黑棘鲷仔鱼饥饿实验及不可逆点的确定 被引量：7

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作者 杨育凯 林黑着 +4 位作者 王志勇 谢仰杰 郭奕惠 黄小林 李涛 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第2期87-94,共8页

在水温18℃~19℃条件下,采用实验生态学方法研究了饥饿对黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)仔鱼存活、生长发育及行为学特征的影响。通过测定仔鱼的初次摄食率和饥饿不可逆点(PNR),确定了初次投喂的最佳时间。结果显示,黑棘鲷仔鱼3日龄... 在水温18℃~19℃条件下,采用实验生态学方法研究了饥饿对黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)仔鱼存活、生长发育及行为学特征的影响。通过测定仔鱼的初次摄食率和饥饿不可逆点(PNR),确定了初次投喂的最佳时间。结果显示,黑棘鲷仔鱼3日龄开口摄食,4日龄卵黄囊消失,6日龄油球消失,混合营养期仅3 d,属容易遭受饥饿胁迫的鱼类。仔鱼开口时初次摄食率仅为30%,之后迅速提高,至5日龄达到最高的90%,之后逐渐下降,7日龄降至45%,到达PNR。饥饿组仔鱼在6日龄后开始出现生理性萎缩,全长与对照组相比差异显著(P<0.05),进入PNR后,仔鱼活动能力显著下降,身体出现扭曲、畸形,死亡率急剧升高,至10日龄全部死亡。黑棘鲷仔鱼耐受饥饿能力较弱,建议开始投饵的最适时机为仔鱼开口后的4 d内。 展开更多

关键词 黑棘鲷 仔鱼 饥饿 不可逆点

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复合添加剂对大黄鱼幼鱼生长、免疫和肠道形态的影响

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作者 黄柯云 杨红玲 +4 位作者 赵芸 蔡国鹤 汪攀 朱传忠 孙云章 《饲料研究》 北大核心 2025年第11期49-54,共6页

试验旨在研究在大黄鱼幼鱼饲料中添加果寡糖(FOS)、短小芽孢杆菌SE5(SE5)和三丁酸甘油酯(Tb)对其生长性能、免疫功能和肠道组织形态的影响。试验选取4500尾鱼,随机分为3组,每组3个重复,每个重复500尾鱼。对照组(T1组)饲喂基础日粮,T2组... 试验旨在研究在大黄鱼幼鱼饲料中添加果寡糖(FOS)、短小芽孢杆菌SE5(SE5)和三丁酸甘油酯(Tb)对其生长性能、免疫功能和肠道组织形态的影响。试验选取4500尾鱼,随机分为3组,每组3个重复,每个重复500尾鱼。对照组(T1组)饲喂基础日粮,T2组、T3组在T1组的基础上分别添加:0.087%SE5+0.1%Tb+0.1%FOS、0.087%SE5+0.1%Tb+0.2%FOS。试验期42 d。结果显示:与T1组相比,复合添加剂组末重、增重率、特定生长率均显著提高(P<0.05)。与T1组相比,复合添加剂组肠道蛋白酶活性显著升高(P<0.05),T3组肠道脂肪酶活显著升高(P<0.05)。与T1组相比,T3组血清超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)活性显著提高(P<0.05),T2组血清酸性磷酸酶(ACP)活性显著提高(P<0.05),T2组和T3组血清碱性磷酸酶(ALP)活性显著提高(P<0.05)。此外,补充复合添加剂明显改善了大黄鱼肠道肠绒毛高度、数量和肌层厚度。研究表明,复合添加剂能够提高大黄鱼生长性能,增强免疫力,改善肠道形态,且以0.087%SE5+0.1%Tb+0.2%FOS的配伍效果最佳。 展开更多

关键词 复合添加剂 大黄鱼 生长性能 免疫功能 肠道形态

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斜带石斑鱼肠上皮细胞原代培养及鉴定方法的研究

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作者 徐健铭 杨红玲 +1 位作者 蔡国鹤 孙云章 《动物营养学报》 北大核心 2025年第9期6291-6301,共11页

