黑棘鲷仔鱼饥饿实验及不可逆点的确定 被引量：7

1

作者 杨育凯 林黑着 +4 位作者 王志勇 谢仰杰 郭奕惠 黄小林 李涛 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第2期87-94,共8页

在水温18℃~19℃条件下,采用实验生态学方法研究了饥饿对黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)仔鱼存活、生长发育及行为学特征的影响。通过测定仔鱼的初次摄食率和饥饿不可逆点(PNR),确定了初次投喂的最佳时间。结果显示,黑棘鲷仔鱼3日龄... 在水温18℃~19℃条件下,采用实验生态学方法研究了饥饿对黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)仔鱼存活、生长发育及行为学特征的影响。通过测定仔鱼的初次摄食率和饥饿不可逆点(PNR),确定了初次投喂的最佳时间。结果显示,黑棘鲷仔鱼3日龄开口摄食,4日龄卵黄囊消失,6日龄油球消失,混合营养期仅3 d,属容易遭受饥饿胁迫的鱼类。仔鱼开口时初次摄食率仅为30%,之后迅速提高,至5日龄达到最高的90%,之后逐渐下降,7日龄降至45%,到达PNR。饥饿组仔鱼在6日龄后开始出现生理性萎缩,全长与对照组相比差异显著(P<0.05),进入PNR后,仔鱼活动能力显著下降,身体出现扭曲、畸形,死亡率急剧升高,至10日龄全部死亡。黑棘鲷仔鱼耐受饥饿能力较弱,建议开始投饵的最适时机为仔鱼开口后的4 d内。 展开更多

关键词 黑棘鲷 仔鱼 饥饿 不可逆点

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水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积机制研究进展 被引量：2

2

作者 张丽莉 王国栋 +2 位作者 黄世玉 龚筱婷 王艺磊 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1072-1082,共11页

类胡萝卜素是自然界普遍存在的天然色素,对水产动物生长、发育、免疫和体色具有重要作用。水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积能力是遗传改良的重要靶点,对其性状提升具有重要作用。本文综述了水产动物主要类胡萝卜素种类、吸收和代... 类胡萝卜素是自然界普遍存在的天然色素,对水产动物生长、发育、免疫和体色具有重要作用。水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积能力是遗传改良的重要靶点,对其性状提升具有重要作用。本文综述了水产动物主要类胡萝卜素种类、吸收和代谢分子机制,着重介绍了B类清道夫受体(SR-B1)、决定簇36(CD36)、β-胡萝卜素加氧酶1(BCO1)、β-胡萝卜素加氧酶2(BCO2)及细胞色素酶450(P450)家族的CYP2J19和CYP3A80在类胡萝卜素转运和转化中的作用,分析了类胡萝卜素酮化的可能机制和主要类胡萝卜素结合蛋白的特性。针对目前研究中存在的问题,提出通过基因-表型关联分析揭示遗传基础、多组学联合分析筛选鉴定新酮化酶基因、单细胞转录组解析类胡萝卜素沉积过程及筛选与构建体色遗传材料等未来重点研究方向,以期为水产动物类胡萝卜素吸收、代谢和沉积机制的研究提供科学参考。 展开更多

关键词 类胡萝卜素 水产动物 吸收 氧化 胡萝卜素结合蛋白

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杂色鲍caspase-3基因的克隆及其在发育、弧菌感染、高温和缺氧应激中的表达分析 被引量：4

3

作者 卢锡琴 张丽莉 +3 位作者 黄世玉 王国栋 王艺磊 和四梅 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期411-419,共9页

为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍Haliotis diversicolor早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出caspase-3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了caspase-3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温... 为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍Haliotis diversicolor早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出caspase-3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了caspase-3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温应激和缺氧应激处理后的表达情况。结果表明:caspase-3基因的cDNA全长为1192 bp,共编码252个氨基酸,该氨基酸序列具有高度保守的P20和P10活性位点;caspase-3基因在杂色鲍成体的各个组织中均有表达,其中血淋巴中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);在早期发育阶段中受精卵和2细胞期的表达量最高(P<0.05);经副溶血弧菌感染后,血淋巴中caspase-3的表达量在12 h时显著上调(P<0.05);经高温应激处理后,血淋巴和肝胰腺中caspase-3基因的表达量在24 h时显著上调(P<0.05);经缺氧处理后,鳃组织中caspase-3基因的表达量在96 h时出现显著上调(P<0.05),而血淋巴中的表达量在4 h时显著上调(P<0.05)。研究表明,caspase-3基因在杂色鲍早期发育、免疫和应激中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 杂色鲍 CASPASE-3基因 发育 免疫 应激

