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一例牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定和药敏试验
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作者 宫震 付修龙 +4 位作者 金映红 薛晶 李月 张凌 夏俊 《草食家畜》 2025年第1期23-28,共6页
【目的】新疆某牛场2头犊牛突然死亡,本试验旨在明确此次发病的病原,为牛场疫病防控提供指导。【方法】无菌采集2份突然死亡的犊牛脏器和肠道样品,从脏器中分离纯化出1株细菌,对其进行培养特性观察、PCR鉴定和药敏试验。【结果】结果显... 【目的】新疆某牛场2头犊牛突然死亡,本试验旨在明确此次发病的病原,为牛场疫病防控提供指导。【方法】无菌采集2份突然死亡的犊牛脏器和肠道样品,从脏器中分离纯化出1株细菌,对其进行培养特性观察、PCR鉴定和药敏试验。【结果】结果显示分离细菌为产气荚膜梭菌,该分离菌株对氨苄西林、头孢噻呋钠、环丙沙星等抗生素敏感性较高,对链霉素、卡那霉素、替米考星等不敏感。【结论】结果表明,此次导致牛场犊牛突然死亡的病原为产气荚膜梭菌,对氨苄西林、头孢噻呋钠、环丙沙星等抗生素敏感,对链霉素、卡那霉素、替米考星等抗生素耐药。 展开更多
关键词 分离鉴定 产气荚膜梭菌 药敏试验
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肺炎克雷伯菌与链球菌双重PCR检测方法的构建 被引量:1
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作者 王一霖 王燕 +4 位作者 梁纤纤 郭明强 樊晓慧 夏俊 苏战强 《草食家畜》 2024年第3期51-59,共9页
【目的】旨在建立一种可同时检测肺炎克雷伯菌和链球菌的双重PCR检测方法。【方法】选取肺炎克雷伯菌KP-Khe基因和链球菌EF-Tu基因保守片段,分别合成2对特异性引物,优化双重PCR反应体系,摸索其特异性、最佳退火温度、引物浓度和细菌核... 【目的】旨在建立一种可同时检测肺炎克雷伯菌和链球菌的双重PCR检测方法。【方法】选取肺炎克雷伯菌KP-Khe基因和链球菌EF-Tu基因保守片段,分别合成2对特异性引物,优化双重PCR反应体系,摸索其特异性、最佳退火温度、引物浓度和细菌核酸浓度,并通过该方法对临床样品进行检测验证。【结果】该双重PCR检测方法可有效扩增出肺炎克雷伯菌和链球菌的489bp和197bp的特异性片段,最适退火温度为58℃、最适引物浓度为12ng/µL、最适模板浓度为3ng/µL。将该方法应用于临床对15份样品进行检测,其中2份样品检测出肺炎克雷伯菌呈阳性,1份样品检测出链球菌呈阳性,与分离鉴定结果一致。【结论】该研究建立的双重PCR技术,可为临床诊断肺炎克雷伯菌、链球菌及混合感染提供了一种便捷高效的检测方法,具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 链球菌 双重PCR
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绵羊源溶血性曼氏杆菌A2型的分离鉴定及耐药性分析 被引量:1
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作者 梁纤纤 郑启铭 +7 位作者 李晓卓 冯继红 李月 刘文锴 韩翔舒 阿卜杜热合曼·努尔麦麦提 苏战强 夏俊 《草食家畜》 2024年第1期42-46,共5页
【目的】新疆某羊场的羊出现精神沉郁、咳嗽气喘、消瘦等症状,为确定此次发病病原。【方法】该羊场共送检4份病羊肺脏,从肺脏中分离培养了一株细菌并对其进行培养特性观察、PCR鉴定、血清型鉴定、药敏试验和动物致病性试验。【结果】结... 【目的】新疆某羊场的羊出现精神沉郁、咳嗽气喘、消瘦等症状,为确定此次发病病原。【方法】该羊场共送检4份病羊肺脏,从肺脏中分离培养了一株细菌并对其进行培养特性观察、PCR鉴定、血清型鉴定、药敏试验和动物致病性试验。【结果】结果显示分离出的一株革兰氏阴性菌,其形状及大小疑似溶血性曼氏杆菌;PCR鉴定结果显示为溶血性曼氏杆菌,分离菌株血清型为A2型。该分离菌株对青霉素、头孢唑林、氨苄西林等敏感;在致病性试验中,小鼠在15 h内陆续死亡,说明该菌株具有一定致病力。【结论】该病例致病原为A2型溶血性曼氏杆菌,对青霉素、头孢唑林、氨苄西林等敏感。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌 绵羊源 血清型
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1株牛源冠状病毒的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 刘文锴 汪萍 +8 位作者 金映红 薛晶 李月 梁纤纤 李晓卓 韩翔舒 郑启铭 蒋松 夏俊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3100-3108,共9页
【目的】获得新疆地区牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)毒株,探究BCoV体外分离的最佳条件,了解BCoV新疆株的遗传进化情况,为BCoV疫苗候选株提供研究基础。【方法】通过RT-PCR对来自新疆地区7个牛场的腹泻犊牛小肠及其内容物(n=185)... 【目的】获得新疆地区牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)毒株,探究BCoV体外分离的最佳条件,了解BCoV新疆株的遗传进化情况,为BCoV疫苗候选株提供研究基础。【方法】通过RT-PCR对来自新疆地区7个牛场的腹泻犊牛小肠及其内容物(n=185)进行BCoV检测,将阳性样本经过处理后接种HCT-8细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blotting和透射电镜对分离的病毒进一步鉴定,通过Reed-Muench法测定分离株的半数组织培养感染剂量(TCID50),将分离毒株进行全基因组测序,并对测序结果进行遗传进化分析。