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异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒抗原血症检测指导巨细胞病毒感染的防治 被引量:5
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作者 范炜 李欲航 +2 位作者 董陆佳 骈淮媛 卢淑鹃 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期149-152,共4页
人巨细胞病毒感染及巨细胞病毒疾病是异基因造血干细胞移植后的常见并发症 ,巨细胞病毒性间质性肺炎是移植后巨细胞病毒疾病的主要类型 ,如未能及时检出和救治则病死率极高。为探讨采用免疫组化法测定人巨细胞病毒的方法学 ,指导临床治... 人巨细胞病毒感染及巨细胞病毒疾病是异基因造血干细胞移植后的常见并发症 ,巨细胞病毒性间质性肺炎是移植后巨细胞病毒疾病的主要类型 ,如未能及时检出和救治则病死率极高。为探讨采用免疫组化法测定人巨细胞病毒的方法学 ,指导临床治疗 ,我们采用免疫组化法对 4 5例(慢性粒细胞白血病 2 3例 ,急性髓性白血病 7例 ,急性淋巴细胞白血病 6例 ,骨髓增生异常综合征4例 ,非何杰金氏淋巴瘤 3例 ,再生障碍性贫血 2例 )进行造血干细胞移植后巨细胞病毒抗原血症的检测 ,并与巨细胞病毒血清学检测进行了对比。 4 5例中 38例患者进行了异基因外周血干细胞移植 ,2例骨髓移植 ,5例外周血与骨髓共移植。移植前 ,对供 受者均进行巨细胞病毒抗体检查 ;移植后 ,受者采用本方法进行抗原检查。结果表明 ,有 2 5例患者发生巨细胞病毒相关性间质性肺炎 ,移植后随访时间为 6 - 2 8个月 (平均时间为 18个月 ) ,根据巨细胞病毒检测结果进行预防性治疗的患者预后较未进行预防性治疗的患者有明显差异。预防组巨细胞病毒相关的死亡率为 1 2 9,未预防组为 12 16。提示采用免疫组化法对异基因造血干细胞移植患者进行定期随访监测可更早期、快速的检出巨细胞病毒感染 ,对患者预后有重要意义。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 巨细胞病毒抗原血症 巨细胞病毒感染 CMVpp65恶性血液病
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间充质干细胞分泌TGF-β1抑制异体T细胞反应性 被引量:43
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作者 陈健琳 郭子宽 +4 位作者 徐晨 李欲航 侯春梅 毛宁 陈虎 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期285-288,共4页
为探讨骨髓间充质干细胞(MSC)诱导异体T细胞反应性下降的机制,应用流式细胞术检测了异体T细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后CD4,CD8,CD25和CD28等的变化,同时应用RT-PCR测定MSC是否表达IL-4,IFN-γ和TGF-β1等细胞因子,并用ELISA的方法... 为探讨骨髓间充质干细胞(MSC)诱导异体T细胞反应性下降的机制,应用流式细胞术检测了异体T细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后CD4,CD8,CD25和CD28等的变化,同时应用RT-PCR测定MSC是否表达IL-4,IFN-γ和TGF-β1等细胞因子,并用ELISA的方法验证培养上清中蛋白的存在。结果显示,异体T细胞与MSC共培养后,CD8^+细胞增多,CD25^+细胞减少。RT-PCR检测结果证明MSC高表达TGF-β1基因,但不表达IL-4和IFN-γ基因。ELISA证实MSC培养上清存在TGF-β1蛋白,其72小时分泌量约为1ng/ml。结论:骨髓MSC在体外可使异体T细胞对异体抗原的反应性减低,这种作用体现在细胞亚群的改变与MSC分泌TGF-β1有关。这一研究结果为预防HLA不相合骨髓移植中GVHD的发生提出了一条新的思路。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 T淋巴细胞 TGF-Β1 免疫反应 流式细胞术 免疫学
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骨髓间充质干细胞对异体T细胞几种细胞因子分泌的影响 被引量:8
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作者 乌仁娜 姚志娟 +4 位作者 楼晓 毕东杰 黄云中 冯凯 陈虎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期426-430,共5页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对异体T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的影响,从而进一步探讨MSC诱导免疫耐受的机制。方法:将培养了3代后的MSC经照射后作为基底层细胞,接种分离的异体T淋巴细胞。共培养7天后,用ELASA方法检测... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对异体T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的影响,从而进一步探讨MSC诱导免疫耐受的机制。方法:将培养了3代后的MSC经照射后作为基底层细胞,接种分离的异体T淋巴细胞。共培养7天后,用ELASA方法检测上清中的上述四种细胞因子的蛋白含量,同时计数T淋巴细胞数量的变化,应用流式细胞仪检测与MSC共孵育前后T淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD25的变化。结果:(1)ELASA检测IFN-γ分泌量为667·07±14·76pg/ml;IL-10为46·19±1·41pg/ml;IL-2为33·01±5·92pg/ml;IL-4为0·15pg/ml。(2)共孵育组T淋巴细胞在数量上明显减少。(3)CD8+细胞数增多,CD25+细胞减少。结论:骨髓MSC在体外与异体T淋巴细胞共孵育后IFN-γ高分泌,可能与共孵育后T淋巴细胞亚群的改变有关。这一研究结果为预防HLA不相合的骨髓移植的GVHD的发生提供了一条新的思路。 展开更多
关键词 免疫耐受 MSC T淋巴细胞 细胞因子
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人骨髓间质干细胞体外扩增和向内皮细胞定向诱导分化的研究 被引量:4
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作者 冯滨 刘迎龙 +2 位作者 冯凯 龚茹 陈虎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1467-1471,共5页
