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外泌体分离技术及其临床应用研究进展
被引量：
21
1
作者
高方园
焦丰龙
+2 位作者
张养军
秦伟捷
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1071-1083,共13页
外泌体是细胞通过胞吐过程分泌的一类粒径为30~200nm的囊泡,其组成包括脂质双分子层以及其内部包裹的细胞来源的蛋白质、核糖核苷酸(RNA)和脱氧核糖核苷酸(DNA)等生物分子。作为一种细胞间交流的重要方式,外泌体在一系列生理和病理过程...
外泌体是细胞通过胞吐过程分泌的一类粒径为30~200nm的囊泡,其组成包括脂质双分子层以及其内部包裹的细胞来源的蛋白质、核糖核苷酸(RNA)和脱氧核糖核苷酸(DNA)等生物分子。作为一种细胞间交流的重要方式,外泌体在一系列生理和病理过程中起着至关重要的作用。由于体液环境复杂,加之自身体积小、密度低,外泌体的富集与分离对于其后续分析和功能研究至关重要。该文介绍了外泌体的研究策略、表征手段及生物学功能和临床应用研究进展,特别对外泌体的提取方法进行了详细介绍,并加以系统评述。
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关键词
外泌体
临床应用
提取方法
综述
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职称材料
基于超高效液相色谱-八端口转子阀的微升级预分级系统的建立
被引量：
1
2
作者
燕蒙
赵洋
+2 位作者
张养军
应万涛
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期477-483,共7页
复杂生物系统蛋白质组的深度覆盖鉴定得益于近年来快速发展的高效色谱分离和串联质谱分析技术。二维高效液相色谱(2-D HPLC)是实现复杂肽混合物正交分离的有效手段,但其缺点是运行时间长,通常要求肽上样量在毫克级别,且收集时的组分体积...
复杂生物系统蛋白质组的深度覆盖鉴定得益于近年来快速发展的高效色谱分离和串联质谱分析技术。二维高效液相色谱(2-D HPLC)是实现复杂肽混合物正交分离的有效手段,但其缺点是运行时间长,通常要求肽上样量在毫克级别,且收集时的组分体积大,后续合并流程复杂,而有望替代其的StageTip技术,则由于有限的色谱分离梯度,难以达到充分的正交分离。该文探索了超高效液相色谱(UPLC)和八端口转子阀联用,作为高效、便捷肽段预分离和收集系统的可行性。研究结果显示,将UPLC的高pH反相色谱分馏与在线LC-MS/MS相结合,可以实现高pH和低pH条件下基于肽段不同色谱保留行为的正交互补分离,在蛋白质鉴定方面表现出优越的性能。应用该方法对人肝癌细胞系HepG2进行3次技术重复试验,重复试验间具有非常高的定量重现性(决定系数R^2>0.95)。与传统StageTip方法相比,肽段鉴定数提高了23.52%。该分级方法灵活、稳定,能够针对较少的样品开展蛋白质组深度覆盖分析。
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关键词
二维液相色谱
超高效液相色谱
八端口转子阀
蛋白质组学
分馏
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职称材料
题名
外泌体分离技术及其临床应用研究进展
被引量：
21
1
作者
高方园
焦丰龙
张养军
秦伟捷
钱小红
机构
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心-北京
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1071-1083,共13页
基金
国家重点研发计划(2017YFA0505002,2018YFC0910302,2016YFA0501403,2018YFF0212505,2017YFC0906703)~~
文摘
外泌体是细胞通过胞吐过程分泌的一类粒径为30~200nm的囊泡,其组成包括脂质双分子层以及其内部包裹的细胞来源的蛋白质、核糖核苷酸(RNA)和脱氧核糖核苷酸(DNA)等生物分子。作为一种细胞间交流的重要方式,外泌体在一系列生理和病理过程中起着至关重要的作用。由于体液环境复杂,加之自身体积小、密度低,外泌体的富集与分离对于其后续分析和功能研究至关重要。该文介绍了外泌体的研究策略、表征手段及生物学功能和临床应用研究进展,特别对外泌体的提取方法进行了详细介绍,并加以系统评述。
关键词
外泌体
临床应用
提取方法
综述
Keywords
exosome
clinical application
isolation method
review
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
基于超高效液相色谱-八端口转子阀的微升级预分级系统的建立
被引量：
1
2
作者
燕蒙
赵洋
张养军
应万涛
钱小红
机构
广东药科大
学
药
学院
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心-北京
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期477-483,共7页
基金
国家重点研发计划(2017YFC0906600
2016YFA0501300)
+1 种基金
国家自然基金重点项目(81530021)
军事医学创新工程专项(16CXZ027)~~
文摘
复杂生物系统蛋白质组的深度覆盖鉴定得益于近年来快速发展的高效色谱分离和串联质谱分析技术。二维高效液相色谱(2-D HPLC)是实现复杂肽混合物正交分离的有效手段,但其缺点是运行时间长,通常要求肽上样量在毫克级别,且收集时的组分体积大,后续合并流程复杂,而有望替代其的StageTip技术,则由于有限的色谱分离梯度,难以达到充分的正交分离。该文探索了超高效液相色谱(UPLC)和八端口转子阀联用,作为高效、便捷肽段预分离和收集系统的可行性。研究结果显示,将UPLC的高pH反相色谱分馏与在线LC-MS/MS相结合,可以实现高pH和低pH条件下基于肽段不同色谱保留行为的正交互补分离,在蛋白质鉴定方面表现出优越的性能。应用该方法对人肝癌细胞系HepG2进行3次技术重复试验,重复试验间具有非常高的定量重现性(决定系数R^2>0.95)。与传统StageTip方法相比,肽段鉴定数提高了23.52%。该分级方法灵活、稳定,能够针对较少的样品开展蛋白质组深度覆盖分析。
关键词
二维液相色谱
超高效液相色谱
八端口转子阀
蛋白质组学
分馏
Keywords
two-dimensional liquid chromatography (2-D LC)
ultra performance liquid chromatography (UPLC)
the eight-port rotor valve
proteomics
fractionation
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外泌体分离技术及其临床应用研究进展
高方园
焦丰龙
张养军
秦伟捷
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019
21
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于超高效液相色谱-八端口转子阀的微升级预分级系统的建立
燕蒙
赵洋
张养军
应万涛
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
已选择
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