体外培养SCNT胚胎72h,以mSOF+DMSO培养液处理的SCNT胚胎及体外受精(IVF)胚胎为对照,统计核移植胚胎体外发育率,并对胚胎多能性相关基因的表达进行实时定量PCR检测。【结果】与对照相比,2i处理能使SCNT胚胎囊胚率和囊胚细胞总数显著增加,凋亡细胞率显著下降,多能性相关基因NANOG和SOX2表达量上调,而细胞分化相关基因GATA4的表达量下调,其他基因表达量变化不显著,从而使SCNT胚胎的发育状态更接近于IVF胚胎。【结论】2i共处理72h可优化SCNT胚胎发育状态。 展开更多

关键词 小分子信号通路抑制剂 体细胞克隆 胚胎发育 牛

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通过自噬调控细胞衰老的研究进展 被引量：8

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作者 薛嘉 谢晓刚 +2 位作者 康健 盘婕 权富生 《动物医学进展》 北大核心 2021年第1期110-115,共6页

自噬是真核细胞清除细胞内聚物及受损细胞器,进而维持细胞内稳态的一种自我保护机制。近年来的研究表明,自噬在细胞衰老的发生发展过程中扮演着重要角色。论文概述了细胞衰老的相关研究,如端粒变化、DNA甲基化改变、自噬等,细胞自噬的... 自噬是真核细胞清除细胞内聚物及受损细胞器,进而维持细胞内稳态的一种自我保护机制。近年来的研究表明,自噬在细胞衰老的发生发展过程中扮演着重要角色。论文概述了细胞衰老的相关研究,如端粒变化、DNA甲基化改变、自噬等,细胞自噬的发展及形成过程,并进一步描述了自噬对细胞衰老的影响,细胞衰老与自噬共同调控通路中关键蛋白mTOR、SIRT1、p53的作用机制,以及通过雷帕霉素、白藜芦醇、亚精胺药物调控细胞自噬水平等方面的研究,以期为延缓细胞衰老相关研究提供参考。 展开更多

关键词 自噬 细胞衰老 雷帕霉素 白藜芦醇 亚精胺

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不同月份产羔奶山羊初乳免疫球蛋白和常乳乳成分检测 被引量：8

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作者 赵晓娥 孙念琴 +5 位作者 宋爱爱 魏强 徐明辉 李延华 王军宁 马保华 《家畜生态学报》 北大核心 2018年第6期62-66,共5页

从产羔母羊初乳免疫球蛋白和泌乳期常乳乳成分角度,对全年不同季节产羔母羊鲜奶质量进行评价。对1月、3月、5月、7月产羔的奶山羊,每批随机选择10只母羊,分别收集母羊产后0d、2d、5d、7d初乳和产后9d及1~6个月的常乳(每月收集一次)。采... 从产羔母羊初乳免疫球蛋白和泌乳期常乳乳成分角度,对全年不同季节产羔母羊鲜奶质量进行评价。对1月、3月、5月、7月产羔的奶山羊,每批随机选择10只母羊,分别收集母羊产后0d、2d、5d、7d初乳和产后9d及1~6个月的常乳(每月收集一次)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测初乳液中免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)水平,采用全自动乳样分析仪分析常乳样品中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物的含量。结果表明,1月、3月、5月、7月产羔母羊产后相同泌乳阶段初乳中IgA和IgG含量无显著差异(P>0.05),变化趋势一致。不同月份产羔母羊常乳中乳糖含量在相同泌乳期无显著性差异(P>0.05),脂肪、蛋白质、非脂固形物和总脂固型物在部分泌乳阶段存在明显差异;在整个泌乳期间,1月、3月、5月、7月产羔母羊常乳中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和总脂固形物(干物质)含量%变化趋势一致,其变化范围为3.31%~3.45%,4.91%~5.77%,4.03%~4.20%,8.48%~8.88%,13.72%~15.07%;乳脂和总脂固形物含量偏高,但没有降低羊奶的质量。通过对乳成分含量的检测,为后期调整奶山羊日粮组成以保证不同月份产羔母羊的乳品质提供数据基础。 展开更多

关键词 免疫球蛋白A(IgA) 免疫球蛋白G(IgG) 乳成分 奶山羊

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雌激素及其受体调控卵母细胞成熟的研究进展 被引量：6

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作者 葛均邦 赵慧 马保华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1919-1925,共7页

目前很多女性受到不孕不育、自然流产和出生缺陷等诸多生殖相关疾病的困扰,其主要原因为生殖细胞减数分裂异常和卵母细胞质量下降。雌激素不仅参与调控哺乳动物的发情和性行为,也参与调控卵母细胞的生长发育。雌激素受体作为类固醇激素... 目前很多女性受到不孕不育、自然流产和出生缺陷等诸多生殖相关疾病的困扰,其主要原因为生殖细胞减数分裂异常和卵母细胞质量下降。雌激素不仅参与调控哺乳动物的发情和性行为,也参与调控卵母细胞的生长发育。雌激素受体作为类固醇激素受体的一种,在介导雌激素发挥基因组效应和非基因组效应中有着重要的作用。目前关于雌激素受体调控卵母细胞成熟的报道多集中于硬骨鱼类,特别是新型膜受体GPR30,而在哺乳动物方面的研究鲜有报道。因此作者介绍了雌激素核受体ERα、ERβ与新型膜受体GPR30的结构与分布,简述了膜受体GPR30的不同类型配体的研究进展,综述了雌激素受体在调控卵母细胞发育中的相互作用,发现雌激素的核受体与膜受体在卵母细胞成熟的过程中可能发挥不同的调控作用,并进一步阐述了雌激素及其受体在卵母细胞成熟过程中的潜在调控机制。 展开更多

关键词 雌激素 雌激素受体 卵母细胞 成熟调控

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神经钙蛋白δ的功能及其分子作用机制

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作者 邵婧婧 艾志营 郭泽坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期856-862,共7页

神经钙蛋白δ(neurocalcinδ)作为神经钙敏感蛋白(neuronal calcium sensors,NCSs)家族的重要成员之一,具有分布广泛、结构较保守的特性.早期研究发现,神经钙蛋白δ具有两对EF手结构(EF1,EF2,EF3和EF4).EF1不能结合Ca2+,而EF2、EF3和EF4... 神经钙蛋白δ(neurocalcinδ)作为神经钙敏感蛋白(neuronal calcium sensors,NCSs)家族的重要成员之一,具有分布广泛、结构较保守的特性.早期研究发现,神经钙蛋白δ具有两对EF手结构(EF1,EF2,EF3和EF4).EF1不能结合Ca2+,而EF2、EF3和EF4与Ca2+结合能促使其N端豆蔻酰暴露,进而实现其由细胞质到细胞质膜的转移定位以及与靶蛋白的结合,从而发挥重要效应.本综述根据神经钙蛋白δ的"Ca2+-豆蔻酰基开关"特性,一方面介绍其能与膜鸟苷酸环化酶反应,参与cGMP信号转导,进而影响视觉和嗅觉,甚至血压等生物学活动;另一方面,介绍神经钙蛋白δ通过与S100β、网格蛋白、肌动蛋白、微管等蛋白质之间的相互作用,并参与细胞内囊泡运输,从而影响细胞内大分子包装、运输等过程.本文还阐明了神经钙蛋白δ参与精子发生、细胞癌变、肾病发生等过程.由于神经钙蛋白δ对了解某些疾病的发生原理、信号转导过程、细胞内信息调控网络等具有重要意义,本综述将为研究相关疾病提供新的研究方向与理论基础. 展开更多

关键词 神经钙蛋白δ 钙信号 分子作用机制

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