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大黄鱼生态冰温保活技术的初步研究 被引量：9

4

作者 蔡晓芳 张晓林 +2 位作者 周建频 张东玲 刘贤德 《渔业现代化》 CSCD 2019年第4期69-72,80,共5页

为优化大黄鱼(Larimichthys crocea)活体运输的条件,对大黄鱼的生态冰温进行探索。分析鱼水质量比和暂养时间2个因素对大黄鱼保活时间的影响,在此基础上设计3因素3水平的正交试验,以期找到大黄鱼保活的适合条件。研究结果显示:大黄鱼的... 为优化大黄鱼(Larimichthys crocea)活体运输的条件,对大黄鱼的生态冰温进行探索。分析鱼水质量比和暂养时间2个因素对大黄鱼保活时间的影响,在此基础上设计3因素3水平的正交试验,以期找到大黄鱼保活的适合条件。研究结果显示:大黄鱼的生态冰温为-2℃~7℃;鱼水质量比及暂养时间对大黄鱼保活时间均有显著影响(P<0.05);在温度为5℃~7℃、鱼水质量比为1∶4、暂养时间为48 h的条件下进行保活,保活时间可超过19 h。本研究结果可为大黄鱼活体运输提供参考。 展开更多

关键词 大黄鱼 生态冰温 鱼水质量比 活体运输

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丁香油、MS-222和异丙酚对大黄鱼的麻醉效果分析 被引量：9

5

作者 杨乐 张晓林 刘贤德 《渔业现代化》 CSCD 2021年第2期91-96,共6页

研究了丁香油、间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐(MS-222)和异丙酚对养殖大黄鱼(Larimichthys crocea)的麻醉效果,以期为下一步活体运输麻醉剂的选择提供参考。首先在(20±0.5)℃水温下,对3种麻醉剂的适宜质量浓度进行了探索,初步得出适宜... 研究了丁香油、间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐(MS-222)和异丙酚对养殖大黄鱼(Larimichthys crocea)的麻醉效果,以期为下一步活体运输麻醉剂的选择提供参考。首先在(20±0.5)℃水温下,对3种麻醉剂的适宜质量浓度进行了探索,初步得出适宜的质量浓度分别为:丁香油10 mg/L、MS-22240 mg/L、异丙酚0.2 mg/L。在此质量浓度下,进一步优化了大黄鱼的适宜麻醉水温。结果显示:丁香油在20℃、MS-222在15℃、异丙酚在25℃水温下的麻醉效果较好。根据优化的质量浓度和水温,分别对3种麻醉剂麻醉后的大黄鱼进行模拟运输,发现随着模拟运输时间的延长,3种麻醉剂麻醉后的大黄鱼复苏率均逐渐降低,模拟运输24 h后丁香油和MS-222麻醉的复苏率可达90%,而异丙酚麻醉的复苏率为70%,说明丁香油和MS-222的麻醉效果较好。对丁香油和MS-222经济成本分析表明,丁香油的成本相对较低,更适合作为大黄鱼活体运输的麻醉剂。 展开更多

关键词 大黄鱼 活鱼运输 麻醉剂 丁香油 MS-222 异丙酚

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luxR基因调控嗜水气单胞菌耐药性的分子机制初探 被引量：3

6

作者 毛磊磊 鄢庆枇 +4 位作者 黄力行 张梅梅 王素云 张萌萌 覃映雪 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第4期147-155,共9页

LuxR家族蛋白是一类在革兰氏阴性细菌中发挥重要作用的调控蛋白,参与细菌多项重要生理活动。采用RNAi技术构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) luxR05735稳定沉默菌株luxR05735-RNAi,并利用qRT-PCR检测基因沉默效果。结果显示,与野... LuxR家族蛋白是一类在革兰氏阴性细菌中发挥重要作用的调控蛋白,参与细菌多项重要生理活动。采用RNAi技术构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) luxR05735稳定沉默菌株luxR05735-RNAi,并利用qRT-PCR检测基因沉默效果。结果显示,与野生株相比,沉默株中luxR05735的表达量降低了96.8%。药物敏感性实验表明,与野生株相比,luxR05735-RNAi对庆大霉素、诺氟沙星、卡那霉素、吡哌酸的耐药性显著降低。对野生株与沉默株luxR05735-RNAi的转录组数据进行分析发现,表达差异显著的基因共有1286个,其中,上调基因353个,下调基因933个;显著富集的通路4条,分别是核糖体通路、精氨酸生物合成通路、硫代谢通路、硒化合物代谢通路;在这4条通路中可能与嗜水气单胞菌耐药性相关的重要功能基因包括metE、glnA、rplB、rplX、rpsA、rpsJ等,这些功能基因编码的蛋白主要与细菌的生物成膜及核糖体蛋白合成相关。综合以上研究结果,可以推测嗜水气单胞菌的luxR05735通过调控细菌的生物膜形成相关基因及核糖体蛋白相关基因的表达,从而调控细菌对药物的耐受性。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 LuxR调控蛋白 耐药 转录组