【结果】腹泻样品BCoV检出率为64.9%,接种HCT-8细胞后成功分离到1株BCoV,命名为XJ-SHZ-37(GenBank登录号:OR750853);IFA可观察到孵育病毒的细胞有绿色的特异性荧光,而对照组没有;Western blotting检测结果显示,该分离株与BCoV N蛋白多克隆抗体发生特异性反应;透射电镜可观察到呈皇冠状的病毒颗粒;Reed-Muench法测定分离株的TCID50为10-7.9/0.1 mL;基因组测序及遗传进化结果表明,XJ-SHZ-37与从牛中分离到的冠状病毒科冠状病毒属的BCoV分离株ZJNB2106相似性最高。【结论】新疆地区7个牛场有较高的BCoV检出率,成功分离出1株能稳定遗传且能与BCoV N蛋白多克隆抗体特异性结合的分离株,该分离株有较高的病毒滴度,且通过遗传进化关系表明与中国牛源毒株ZJNB2106株进化亲缘关系最近。 展开更多
关键词 牛冠状病毒(BCoV) 分离鉴定 全基因测序 遗传进化
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牛肠道大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析
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作者 郑启铭 梁纤纤 +6 位作者 李晓卓 李月 刘文锴 韩翔舒 冯继红 翟少华 夏俊 《草食家畜》 2024年第1期31-36,共6页
【目的】新疆昌吉市周边某牛场大量犊牛严重腹泻,排黄色水样稀便,有的带血,并出现精神萎靡、食欲不振等症状,为确定此次发病的病原并提供治疗参考。【方法】通过对该牛场出现的犊牛腹泻粪样进行细菌鉴定及分型并进行耐药性分析。【结果... 【目的】新疆昌吉市周边某牛场大量犊牛严重腹泻,排黄色水样稀便,有的带血,并出现精神萎靡、食欲不振等症状,为确定此次发病的病原并提供治疗参考。【方法】通过对该牛场出现的犊牛腹泻粪样进行细菌鉴定及分型并进行耐药性分析。【结果】PCR鉴定结果显示为大肠杆菌阳性,染色镜检结果符合大肠杆菌形态特征,分离菌株具有K99黏附性基因。药敏试验结果显示该分离菌株仅对多黏菌素B中介(既不敏感也不耐药),对其他所有受试抗菌药物耐药。在致病性试验中,小鼠在15 h内陆续死亡,说明该菌株具有一定致病力。【结论】结果表明,该牛场犊牛腹泻粪便中分离的菌株为产肠毒素性大肠杆菌,携带K99毒力基因,对多黏菌素B中介,具有一定致病力。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠杆菌 药敏试验 K99
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荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌与牛肺炎支原体混合感染犊牛的诊断分析 被引量:1
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作者 李晓卓 冯继红 +3 位作者 梁纤纤 郑启铭 刘文锴 夏俊 《现代农业科技》 2024年第11期175-179,共5页
新疆某牛场的犊牛出现咳喘、鼻镜干燥、精神不振、食欲减退、呼吸困难甚至死亡的症状,通过剖检、细菌分离鉴定、PCR鉴定等方法对其进行检查。结果显示:死亡牛只肺部可见明显出血并且伴有肺部实质性肝变;牛肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌PC... 新疆某牛场的犊牛出现咳喘、鼻镜干燥、精神不振、食欲减退、呼吸困难甚至死亡的症状,通过剖检、细菌分离鉴定、PCR鉴定等方法对其进行检查。结果显示:死亡牛只肺部可见明显出血并且伴有肺部实质性肝变;牛肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌PCR检测都为阳性,溶血性曼氏杆菌PCR检测为阴性。通过实验室诊断,最终确定本次疾病为多杀性巴氏杆菌和牛肺炎支原体引起的混合感染。本研究通过病理变化、实验室诊断等方法找到病因,为此类疾病的防控提供借鉴。 展开更多
关键词 犊牛 多杀性巴氏杆菌 牛肺炎支原体 混合感染 分离鉴定 诊断
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牛源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析 被引量:1
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作者 梁纤纤 李威 +6 位作者 郑启铭 李晓卓 张凌 刘文锴 韩翔舒 苏战强 夏俊 《草食家畜》 2023年第5期13-17,共5页
【目的】新疆某牛场的犊牛发生严重腹泻,出现排血便、黄色水样稀便、精神萎靡、食欲不振等症状。为了确定此次发病的病原做了此实验。【方法】无菌采集了20份犊牛粪便样品,从粪便中分离纯化出1株细菌,并对其进行培养特性观察、PCR鉴定... 【目的】新疆某牛场的犊牛发生严重腹泻,出现排血便、黄色水样稀便、精神萎靡、食欲不振等症状。为了确定此次发病的病原做了此实验。【方法】无菌采集了20份犊牛粪便样品,从粪便中分离纯化出1株细菌,并对其进行培养特性观察、PCR鉴定、黏附性基因检测、药敏试验和动物致病性试验。【结果】结果显示分离到了一株革兰氏阴性菌,根据形状和大小判断疑似大肠杆菌;PCR鉴定结果显示为大肠杆菌,分离菌株具有F41黏附性基因。该分离菌株对多黏菌素B、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮等敏感;在致病性试验中,小鼠在15h内陆续死亡,说明该菌株具有一定致病力。【结论】结果表明,此次牛场犊牛腹泻分离的菌株为产肠毒素性大肠杆菌,携带F41毒力基因,对多黏菌素B、阿米卡星等抗生素敏感,具有一定致病力。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠杆菌 药敏试验 F41
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