本研究旨在探究斜带石斑鱼肠上皮细胞原代培养及鉴定方法。以斜带石斑鱼肠道组织为试验材料,选用组织块法和酶消化法分别对细胞进行培养,对比2种培养方法的效果;分别用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ以及胶原酶Ⅰ+胶原酶Ⅳ对斜带石斑肠道组织进行消... 本研究旨在探究斜带石斑鱼肠上皮细胞原代培养及鉴定方法。以斜带石斑鱼肠道组织为试验材料,选用组织块法和酶消化法分别对细胞进行培养,对比2种培养方法的效果;分别用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ以及胶原酶Ⅰ+胶原酶Ⅳ对斜带石斑肠道组织进行消化,比较不同消化酶对细胞的分离效果;选择3种培养基(DMEM、DMEM/F12和L15培养基)以及不同胎牛血清(FBS)浓度[5%、12%、20%],比较不同培养基与FBS浓度对细胞生长的影响;利用形态学观察、透射电镜观察、碱性磷酸酶染色、18S rRNA基因序列比对及肠道细胞标志性基因表达检测等手段,对培养的原代细胞进行鉴定。结果显示:酶消化法与组织块法均能获得贴壁生长的细胞,但酶消化法培养12 d后可见细胞铺满瓶底,而组织块法则在培养28 d后才可见细胞铺满瓶底;0.25 mg/mL胰蛋白酶[含0.91 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)]消化肠道组织15 min为最佳消化时间,在此条件下既能获得足够的细胞,又能够保持细胞的完整性和活性;细胞在含20%FBS的L15培养基中的增殖率较高。透射电镜观察、碱性磷酸酶染色和肠道细胞标志性基因表达检测结果证实所培养的细胞为肠上皮细胞,18S rRNA基因序列比对证明细胞来源于石斑鱼。由此可见,使用0.25 mg/mL的胰蛋白酶(含0.91 mmo/L EDTA)处理斜带石斑鱼肠道组织15 min后,将获得的细胞置于含20%FBS的L15培养基内培养,此法能有效获得稳定贴壁生长的斜带石斑鱼原代肠上皮细胞。 展开更多

关键词 斜带石斑鱼 肠上皮细胞 原代培养 组织块法 酶消化法

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油彩蜡膜虾(Hymenocera picta)繁殖习性和胚胎发育观察

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作者 张书逸 刘改革 +2 位作者 陈锦民 陈楠 王淑红 《热带海洋学报》 北大核心 2025年第2期92-99,共8页

油彩蜡膜虾(Hymenocera picta)是一种常见的海水观赏虾,色彩鲜艳专食海星,深受水族爱好者欢迎。为此对油彩蜡膜虾繁殖习性、繁殖周期和胚胎发育过程进行了观察。油彩蜡膜虾亲虾交配行为由雄性主导,主要有接触、攀爬跨坐、转移精荚和分开... 油彩蜡膜虾(Hymenocera picta)是一种常见的海水观赏虾,色彩鲜艳专食海星,深受水族爱好者欢迎。为此对油彩蜡膜虾繁殖习性、繁殖周期和胚胎发育过程进行了观察。油彩蜡膜虾亲虾交配行为由雄性主导,主要有接触、攀爬跨坐、转移精荚和分开4个阶段。雌性在交配2h后产卵,在水温(27±0.5)℃条件下,胚胎经14~15d发育,经过受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、前无节幼体期、后无节幼体期、膜内溞状幼体期和孵化前期8个阶段直至幼体孵化,幼体孵化后12~48h内雌性亲虾蜕壳,蜕壳2h内再次开始交配,进入到下一个繁殖周期。 展开更多

关键词 油彩蜡膜虾 繁殖习性 胚胎发育

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蓝环水母(Phyllorhiza sp.)无性繁殖过程及形态变化观察

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作者 郝燕霞 赵雨轩 +2 位作者 邓丽秋 张瑞雪 王淑红 《热带海洋学报》 北大核心 2025年第1期35-43,共9页

本文以蓝环水母(Phyllorhizasp.)为研究对象,观察其自由游泳胞芽形态及附着变态为水螅体、水螅体横裂产生碟状体以及碟状体变态发育成水母体的过程。蓝环水母水螅体具有出芽生殖和横裂生殖两种无性繁殖方式。水螅体可在实验室长期保存,... 本文以蓝环水母(Phyllorhizasp.)为研究对象,观察其自由游泳胞芽形态及附着变态为水螅体、水螅体横裂产生碟状体以及碟状体变态发育成水母体的过程。蓝环水母水螅体具有出芽生殖和横裂生殖两种无性繁殖方式。水螅体可在实验室长期保存,在20~25℃均可进行出芽生殖和横裂生殖,自由游泳胞芽附着变态发育为成熟水螅体需10~12d,水螅体出芽开始至产生自由游泳胞芽需要2~3d,成熟水螅体横裂生殖产生碟状体,从开始横裂至碟状体释放需经过4~5d,为单碟型横裂,当横裂体感觉器形成到水螅体触手完全消失之前横裂体中央口盘边缘会变为蓝紫色。碟状体在温度25℃、盐度29‰~32‰的条件下,约12d发育成水母幼体。 展开更多