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坛紫菜泛素连接酶PhCUL1基因克隆与功能验证 被引量：1

7

作者 林键章 王文磊 +4 位作者 徐燕 许凯 纪德华 陈昌生 谢潮添 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2021年第1期193-200,共8页

高温影响坛紫菜(Pyropia haitanensis)的产量和品质,是制约紫菜产业发展的主要因素。前期研究发现,高温胁迫下,坛紫菜泛素蛋白酶体系统相关基因显著上调表达,但其响应高温胁迫的分子功能还未知。本研究通过分子生物学、遗传学等技术手... 高温影响坛紫菜(Pyropia haitanensis)的产量和品质,是制约紫菜产业发展的主要因素。前期研究发现,高温胁迫下,坛紫菜泛素蛋白酶体系统相关基因显著上调表达,但其响应高温胁迫的分子功能还未知。本研究通过分子生物学、遗传学等技术手段对坛紫菜cullin E3连接酶基因(PhCUL1)的功能进行研究。利用PCR方法克隆了PhCUL1基因的全长,PhCUL1全长为2500 bp,开放阅读框(ORF)长度为2481 bp,该基因存在1个Cullin(407~618 aa)结构域和1个Cullin Nedd8(754~821 aa)结构域,其中,Cullin Nedd8结构域为蛋白融合位点。进化树分析显示,PhCUL1在进化上与脐形紫菜(Porphyra umbilicalis)有较近的亲缘关系。qRT-PCR结果显示,PhCUL1基因被高温显著诱导。为进一步阐明PhCUL1的分子功能,将其转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)进行功能验证,过表达PhCUL1株系比野生型更能耐受高温胁迫。同时,在高温33℃下处理3 h和6 h内,转基因植株的PhCUL1基因呈上调表达。这初步说明PhCUL1基因在坛紫菜响应高温胁迫过程中发挥着重要作用,其具体调控机制有待进一步研究。本研究有助于阐明坛紫菜泛素蛋白酶体系统响应高温胁迫的分子机制,为指导耐高温新品种选育提供理论依据。 展开更多

关键词 高温 坛紫菜 泛素连接酶 莱茵衣藻 转基因

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坛紫菜转录因子NhbZIP1克隆和功能验证 被引量：1

8

作者 曾高雄 许凯 +4 位作者 徐燕 纪德华 陈昌生 谢潮添 王文磊 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第1期201-209,共9页

高温是制约坛紫菜(Neoporphyra haitanensis)产业发展的主要因素之一,阐明坛紫菜高温胁迫应答机理对耐高温品种选育至关重要。人们已分离多个坛紫菜抗逆相关基因,但尚不清楚这些基因的表达调控机制。本研究通过分子生物学和生物信息学... 高温是制约坛紫菜(Neoporphyra haitanensis)产业发展的主要因素之一,阐明坛紫菜高温胁迫应答机理对耐高温品种选育至关重要。人们已分离多个坛紫菜抗逆相关基因,但尚不清楚这些基因的表达调控机制。本研究通过分子生物学和生物信息学技术分离了坛紫菜转录因子NhbZIP1基因。该基因开放阅读框长825 bp,编码274个氨基酸。从开放阅读框推导的氨基酸序列有5个低复杂度区域和1个BRLZ结构。其中,BRLZ是bZIP家族的保守结构域,含有一个α卷曲螺旋结构(121~171aa)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测发现,NhbZIP1受高温胁迫显著诱导。为进一步阐明NhbZIP1的功能,将其转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)中。结果显示,高温胁迫下转基因藻株生物量始终高于野生型,且随处理时间增加差异越来越显著。转基因藻株中热激蛋白家族和抗氧化系统相关基因的表达量显著高于野生型。研究表明,NhbZIP1激活下游抗逆基因表达,在坛紫菜应答高温胁迫中发挥重要作用。研究结果有助于阐明bZIP调控坛紫菜响应高温胁迫的分子机制,为耐高温新品种选育提供了基础信息。 展开更多

关键词 坛紫菜 高温胁迫 bZIP转录因子 转基因 莱茵衣藻

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大黄鱼slitrk3基因启动子克隆及转录调控分析 被引量：1

9

作者 周锐涛 岳珠峰 +4 位作者 纪焦军 温靖 姜丹 王志勇 方铭 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期68-76,共9页

神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他... 神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他物种的Slitrk3氨基酸进行多重序列比对和系统进化树分析,并预测大黄鱼slitrk3基因启动子区域相关的调控元件,采用双荧光素酶报告基因系统检测大黄鱼slitrk3基因启动子区域的转录活性。生物信息学分析结果显示,Slitrk3氨基酸序列在鱼类中具有较高的保守性;大黄鱼slitrk3基因启动子区域预测存在2个潜在的转录起始位点、2个CpG岛以及Sp1、GR、C/EBPα和C/EBPβ等多种转录因子结合位点。双荧光素酶报告基因系统结果显示,大黄鱼slitrk3基因启动子区域的−1970—−1614 bp、−1210—−667 bp存在正调控元件,−1614—−1210 bp、−667—−376 bp、−376—−147 bp存在负调控元件,推测−147—+16 bp为核心启动子。 展开更多

