本试验对犬冠状病毒核衣壳蛋白编码的基因进行原核表达,并进行生物信息分析。结果显示,成功获得N基因,全长为1149 bp,编码382个氨基酸。SDS-PAGE显示,His-N重组蛋白主要以包涵体形式表达,大小约为62 ku。W estern blot分析表明成功表达...本试验对犬冠状病毒核衣壳蛋白编码的基因进行原核表达,并进行生物信息分析。结果显示,成功获得N基因,全长为1149 bp,编码382个氨基酸。SDS-PAGE显示,His-N重组蛋白主要以包涵体形式表达,大小约为62 ku。W estern blot分析表明成功表达目的蛋白。生物信息分析发现CCo V BC-1株与CCo V A76株和CCo V HLJ-072株亲缘关系较近;CCo V N蛋白中含有3个结构域和9个潜在的优势抗原表位。展开更多
2017年7月,南方某猪场发生不明病原引起的猪水疱性疾病。为了确诊本次水疱性疾病的病因及了解病原的遗传演化关系,笔者通过RT-PCR方法对引起该场水疱性疾病的病原进行检测,利用BHK21细胞分离病毒,RT-PCR、电镜观察等方法对分离病毒进行...2017年7月,南方某猪场发生不明病原引起的猪水疱性疾病。为了确诊本次水疱性疾病的病因及了解病原的遗传演化关系,笔者通过RT-PCR方法对引起该场水疱性疾病的病原进行检测,利用BHK21细胞分离病毒,RT-PCR、电镜观察等方法对分离病毒进行鉴定,同时对其主要的抗原基因VP1进行比对分析。RT-PCR检测结果表明导致该猪场发生水疱性疾病的病原为A型塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA),将利用BHK21细胞分离并经鉴定的病毒命名为CH/FuJ1/2017株。同源性分析结果显示,CH/FuJ1/2017株与报道的SVV-001株的相似性最低,与分离自美国的USA-GBI29-2015株的相似性最高。基于SVA VP1基因氨基酸序列的分析结果表明,SVA分离株形成一个独立的小分支,与SVV-001株相比,SVA分离株在VP1蛋白的59、62、63、93、97、172位氨基酸存在突变,且位于VP1蛋白的B-C环上和CD-Ⅱ环上,这可能与SVA的细胞嗜性改变有关。综上表明我国SVA分离株具有遗传多样性,部分国内分离株与国外SVA分离株间具有密切的相关性。展开更多
文摘本试验对犬冠状病毒核衣壳蛋白编码的基因进行原核表达,并进行生物信息分析。结果显示,成功获得N基因,全长为1149 bp,编码382个氨基酸。SDS-PAGE显示,His-N重组蛋白主要以包涵体形式表达,大小约为62 ku。W estern blot分析表明成功表达目的蛋白。生物信息分析发现CCo V BC-1株与CCo V A76株和CCo V HLJ-072株亲缘关系较近;CCo V N蛋白中含有3个结构域和9个潜在的优势抗原表位。
文摘2017年7月,南方某猪场发生不明病原引起的猪水疱性疾病。为了确诊本次水疱性疾病的病因及了解病原的遗传演化关系,笔者通过RT-PCR方法对引起该场水疱性疾病的病原进行检测,利用BHK21细胞分离病毒,RT-PCR、电镜观察等方法对分离病毒进行鉴定,同时对其主要的抗原基因VP1进行比对分析。RT-PCR检测结果表明导致该猪场发生水疱性疾病的病原为A型塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA),将利用BHK21细胞分离并经鉴定的病毒命名为CH/FuJ1/2017株。同源性分析结果显示,CH/FuJ1/2017株与报道的SVV-001株的相似性最低,与分离自美国的USA-GBI29-2015株的相似性最高。基于SVA VP1基因氨基酸序列的分析结果表明,SVA分离株形成一个独立的小分支,与SVV-001株相比,SVA分离株在VP1蛋白的59、62、63、93、97、172位氨基酸存在突变,且位于VP1蛋白的B-C环上和CD-Ⅱ环上,这可能与SVA的细胞嗜性改变有关。综上表明我国SVA分离株具有遗传多样性,部分国内分离株与国外SVA分离株间具有密切的相关性。