关键词 蓝环水母 水螅体 碟状体 无性繁殖 形态学

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考氏鳍竺鲷(Pterapogon kauderni)早期色素细胞发育和体色变化

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作者 余天虹 范雨轩 +2 位作者 李玲 陈楠 王淑红 《热带海洋学报》 北大核心 2025年第3期130-140,共11页

本研究以考氏鳍竺鲷(Pterapogon kauderni)为研究对象,采用显微观察和拍照的方法记录了考氏鳍竺鲷早期发育过程中色素细胞的分布及形态变化以及体色变化过程。在水温(27±0.5)℃条件下,考氏鳍竺鲷胚胎经15~22d孵化。受精后4d(4 days... 本研究以考氏鳍竺鲷(Pterapogon kauderni)为研究对象,采用显微观察和拍照的方法记录了考氏鳍竺鲷早期发育过程中色素细胞的分布及形态变化以及体色变化过程。在水温(27±0.5)℃条件下,考氏鳍竺鲷胚胎经15~22d孵化。受精后4d(4 days post fertilization,4dpf)胚胎发育至器官形成期,6dpf黑色素在眼球出现,7dpf黄色素细胞在体节处出现,8dpf虹彩颗粒反射小板在眼球出现,19dpf白色素细胞在第二背鳍出现。考氏鳍竺鲷体表图案的形成自12dpf头部眼间隔黑色素细胞的出现开始,21dpf吻部第一色带初显,孵化后1d(1 day post hatching,1dph)卵黄囊吸收完毕,体侧四条色带与尾部Y形色带基本形成,70dph身体中部第三和第四色带之间开始出现白色斑点,220dph体色模式与2龄成鱼一致。研究结果可为探究考氏鳍竺鲷体色形成调控机制和观赏鱼进化学说的发展以及新品种的选育提供理论依据。 展开更多

关键词 考氏鳍竺鲷 色素细胞 体色模式 早期发育

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花鲈肠上皮细胞原代培养及鉴定方法的探讨研究 被引量：4

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作者 李莎 刘紫严 +4 位作者 杨红玲 蔡国鹤 聂庆杰 张春晓 孙云章 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-389,共9页

为探究建立稳定可靠的花鲈肠上皮细胞原代培养方法,通过组织块法和酶消化法培养花鲈肠上皮细胞,确定酶消化法的最佳消化液及消化时间,所得细胞悬液于L-15培养液中进行培养。利用形态学观察、透射电镜观察和碱性磷酸酶染色方法对细胞进... 为探究建立稳定可靠的花鲈肠上皮细胞原代培养方法,通过组织块法和酶消化法培养花鲈肠上皮细胞,确定酶消化法的最佳消化液及消化时间,所得细胞悬液于L-15培养液中进行培养。利用形态学观察、透射电镜观察和碱性磷酸酶染色方法对细胞进行鉴定。结果显示:组织块法细胞迁出情况不稳定,且迁出时间较长;酶消化法的最佳消化液为胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液,最佳消化时间为45 min;胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化法获得的细胞连接紧密、排列整齐、呈上皮细胞典型的“铺路石”状,细胞相对独立、界限清晰。透射电镜观察和碱性磷酸酶染色进一步证实所培养的细胞为肠上皮细胞。总之,经胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液消化45 min、培养48 h可得到初始条件一致、生长旺盛的花鲈原代肠上皮细胞。 展开更多

关键词 花鲈 肠上皮细胞 原代培养 组织块法 酶消化法

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丝鳍圆天竺鲷的繁殖习性、胚胎发育和胚后发育观察 被引量：2

8

作者 兰真强 郑纪涛 +2 位作者 陈芸 陈楠 王淑红 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期116-125,共10页

