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重组人干细胞因子／血小板生成素融合基因的克隆、表达及其蛋白质结构预测
1
作者
刘楠
奚永志
+6 位作者
郭斯启
孙玉英
袁志宏
崔建武
习彩霞
梁飞
孔繁华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期1919-1922,共4页
目的:获得重组人干细胞因子／血小板生成素(SCF-TPO)融合蛋白的高表达,预测该全新型融合蛋 白的蛋白质结构。方法:设计引物,利用RT-PCR从胎肝细胞中扩增SCF和TPO氨基端功能区片段,采用基因融合 新策略将其融合成SCF-TPO融合基因,构建pET...
目的:获得重组人干细胞因子／血小板生成素(SCF-TPO)融合蛋白的高表达,预测该全新型融合蛋 白的蛋白质结构。方法:设计引物,利用RT-PCR从胎肝细胞中扩增SCF和TPO氨基端功能区片段,采用基因融合 新策略将其融合成SCF-TPO融合基因,构建pET32a／SCF-TPO融合基因重组表达载体,在E．coli BL21(DE3)plysS 中获得正确高表达,采用生物信息学方法对融合蛋白的结构特征进行模拟分析。结果:首次成功构建了pEF32a／SCF -TPO原核表达载体,并获得了融合蛋白的高表达,表达量高达40％,主要以包涵体形式表达。蛋白结构预测结果 显示,融合蛋白的等电点、抗原性及亲水性无显著改变,接头序列具有高柔性。融合蛋白除一级结构有4个氨基酸发 生改变外,原来的α螺旋和β片层无改变。结论:获得了SCF-TPO融合蛋白的高表达,结构预测融合蛋白的设计符 合要求。为进一步研究SCF-TPO融合蛋白的生物学特性奠定了基础。
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关键词
干细胞因子
血小板生成素融合蛋白质
原核表达
蛋白质结构
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职称材料
题名
重组人干细胞因子／血小板生成素融合基因的克隆、表达及其蛋白质结构预测
1
作者
刘楠
奚永志
郭斯启
孙玉英
袁志宏
崔建武
习彩霞
梁飞
孔繁华
机构
军事医学科学院附属医院及国家生物医学分析中心免疫学研究室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第10期1919-1922,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.3980056)
国家博士后基金资助项目
文摘
目的:获得重组人干细胞因子／血小板生成素(SCF-TPO)融合蛋白的高表达,预测该全新型融合蛋 白的蛋白质结构。方法:设计引物,利用RT-PCR从胎肝细胞中扩增SCF和TPO氨基端功能区片段,采用基因融合 新策略将其融合成SCF-TPO融合基因,构建pET32a／SCF-TPO融合基因重组表达载体,在E．coli BL21(DE3)plysS 中获得正确高表达,采用生物信息学方法对融合蛋白的结构特征进行模拟分析。结果:首次成功构建了pEF32a／SCF -TPO原核表达载体,并获得了融合蛋白的高表达,表达量高达40％,主要以包涵体形式表达。蛋白结构预测结果 显示,融合蛋白的等电点、抗原性及亲水性无显著改变,接头序列具有高柔性。融合蛋白除一级结构有4个氨基酸发 生改变外,原来的α螺旋和β片层无改变。结论:获得了SCF-TPO融合蛋白的高表达,结构预测融合蛋白的设计符 合要求。为进一步研究SCF-TPO融合蛋白的生物学特性奠定了基础。
关键词
干细胞因子
血小板生成素融合蛋白质
原核表达
蛋白质结构
Keywords
Stem cell factor
Thrombopoitin fusion protein
Prokaryotic expression
Protein structure
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人干细胞因子／血小板生成素融合基因的克隆、表达及其蛋白质结构预测
刘楠
奚永志
郭斯启
孙玉英
袁志宏
崔建武
习彩霞
梁飞
孔繁华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
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