关键词 大黄鱼 slitrk3基因 启动子 转录调控

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黄姑鱼转录因子激活蛋白AP2α的克隆和特征分析

10

作者 李佳程 苟涛 +4 位作者 肖遥 罗帅 吴宝兰 王志勇 韩芳 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第5期104-114,共11页

转录因子激活蛋白AP2α是一类能特异地结合DNA的核转录因子,参与动物胚胎发育的调节、细胞生长、细胞凋亡、肿瘤发生以及免疫反应等多种生物过程。课题组前期通过基因组关联分析(GWAS)发现,AP2α是黄姑鱼(Nibea albiflora)抗哈维氏弧菌(... 转录因子激活蛋白AP2α是一类能特异地结合DNA的核转录因子,参与动物胚胎发育的调节、细胞生长、细胞凋亡、肿瘤发生以及免疫反应等多种生物过程。课题组前期通过基因组关联分析(GWAS)发现,AP2α是黄姑鱼(Nibea albiflora)抗哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的候选基因。本研究克隆了黄姑鱼转录因子AP2α,其开放阅读框(ORF)为1275 bp,编码424个氨基酸;所编码的AP2α蛋白质N端是富含脯氨酸和谷氨酰胺(P/Q-rich domain)的反式激活结构域,中间是中心基本结构(central basic region),C端为高度保守的helix-span-helix基序,负责结合DNA和蛋白质二聚化。氨基酸序列多重比对表明,AP2α保守性强,与所检测的鱼类、两栖类、鸟类和哺乳动物同源性在84.63%以上。实时荧光定量PCR检测结果显示,AP2α基因的mRNA广泛分布于所检测的黄姑鱼9种组织样品中,其中血液中的表达量最高;受哈维氏弧菌攻毒感染后,肝脏、脾脏和头肾中AP2α表达量均明显升高,特别是在肝脏中,AP2αmRNA表达水平在24 h时达到攻毒前的39倍。通过构建重组真核表达质粒pGEFP-AP2α并转染HEK293T细胞进行亚细胞定位研究的结果显示,AP2α分布于HEK293T细胞的细胞核中。进一步通过原核克隆表达获得了可溶性的GST-AP2α融合蛋白。以上结果表明,AP2α在黄姑鱼抵御哈维氏弧菌感染过程中发挥重要作用。本研究对AP2α在硬骨鱼类先天免疫中的重要功能提供了新的见解,为深入研究黄姑鱼的分子免疫机理和抗病分子育种奠定了基础。 展开更多

关键词 黄姑鱼 转录因子激活蛋白AP2α 哈维氏弧菌 实时荧光定量PCR 亚细胞定位 蛋白表达

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中间轴孔珊瑚白化病病原菌的分离与鉴定

11

作者 郑婷怡 林茂 +2 位作者 曾晨爔 李忠琴 王淑红 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期54-61,共8页

人工繁育的中间轴孔珊瑚(Acropora intermedia)出现白化病症状,且白化范围呈蔓延趋势,严重的甚至出现死亡。为探明此次养殖中间轴孔珊瑚白化病的病因,对患病珊瑚进行了病原学研究。从患病珊瑚基部病灶部位分离得到一株优势菌株JU-V039,... 人工繁育的中间轴孔珊瑚(Acropora intermedia)出现白化病症状,且白化范围呈蔓延趋势,严重的甚至出现死亡。为探明此次养殖中间轴孔珊瑚白化病的病因,对患病珊瑚进行了病原学研究。从患病珊瑚基部病灶部位分离得到一株优势菌株JU-V039,该菌株经Biolog生理生化分析和16S rRNA基因发育进化树分析,鉴定为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。再经人工回接感染,证实溶藻弧菌是引起此次珊瑚白化病的致病原。药物敏感实验显示,该菌株对13种检测抗菌药物的耐药率为15.4%,其中对利福平、复方新诺明、链霉素、红霉素、左氧氟沙星、头孢噻肟、卡那霉素、四环素、萘啶酸和氯霉素10种实验药物表现敏感(S);对青霉素G和氨苄西林表现耐药(R);对多粘菌素B则表现中介(I)。溶藻弧菌与此次养殖中间轴孔珊瑚白化病的发生有直接关系,研究结果有助于进一步了解珊瑚白化病的致病机理,并给出科学有效的疾病控制方案。 展开更多

关键词 中间轴孔珊瑚 珊瑚白化 溶藻弧菌 病原鉴定

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