本文以丝鳍圆天竺鲷(Sphaeramia nematoptera)为研究对象,观察记录了其繁殖习性以及胚胎发育和胚后发育的过程。研究结果表明:丝鳍圆天竺鲷的繁殖活动由雌鱼主导,在凌晨1点至3点交配,产卵受精后由雄性口孵,产卵间隔期为11~18d,无季节性... 本文以丝鳍圆天竺鲷(Sphaeramia nematoptera)为研究对象,观察记录了其繁殖习性以及胚胎发育和胚后发育的过程。研究结果表明:丝鳍圆天竺鲷的繁殖活动由雌鱼主导,在凌晨1点至3点交配,产卵受精后由雄性口孵,产卵间隔期为11~18d,无季节性。雌鱼单次产卵3126~4882粒,受精卵近圆球形,卵径(720±10)μm,内有数颗油球;在水温(27.0±0.5)℃条件下,受精卵经过卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期到出膜需187h。丝鳍圆天竺鲷胚后发育分为仔鱼期、稚鱼期、幼鱼期和成鱼期,初孵仔鱼全长(2.8±0.1)mm,口裂高度(0.202±18)mm,孵化后第二天仔鱼开口摄食;孵化后24d鳍条形成,身体出现两条黑色条带,结束浮游阶段,进入稚鱼期;孵化后50d鳞片完全形成,体色斑纹等外形特点与成鱼相同,进入幼鱼期;孵化后360d性腺发育成熟,具备生殖能力。 展开更多

关键词 丝鳍圆天竺鲷 海水观赏鱼 繁殖习性 胚胎发育 胚后发育

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拮抗哈维氏弧菌的黄姑鱼肠道原籍益生菌的体外筛选 被引量：2

9

作者 李燚灵 刘紫严 +4 位作者 魏成业 郭欣 杨红玲 蔡国鹤 孙云章 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第10期76-81,共6页

试验旨在筛选对哈维氏弧菌具有防治作用的益生菌。试验通过比较红头病和健康黄姑鱼肠道微生物差异,进一步通过体外抑菌试验、药敏试验、生物安全性试验,筛选出对红头病病原哈维氏弧菌B0003具有拮抗作用且对宿主安全的肠道益生菌候选菌... 试验旨在筛选对哈维氏弧菌具有防治作用的益生菌。试验通过比较红头病和健康黄姑鱼肠道微生物差异,进一步通过体外抑菌试验、药敏试验、生物安全性试验,筛选出对红头病病原哈维氏弧菌B0003具有拮抗作用且对宿主安全的肠道益生菌候选菌株。结果显示,红头病和健康黄姑鱼肠道微生物存在较大差异,选择12株候选菌株测试其对哈维氏弧菌B0003的拮抗作用。体外抑菌试验发现,5株候选菌对哈维氏弧菌B0003具有明显抑制作用,其抑菌能力由强到弱依次为:暹罗芽孢杆菌B0E14、贝莱斯芽孢杆菌DM5、巨大芽孢杆菌B1M2、枯草芽孢杆菌B0E9、粪肠球菌AT5。这5株拮抗菌均不具有溶血活性,且不会对黄姑鱼健康造成不利影响,对大多数抗菌药物敏感。研究表明,试验筛选的5株候选菌具有作为益生菌用于黄姑鱼红头病防治的潜力。 展开更多

关键词 红头病 黄姑鱼 原籍益生菌 抑菌能力 哈维氏弧菌

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拟穴青蟹Spfox-1基因及调控其表达的lncRNA的鉴定与分析

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作者 王晋珺偲 钟照威 +1 位作者 张子平 王艺磊 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期352-362,共11页

为探究Spfox-1基因及存在靶向关系的lncRNA在拟穴青蟹性腺发育和幼体发育过程中的作用,从其成熟雌雄性腺转录组中得到开放阅读框全长为1410 bp的Spfox-1序列,该序列编码的蛋白包含1个RRM结构域,进一步预测获得1个可能与Spfox-1基因存在... 为探究Spfox-1基因及存在靶向关系的lncRNA在拟穴青蟹性腺发育和幼体发育过程中的作用,从其成熟雌雄性腺转录组中得到开放阅读框全长为1410 bp的Spfox-1序列,该序列编码的蛋白包含1个RRM结构域,进一步预测获得1个可能与Spfox-1基因存在靶向关系的lncRNA HX26820。多重比较和进化树分析表明,Spfox-1的RRM结构域高度保守且与其他节肢动物的fox-1亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示:Spfox-1基因在成熟青蟹各组织器官中均有不同程度的表达,其中在卵巢和雄性脑神经节中表达量最高。在性腺不同发育阶段,Spfox-1基因在卵黄发生期的表达量显著高于卵巢其他发育阶段,而在精巢发育过程中,则表达量持续下降。在幼体不同发育过程中,Spfox-1基因的表达量从溞状幼体Ⅴ期到仔蟹Ⅰ期表达量呈逐渐上升趋势。lncRNA HX26820在卵巢发育过程中表达量持续下降,在幼体发育过程中只在溞状幼体Ⅴ期有较高的表达量。研究表明Spfox-1和lncRNA HX26820可能参与卵巢发育和幼体发育。过表达试验显示,lncRNA HX26820能够抑制Spfox-1基因的表达,推测其可能对Spfox-1在性腺及幼体发育中的功能具有负调控作用。本试验结果可为甲壳动物lncRNA调控机制的研究奠定基础。 展开更多

