目的从噬菌体随机12肽库中筛选出MUC1抗原的模拟表位,构建MUC1模拟表位的原核表达载体。方法通过生物淘洗、基因测序和氨基酸序列比较,筛选出模拟表位,构建重组表达质粒PET-31b(+),用IPTG诱导表达,亲和层析纯化,W estern b lot鉴定其抗...目的从噬菌体随机12肽库中筛选出MUC1抗原的模拟表位,构建MUC1模拟表位的原核表达载体。方法通过生物淘洗、基因测序和氨基酸序列比较,筛选出模拟表位,构建重组表达质粒PET-31b(+),用IPTG诱导表达,亲和层析纯化,W estern b lot鉴定其抗原性。结果筛选到的模拟表位与MUC1单克隆抗体的亲和力较强。成功构建了重组表达质粒,重组蛋白在BL21(DE3)p lysS中得到诱导表达,纯化的目的蛋白在SDS-PAGE上呈现特异的单一条带,W estern印迹也检测到目的蛋白特异条带。结论筛选到了MUC1的模拟表位,成功表达和纯化了MUC1模拟表位蛋白,为研究其在肿瘤疫苗方面的应用奠定基础。展开更多