目的:体外分离、扩增成人骨髓间质干细胞(MSCs)和向内皮细胞(ECs)定向诱导分化,开辟心血管组织工程种子细胞的新来源。方法:采用Percoll(1073g/L)从正常成人骨髓中分离出MSCs,纯化和扩增后流式细胞仪鉴定其纯度;用血管内皮生长因子(VEGF... 目的:体外分离、扩增成人骨髓间质干细胞(MSCs)和向内皮细胞(ECs)定向诱导分化,开辟心血管组织工程种子细胞的新来源。方法:采用Percoll(1073g/L)从正常成人骨髓中分离出MSCs,纯化和扩增后流式细胞仪鉴定其纯度;用血管内皮生长因子(VEGF)诱导MSCs向ECs分化,Ⅷ因子(vWF)免疫组化和透射电镜(TEM)鉴定细胞性质。结果:5·0×105个MSCs在体外扩增15代后,获得8·0×1012个MSCs,扩增了约1·6×107倍;MSCs在加入VEGF诱导培养大约14-21d,80%-90%的诱导细胞对Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应;TEM可观察到胞浆内有Weible-palade小体,证实为ECs。结论:成人骨髓MSCs在体外具有定向诱导分化为ECs的潜能,这为心脏组织工程瓣体外构建,尤其是在小儿先天性心脏病组织工程研究中种子细胞的来源提供了可能性。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 内皮细胞
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酶联免疫斑点试验检测技术在血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病诊断中的应用 被引量:7
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作者 叶丽萍 梁艳 +8 位作者 施兵 刘丽辉 金建刚 张玉珠 胡文清 刘明娟 阳幼荣 陈虎 吴雪琼 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2010年第1期44-48,共5页
目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗... 目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT检测技术,分析了51例发热的血液病怀疑合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病患者的外周血,作能分泌结核特异的γ干扰素的T淋巴细胞测定,以传统的诊断方法为对照。结果确诊血液病合并结核病24例,排除活动性结核病27例;ELISPOT的灵敏度为73.6%,高于PPD皮肤试验的54.5%(P<0.05),高于抗结核抗体试验的37.5%(P<0.01);准确度82.6%高于抗结核抗体的62.5%(P<0.05),高于PPD的77.77%;特异度88.88%,与抗结核抗体检测(87.5%)及PPD(93.75%)相似;ELISPOT与抗结核抗体、PPD试验结果联合分析,其诊断率为79.2%。此外,ELISPOT检测结果与性别、年龄、结核病史、抗结核抗体、机体免疫状态、外周血淋巴细胞数等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。结论ELISPOT是血液病患者合并活动性结核的重要辅助诊断工具。 展开更多
关键词 血液病 结核病 诊断 酶联免疫斑点试验
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基质金属蛋白酶在白血病致病和治疗研究中的进展 被引量:7
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作者 孙薏 董陆佳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期316-320,共5页
恶性肿瘤细胞的侵袭和转移是造成肿瘤病人死亡的重要原因 ,肿瘤细胞发生侵袭和转移与蛋白水解酶水解胞外基质密切相关 ,锌离子依赖性的基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMP)中的MMP2和MMP9是参与此过程的两个关键性蛋白酶。... 恶性肿瘤细胞的侵袭和转移是造成肿瘤病人死亡的重要原因 ,肿瘤细胞发生侵袭和转移与蛋白水解酶水解胞外基质密切相关 ,锌离子依赖性的基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMP)中的MMP2和MMP9是参与此过程的两个关键性蛋白酶。本文就MMP结构、生理调控。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 白血病 肿痞转移
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应用寡聚核苷酸芯片检测白血病与其同胞供者的白血病基因表达差异
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作者 孙薏 董陆佳 +7 位作者 田方 王升启 贾治林 黄坚 陈泽建 李伍举 陈喜林 朱平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期450-454,共5页
为了应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究 9对白血病患者 /同胞供受者对之间的基因表达谱差异以识别主要的疾病相关基因 ,将 16 3条白血病 /肿瘤发病相关基因组群列入芯片设计 ,合成寡核苷酸探针 ,用点样仪点片制成基因芯片。提取病初白... 为了应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究 9对白血病患者 /同胞供受者对之间的基因表达谱差异以识别主要的疾病相关基因 ,将 16 3条白血病 /肿瘤发病相关基因组群列入芯片设计 ,合成寡核苷酸探针 ,用点样仪点片制成基因芯片。提取病初白血病患者及其供者的骨髓 /外周血标本或其相对应的健康同胞供者经G CSF动员后并经CS 30 0 0细胞分离机采集的浓集的 9份外周血造血干细胞的总RNA ;分别逆转录并进行寡核苷酸探针杂交。结果表明 :与其相应的正常供者配对比较 ,发现 4例ALL患者中存在 6条显著差异表达基因 ,其中上调表达基因 5条(RIZ ,STK 1,T cellleukemia/lymphoma 1A ,Cbp/ p30 0 ,Op18) ,下调表达 1条 (hematopoieticproteoglycancorepro tein) ;5例AML M4和AML M5患者中亦存在 7条显著差异表达基因 ,其中上调表达 6条 (STAT5B ,ligandp6 2fortheLckSH2 ,CST3,LTC4S ,myeloidleukemiafactor 2 ,epb72 ) ,下调表达 1条 (CCR5 )。结论 :选择有高度遗传关联的兄弟姐妹供受者对作为差异研究比照对象 ,利用寡聚核苷酸基因芯片技术进行疾病基因的筛查 ,筛查出了 13条主要异常基因 ;进一步确认了上述基因在白血病分子发病机制中的关键性作用。 展开更多
关键词 寡聚核苷酸芯片 白血病 供受者对 差异表达基因 造血干细胞移植
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