关键词 拟穴青蟹 Spfox-1 长链非编码RNA 性腺发育 幼体发育

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拟穴青蟹DDX5基因的表达及功能初步分析

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作者 赵逗裟 姚成杰 +1 位作者 张子平 王艺磊 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期225-235,共11页

拟穴青蟹(Scylla paramamosain)是我国东南沿海重要的经济养殖蟹类之一。DDX5基因是DEAD-box解旋酶基因家族中的成员,已有研究表明其在生殖细胞的成熟分化及功能维持中起重要的调控作用。我们从拟穴青蟹转录组数据库中筛选获得了DDX5(Sp... 拟穴青蟹(Scylla paramamosain)是我国东南沿海重要的经济养殖蟹类之一。DDX5基因是DEAD-box解旋酶基因家族中的成员,已有研究表明其在生殖细胞的成熟分化及功能维持中起重要的调控作用。我们从拟穴青蟹转录组数据库中筛选获得了DDX5(SpDDX5)基因序列,采用实时荧光定量PCR技术分析了其在成熟青蟹各组织、性腺各发育时期及胚胎各发育时期的表达模式。此外,利用RNAi技术分析了SpDDX5在性腺发育中可能发挥的作用。结果如下:SpDDX5的开放阅读框长1 893 bp,编码630个氨基酸,具有DEXDc和HELICc两个结构域。SpDDX5在拟穴青蟹的各组织中广泛表达,且在精巢中的表达水平明显高于其他组织(P<0.05);在精巢发育过程中,SpDDX5的表达水平逐渐降低;在胚胎发育过程中,SpDDX5的表达水平逐渐升高。干扰SpDDX5后,生殖细胞分子标记基因Vasa和Nanos表达上调,性腺发育相关基因foxl-2表达下调,Dmrt家族基因Dsx表达上调,Dmrt-like和idmrt-2表达下调。根据以上结果,我们推测SpDDX5基因可能在拟穴青蟹生殖细胞发育和精巢发育中发挥重要作用。 展开更多

关键词 海洋生物学 DDX5基因 DEAD-box解旋酶 RNAI 生殖细胞发育 精巢发育 拟穴青蟹

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基于密码子优化mSaCas9蛋白的重组表达与应用 被引量：1

12

作者 陈若雪 蒋月雯 +3 位作者 王梦洋 许朝然 梁晶婕 陈天圣 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期19-26,共8页

【目的】利用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)来源的SaCas9研究可替代商业Cas9的基因编辑蛋白,为生产适用于鱼类基因编辑的蛋白酶提供参考。【方法】以青鳉(Oryzias latipes)密码子偏好优化SaCas9(命名为mSaCas9),克隆构建重组质... 【目的】利用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)来源的SaCas9研究可替代商业Cas9的基因编辑蛋白,为生产适用于鱼类基因编辑的蛋白酶提供参考。【方法】以青鳉(Oryzias latipes)密码子偏好优化SaCas9(命名为mSaCas9),克隆构建重组质粒pET28a-mSaCas9,并利用大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)原核表达mSaCas9重组蛋白,对纯化蛋白活性进行体外酶切验证;利用纯化蛋白进行显微注射,验证mSaCas9-RNP递送方式的应用性。【结果】成功构建重组质粒pET28a-mSaCas9,其重组蛋白分子质量为130 ku;在1 L培养基中纯化获得2.5 mg mSaCas9蛋白,纯度为95%;体外酶切结果显示,其终质量浓度为30 ng/μL时即可编辑tyr和oca2基因的PCR产物,表明纯化所得蛋白具备体外编辑活性;向青鳉胚胎中注射mSaCas9蛋白和黑色素合成相关基因oca2-gRNA,胚胎眼部出现色素缺失,表明mSaCas9-RNP可应用于青鳉基因组编辑。【结论】通过体外表达纯化获得了有活性且分子质量更小的Cas9蛋白,并在鱼类中证明了以递送SaCas9核糖核蛋白(SaCas9-RNP)形式,实现个体水平基因编辑的有效性。 展开更多

关键词 mSaCa9 基因编辑蛋白 CRISPR/Cas9 原核表达 SaCas9-RNP 显微注射

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巴布亚硝水母(Mastigias papua)的精巢发育和精子超微结构观察

