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RUBY辅助的水稻高效CRISPR基因编辑
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作者 邓美壁 严浪 +2 位作者 詹志田 朱敏 和玉兵 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期65-73,共9页
【目的】开发一种RUBY辅助的可视化筛选转基因植株并有效指示基因编辑发生的CRISPR/Cas9基因编辑载体GCR。【方法】将RUBY与Cas9/g RNA的表达盒偶联到一起得到GCR载体,使用水稻的OsAGO2、OsAGO3、OsAGO7为靶基因,分别构建多基因编辑载体... 【目的】开发一种RUBY辅助的可视化筛选转基因植株并有效指示基因编辑发生的CRISPR/Cas9基因编辑载体GCR。【方法】将RUBY与Cas9/g RNA的表达盒偶联到一起得到GCR载体,使用水稻的OsAGO2、OsAGO3、OsAGO7为靶基因,分别构建多基因编辑载体GCR-237-1和多基因编辑载体GCR-237-2,以水稻ZH11(Zhonghua 11)为受体材料进行农杆菌介导水稻遗传转化获得基因编辑植株。【结果】GCR-237-1和GCR-237-2转化入水稻愈伤后,RUBY标记可以有效指示转基因阳性事件,并且稳定转化得到的红色植株的靶基因被高效编辑。【结论】利用基因编辑载体GCR可有效编辑水稻基因且通过肉眼直观观察即可有效指示转基因乃至基因编辑植株。 展开更多
关键词 遗传转化 基因编辑 CRISPR RUBY 水稻
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基于CRISPR/LanCas9的水稻基因编辑系统的开发和优化
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作者 李欣格 王美霞 +4 位作者 王晨阳 马桂根 周常勇 王亚南 周焕斌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期233-242,共10页
【目的】在水稻中建立CRISPR/LanCas9和CRISPR/SLanCas9基因编辑系统,扩展CRISPR/Cas基因编辑工具箱。【方法】将来自动物乳酸杆菌KCTC 3501的LanCas9进行密码子优化,并且进一步通过蛋白融合重组LanCas9和SpCas9的活性结构域形成嵌合体S... 【目的】在水稻中建立CRISPR/LanCas9和CRISPR/SLanCas9基因编辑系统,扩展CRISPR/Cas基因编辑工具箱。【方法】将来自动物乳酸杆菌KCTC 3501的LanCas9进行密码子优化,并且进一步通过蛋白融合重组LanCas9和SpCas9的活性结构域形成嵌合体SLanCas9,分别构建CRISPR/LanCas9和CRISPR/SLanCas9编辑工具;以OsWRKY45、OsCPK4、OsCPK6、OsCPK7、OsMPK8、OsGSK3、OsGSK4为靶基因,在NGG PAM或者NAG PAM设计20 nt或者24 nt的sgRNA,通过水稻遗传转化,检测分析其编辑效率。【结果】LanCas9在水稻中可以识别NGG PAM,结合20 nt的sgRNA编辑效率更高,对OsWRKY45基因的编辑效率为25.00%;融合的SLanCas9不仅能够识别NGG PAM,在NAG PAM位点也有一定的编辑效率,在不同PAM位点的编辑效率分别可达100%和39.58%。此外,SLanCas9还具有多重基因编辑能力,在NGG PAM位点的多重基因编辑效率高达74.07%。【结论】开发了具有自主知识产权的新型CRISPR/LanCas9和CRISPR/SLanCas9基因编辑技术。 展开更多
关键词 CRISPR LanCas9 SLanCas9 基因编辑 水稻
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云南草地贪夜蛾田间种群对Bt毒素的抗性基因频率监测研究
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作者 康强强 靳明辉 +3 位作者 杨现明 吴孔明 李怡萍 萧玉涛 《环境昆虫学报》 2025年第5期1440-1446,共7页
转基因Bt作物的广泛应用和产业化推广不仅有效遏制了虫害的大规模暴发,显著减少了化学农药的施用量,更重要的是缓解了由此带来的农药残留及环境污染问题。为了监测我国云南地区草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda田间种群对Bt毒素的抗性,... 转基因Bt作物的广泛应用和产业化推广不仅有效遏制了虫害的大规模暴发,显著减少了化学农药的施用量,更重要的是缓解了由此带来的农药残留及环境污染问题。为了监测我国云南地区草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda田间种群对Bt毒素的抗性,本研究以云南寻甸地区草地贪夜蛾田间种群为研究对象,通过F2代结合诊断剂量法对草地贪夜蛾田间种群进行抗性监测,系统评估了该地区草地贪夜蛾对Bt毒素的抗性水平。检测结果显示,仅发现3个单雌系对Cry1Ab具有低频抗性(抗性等位基因频率为0.006),而对Vip3Aa仍保持高度敏感。本研究表明云南地区草地贪夜蛾种群尚未形成明显抗性,这为该区域Bt转基因作物的可持续推广提供了重要科学依据,并建议继续开展长期监测和抗性治理策略研究。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 苏云金芽孢杆菌 Cry1Ab Vip3Aa 抗性基因频率
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草地贪夜蛾入侵中国七年:研究进展与未来展望
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作者 李洪冉 郭凤彩 +1 位作者 吴超 萧玉涛 《环境昆虫学报》 2025年第5期1396-1415,共20页
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda,FAW是全球重大农业入侵性害虫,被列入我国“一类农作物病虫害名录”。自2018年12月入侵我国以来,草地贪夜蛾迅速扩散至各大农业主产区,给我国玉米等重要粮食作物的安全生产造成严重威胁。本文系统梳理... 草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda,FAW是全球重大农业入侵性害虫,被列入我国“一类农作物病虫害名录”。自2018年12月入侵我国以来,草地贪夜蛾迅速扩散至各大农业主产区,给我国玉米等重要粮食作物的安全生产造成严重威胁。本文系统梳理了我国草地贪夜蛾研究的现状,全面总结了过去七年中在生物型动态、生态适应性、入侵机制、抗性发展及综合防控技术等方面的关键研究成果,对目前研究存在的不足以及后续研究方向进行了展望,并提出了基于最新科研进展的科学治理和精准防控建议,旨在为我国草地贪夜蛾的长期管理和可持续防控提供理论依据与实践指导,同时为全球范围内入侵性害虫的研究与治理提供参考经验。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 生物型 生态适应性 基因组学 抗性 综合防控
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