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H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白150-Loop结构域多态性变异对抗原性的影响
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作者 董金泽 赵传阔 +1 位作者 王林林 蒲娟 《中国家禽》 北大核心 2025年第11期75-83,共9页
为了解我国流行的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)蛋白150-Loop结构域多态性变异对抗原性的影响,研究通过反向遗传系统拯救多种H9N2150-Loop组合突变株,利用血凝抑制(HI)试验对其抗原性变化进行检测。结果显示:我国H9N2AIV流行毒株... 为了解我国流行的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)蛋白150-Loop结构域多态性变异对抗原性的影响,研究通过反向遗传系统拯救多种H9N2150-Loop组合突变株,利用血凝抑制(HI)试验对其抗原性变化进行检测。结果显示:我国H9N2AIV流行毒株的多态性组合主要包括早期分支毒株特征的_(145)TQKNNA_(150),以及当前B4.7分支毒株特征的_(145)TRKDGN_(150)、_(145)TRKNGE_(150)、_(145)TRKNGD_(150)和_(145)TRKNGN_(150)类型,在早期分支毒株上分别替换了B4.7分支的4种突变组合的突变株均被成功拯救;组合突变株与野生株产生了明显抗原性差异,抗原距离大于2个抗原单位,但4种突变株之间抗原性差异有限,抗原距离均小于1个抗原单位。该抗原性变异也通过微量中和试验和同源建模预测得到了进一步的验证。研究表明,B4.7分支与早期分支间出现的150-Loop变异对抗原漂移的产生起到重要作用,但是B4.7分支内的多态性组合变化尚未构成抗原漂移,结果为H9N2亚型禽流感临床防控和抗原性评估提供了理论依据。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 HA蛋白 150-Loop 抗原性
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H9N2亚型禽流感病毒PB2蛋白哺乳动物适应性变异的筛选与功能鉴定
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作者 郭雨欣 蒲娟 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期1-9,共9页
研究旨在鉴定H9N2亚型禽流感病毒PB2基因进化产生的哺乳动物适应性突变并明确其在哺乳动物宿主中的复制能力和致病性。试验通过建立中国源H9N2亚型禽流感病毒PB2氨基酸序列库、利用多态性分析以及聚合酶活性检测,筛选出PB2基因演化出的... 研究旨在鉴定H9N2亚型禽流感病毒PB2基因进化产生的哺乳动物适应性突变并明确其在哺乳动物宿主中的复制能力和致病性。试验通过建立中国源H9N2亚型禽流感病毒PB2氨基酸序列库、利用多态性分析以及聚合酶活性检测,筛选出PB2基因演化出的潜在适应性位点,并进一步利用哺乳动物细胞以及小鼠模型明确新突变的哺乳动物适应性。结果显示:PB2氨基酸序列中存在12个具有明显多态性的位点,其中PB2-340K、PB2-588V以及PB2-627V的变化趋势与自2015年起人感染病例增加呈正相关,并表现明显的人宿主偏好;这3个突变中,PB2-E627V显著增强了H9N2亚型禽流感病毒在人源293T细胞中聚合酶活性,并且显著提高了H9N2亚型禽流感病毒在哺乳动物细胞中的复制能力以及在小鼠中的病毒载量和致病性。以上研究表明,H9N2亚型禽流感病毒PB2蛋白表现出哺乳动物适应性进化特点,并且能够增强对小鼠的致病性,带来跨宿主感染风险。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2 哺乳动物适应性 PB2基因 E627V 聚合酶活性
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两株H9N2亚型禽流感病毒受体结合特性和致病性研究
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作者 赵传阔 李甜 +1 位作者 董金泽 蒲娟 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期10-17,共8页
为研究临床监测中分离两株H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Henan/F1108/2019及A/chicken/Shandong/F07/2021跨种感染哺乳动物能力,试验构建了H9基因系统发生树,采用红细胞吸附试验及固相结合试验测定两株病毒受体结合特性,并通过小鼠感染... 为研究临床监测中分离两株H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Henan/F1108/2019及A/chicken/Shandong/F07/2021跨种感染哺乳动物能力,试验构建了H9基因系统发生树,采用红细胞吸附试验及固相结合试验测定两株病毒受体结合特性,并通过小鼠感染试验探究两株病毒对小鼠感染性及致病性。结果显示:A/chicken/Henan/F1108/2019及A/chicken/Shandong/F07/2021与近些年人及禽分离毒株进化关系较近;A/chicken/Henan/F1108/2019主要结合α-2,3唾液酸,而A/chicken/Shandong/F07/2021主要结合α-2,6唾液酸;A/chicken/Henan/F1108/2019在小鼠鼻甲及肺脏中的复制能力及致病性均强于A/chicken/Shandong/F07/2021。研究表明具有α-2,3唾液酸受体结合特性的H9N2亚型禽流感病毒在鸡群中仍然存在,且分离株对小鼠具有较强的致病性。 展开更多
关键词 H9N2 AIV HA蛋白 受体结合特性 致病性 小鼠
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PB2基因在流感病毒跨物种传播和哺乳动物适应性中的作用及机制研究进展 被引量:1
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作者 郭雨欣 周栋梁 +1 位作者 蒲娟 张蕊 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期121-131,共11页
近年来,随着禽流感病毒感染人病例的不断增加,对其跨物种传播和哺乳动物适应性的研究备受关注。作为RNA聚合酶复合体的重要组成部分,PB2蛋白在流感病毒转录复制和宿主适应性中发挥关键作用。PB2的特定氨基酸位点突变以及不同亚型流感病... 近年来,随着禽流感病毒感染人病例的不断增加,对其跨物种传播和哺乳动物适应性的研究备受关注。作为RNA聚合酶复合体的重要组成部分,PB2蛋白在流感病毒转录复制和宿主适应性中发挥关键作用。PB2的特定氨基酸位点突变以及不同亚型流感病毒间的交换重组,能够改变病毒在宿主细胞中的聚合酶活性,进而影响病毒的宿主范围和致病性,促进病毒跨物种传播的能力。此外,PB2蛋白还通过与宿主关键因子的相互作用参与调控病毒对不同哺乳动物的宿主适应性。文章对PB2蛋白的结构和功能特征及其在哺乳动物适应性机制方面的最新研究进展进行归纳总结,为揭示流感病毒跨物种传播机制及相关防控手段的完善提供参考信息。 展开更多
关键词 流感病毒 PB2基因 跨物种传播 哺乳动物适应性 分子机制
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高亲和力鸡γ-干扰素兔源单克隆配对抗体的制备及鉴定
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作者 陈天祥 张庆如 +1 位作者 张念之 孙怡朋 《中国家禽》 北大核心 2025年第10期60-68,共9页
为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ)兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单B细胞分选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的... 为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ)兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单B细胞分选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的亲和力及配对性能进行系统评估。结果显示:共获得3株单克隆抗体(38-9、56-3和68-7),解离常数(KD)值均达10^(-12)mol/L,显示出极高的亲和力;56-3与38-9和68-7之间无竞争关系,而38-9与68-7之间存在明显竞争,由此可构建56-3/38-9和56-3/68-7两对稳定的配对抗体。研究表明,试验获得的3株单克隆抗体具备高亲和力和良好的配对特性,适用于chIFN-γ的高灵敏免疫检测,为禽类细胞免疫应答监测及chIFN-γ免疫功能研究提供了关键工具。 展开更多
关键词 鸡γ-干扰素 兔源单克隆抗体 流式细胞分选技术 生物膜干涉技术 配对抗体
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