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作者 张瑞雪 杨文浩 +1 位作者 陈楠 王淑红 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期129-139,共11页

以巴布亚硝水母(Mastigias papua)为实验对象,详细研究了其精巢发育过程和精子超微结构。结果显示,伞径为(4.99±0.07)cm的巴布亚硝水母,在实验条件下26~40d后精巢逐渐发育成熟,可持续排放精子束2~3个月。依精小囊结构和精子发生过... 以巴布亚硝水母(Mastigias papua)为实验对象,详细研究了其精巢发育过程和精子超微结构。结果显示,伞径为(4.99±0.07)cm的巴布亚硝水母,在实验条件下26~40d后精巢逐渐发育成熟,可持续排放精子束2~3个月。依精小囊结构和精子发生过程,精巢发育可分为3个时期,即Ⅰ期:精巢外部肉眼不可见,精小囊小而透明,排列松散,内部无空腔;Ⅱ期:精巢呈环状乳白色,性腺梯度发育,远离胃丝的精小囊更大排列更紧密,内部有空腔;Ⅲ期:精巢褶皱明显呈囊状,光镜下可见处于不同发育阶段的精小囊,大量精小囊内充满以精子束存在的成熟精子。精子全长(50.64±3.93)μm,包括尖辣椒状的头部(7.61±0.63)μm,略微突出的中段(1.00±0.12)μm和十分细长的尾部(43.03±4.02)μm。头部无顶体,主要由细胞核和薄的质膜组成,质膜散布小的囊泡;中段有两个较大的线粒体,以锚定装置连接尾部;尾部轴丝为典型的9+2双联体微管结构。 展开更多

关键词 巴布亚硝水母 精巢发育 精子超微结构

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诱导性成熟雌性大黄鱼性逆转的初步研究

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作者 张家瑞 崔瑜 +3 位作者 胡国良 张立宁 任鹏 王志勇 《渔业研究》 2024年第4期322-330,共9页

【目的】大黄鱼雌鱼生长显著快于雄鱼,全雌苗种受到养殖业者期待。用雄激素处理性腺未分化的遗传雌性鱼苗,使其发育成为生理性雄鱼(XX♂),进而与原系雌鱼(XX♀)杂交,是制备全雌鱼苗的常规方法,但存在周期长、大黄鱼苗经雄激素甲基睾酮(... 【目的】大黄鱼雌鱼生长显著快于雄鱼,全雌苗种受到养殖业者期待。用雄激素处理性腺未分化的遗传雌性鱼苗,使其发育成为生理性雄鱼(XX♂),进而与原系雌鱼(XX♀)杂交,是制备全雌鱼苗的常规方法,但存在周期长、大黄鱼苗经雄激素甲基睾酮(MT)处理后生长受到严重抑制等问题。若能直接诱导雌性成鱼性逆转成为生理性雄鱼则可避免上述问题。本研究旨在探索通过诱导性成熟雌性大黄鱼性逆转培育为生理性雄鱼的可能性和诱导方法,为高效制备生理性雄鱼开辟一条新途径。【方法】在MT中加入一定比例的PHTPP作为诱导药物,将混合药物用壳聚糖制成胶条或溶解于大豆油中制成缓释液,注射到大黄鱼成熟雌鱼的腹腔进行诱导性逆转实验,观察性腺的组织学变化,并检测血清中性激素浓度和性腺中雌激素受体基因表达量的变化。【结果】MT-PHTPPA-大豆油混合液的诱导效果优于壳聚糖-MT-PHTPP药条;用(40μg MT+4μg PHTPP)/kg鱼体质量的剂量腹腔注射MT-PHTPPA-大豆油混合液,持续处理80 d后,实验组大黄鱼的卵巢退化,形态变成与精巢相似,其中形成大量精原细胞,血清中雌二醇(E2)浓度显著下降、11-酮基睾酮(11-KT)浓度显著上升(P<0.05),性腺中E2受体Esr2基因的表达受到严重抑制。【结论】通过诱导性腺分化完成乃至发育成熟的雌性大黄鱼性逆转培育生理性雄鱼是可能的。 展开更多

关键词 大黄鱼 性别控制 性别分化 性逆转

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一种基于线粒体COI PCR-RFLP单酶切快速鉴定4种巨蛎属牡蛎的方法

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作者 崔中望 于诗奇 +1 位作者 缪雄平 阙华勇 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期68-73,共6页

本文报道了一种基于线粒体细胞色素氧化酶亚基I(mt COI)基因序列PCR-RFLP单酶切的牡蛎物种鉴定方法。本方法可快速鉴定福建牡蛎(Crassostrea angulata)、熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)、香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和近江牡蛎... 本文报道了一种基于线粒体细胞色素氧化酶亚基I(mt COI)基因序列PCR-RFLP单酶切的牡蛎物种鉴定方法。本方法可快速鉴定福建牡蛎(Crassostrea angulata)、熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)、香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)等中国沿海常见的4种巨蛎属(Crassostrea)牡蛎。该方法以甲基转移酶(Msp I)作为限制性内切酶,对4种巨蛎属牡蛎的线粒体DNA COI扩增序列进行酶切,以得到的特异性条带为依据进行物种鉴定。本方法的鉴定结果与COI测序方法的鉴定结果一致,并且筛选出的单一的限制性内切酶Msp I在4种牡蛎的COI序列中不存在酶切位点的突变,准确率达到100%,能够为巨蛎属牡蛎的物种鉴别提供简便可靠的技术支撑。 展开更多

关键词 巨蛎属(Crassostrea)牡蛎 线粒体COI PCR-RFLP

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中国鲎(Tachypleus tridentatus)微卫星标记筛选及种群遗传多样性和遗传结构分析 被引量：6

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作者 翁朝红 谢仰杰 +1 位作者 肖志群 王志勇 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期345-353,共9页

采用FIASCO方法构建了中国鲎(Tachypleus tridentatus)(CA)_n微卫星富集文库,对214个阳性克隆进行测序,筛选获得60条含有微卫星的序列,其中可设计引物的序列共38条。38对微卫星引物在37个中国鲎个体中PCR检测发现,只有9个位点具有多态性... 采用FIASCO方法构建了中国鲎(Tachypleus tridentatus)(CA)_n微卫星富集文库,对214个阳性克隆进行测序,筛选获得60条含有微卫星的序列,其中可设计引物的序列共38条。38对微卫星引物在37个中国鲎个体中PCR检测发现,只有9个位点具有多态性,其等位基因数为5-14个,每个位点平均具有8.1个等位基因。9个位点之间不存在连锁。利用该9个具有多态性微卫星标记分析了中国沿海9个中国鲎地理群体的种群遗传多样性和遗传结构。结果表明:中国沿海的中国鲎种群遗传多态性水平仍较高,9个地方群体间无遗传差异,它们之间未见显著分化,且有着较高的基因流;推测人为的迁移是造成遗传无分化的主要原因。我们建议中国鲎已绝迹的海域可从其他海域引入中国鲎个体来恢复地方群体资源。 展开更多

关键词 中国鲎 微卫星标记 FIASCO 遗传多样性 遗传结构

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水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积机制研究进展 被引量：3

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作者 张丽莉 王国栋 +2 位作者 黄世玉 龚筱婷 王艺磊 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1072-1082,共11页

类胡萝卜素是自然界普遍存在的天然色素,对水产动物生长、发育、免疫和体色具有重要作用。水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积能力是遗传改良的重要靶点,对其性状提升具有重要作用。本文综述了水产动物主要类胡萝卜素种类、吸收和代... 类胡萝卜素是自然界普遍存在的天然色素,对水产动物生长、发育、免疫和体色具有重要作用。水产动物类胡萝卜素的吸收、代谢和沉积能力是遗传改良的重要靶点,对其性状提升具有重要作用。本文综述了水产动物主要类胡萝卜素种类、吸收和代谢分子机制,着重介绍了B类清道夫受体(SR-B1)、决定簇36(CD36)、β-胡萝卜素加氧酶1(BCO1)、β-胡萝卜素加氧酶2(BCO2)及细胞色素酶450(P450)家族的CYP2J19和CYP3A80在类胡萝卜素转运和转化中的作用,分析了类胡萝卜素酮化的可能机制和主要类胡萝卜素结合蛋白的特性。针对目前研究中存在的问题,提出通过基因-表型关联分析揭示遗传基础、多组学联合分析筛选鉴定新酮化酶基因、单细胞转录组解析类胡萝卜素沉积过程及筛选与构建体色遗传材料等未来重点研究方向,以期为水产动物类胡萝卜素吸收、代谢和沉积机制的研究提供科学参考。 展开更多

关键词 类胡萝卜素 水产动物 吸收 氧化 胡萝卜素结合蛋白

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杂色鲍caspase-3基因的克隆及其在发育、弧菌感染、高温和缺氧应激中的表达分析 被引量：5

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作者 卢锡琴 张丽莉 +3 位作者 黄世玉 王国栋 王艺磊 和四梅 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期411-419,共9页

为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍Haliotis diversicolor早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出caspase-3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了caspase-3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温... 为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍Haliotis diversicolor早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出caspase-3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了caspase-3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温应激和缺氧应激处理后的表达情况。结果表明:caspase-3基因的cDNA全长为1192 bp,共编码252个氨基酸,该氨基酸序列具有高度保守的P20和P10活性位点;caspase-3基因在杂色鲍成体的各个组织中均有表达,其中血淋巴中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);在早期发育阶段中受精卵和2细胞期的表达量最高(P<0.05);经副溶血弧菌感染后,血淋巴中caspase-3的表达量在12 h时显著上调(P<0.05);经高温应激处理后,血淋巴和肝胰腺中caspase-3基因的表达量在24 h时显著上调(P<0.05);经缺氧处理后,鳃组织中caspase-3基因的表达量在96 h时出现显著上调(P<0.05),而血淋巴中的表达量在4 h时显著上调(P<0.05)。研究表明,caspase-3基因在杂色鲍早期发育、免疫和应激中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 杂色鲍 CASPASE-3基因 发育 免疫 应激

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果寡糖对斜带石斑鱼免疫功能和肠道形态的影响 被引量：9

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作者 胡凌豪 杨红玲 +3 位作者 赵芸 叶继丹 鲁康乐 孙云章 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期589-594,共6页

以初始体质量(18.13±0.02)g的斜带石斑鱼为试验对象,探讨果寡糖对石斑鱼免疫功能和肠道形态的影响。试验分为4组:基础饲料组(对照组),及3个分别在对照组基础上添加质量分数为0.05%、0.10%以及0.20%果寡糖的试验组。每组3个平行,每... 以初始体质量(18.13±0.02)g的斜带石斑鱼为试验对象,探讨果寡糖对石斑鱼免疫功能和肠道形态的影响。试验分为4组:基础饲料组(对照组),及3个分别在对照组基础上添加质量分数为0.05%、0.10%以及0.20%果寡糖的试验组。每组3个平行,每个平行25尾鱼,试验周期56 d。试验结果表明,饲料中添加不同剂量的果寡糖能够改善石斑鱼免疫功能,饲养28 d时,0.10%试验组和0.20%试验组超氧化物歧化酶活性、0.05%试验组溶菌酶活性、3个试验组酸性磷酸酶活性均显著高于对照组(P<0.05),而试验组碱性磷酸酶活性与对照组无显著性差异。饲养56 d时,0.10%试验组超氧化物歧化酶活性、0.20%试验组酸性磷酸酶活性显著高于对照组(P<0.05)。饲料中添加不同剂量的果寡糖能够改善幼鱼肠道形态,28 d时,0.05%试验组和0.20%试验组绒毛高度、0.10%试验组肌层厚度、3个试验组绒毛宽度均显著高于对照组(P<0.05);56 d时,0.05%试验组绒毛高度、0.10%试验组肌层厚度、3个试验组绒毛宽度均显著高于对照组(P<0.05)。饲料中添加0.05%~0.20%果寡糖能改善斜带石斑鱼的免疫功能和肠道形态。 展开更多

关键词 果寡糖 斜带石斑鱼 免疫功能 肠道形态

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大黄鱼生态冰温保活技术的初步研究 被引量：9

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作者 蔡晓芳 张晓林 +2 位作者 周建频 张东玲 刘贤德 《渔业现代化》 CSCD 2019年第4期69-72,80,共5页

为优化大黄鱼(Larimichthys crocea)活体运输的条件,对大黄鱼的生态冰温进行探索。分析鱼水质量比和暂养时间2个因素对大黄鱼保活时间的影响,在此基础上设计3因素3水平的正交试验,以期找到大黄鱼保活的适合条件。研究结果显示:大黄鱼的... 为优化大黄鱼(Larimichthys crocea)活体运输的条件,对大黄鱼的生态冰温进行探索。分析鱼水质量比和暂养时间2个因素对大黄鱼保活时间的影响,在此基础上设计3因素3水平的正交试验,以期找到大黄鱼保活的适合条件。研究结果显示:大黄鱼的生态冰温为-2℃~7℃;鱼水质量比及暂养时间对大黄鱼保活时间均有显著影响(P<0.05);在温度为5℃~7℃、鱼水质量比为1∶4、暂养时间为48 h的条件下进行保活,保活时间可超过19 h。本研究结果可为大黄鱼活体运输提供参考。 展开更多

关键词 大黄鱼 生态冰温 鱼水质量比 活体运输

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