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脐血采集和分离过程中病原微生物污染概率的研究被引量：3: 1; 作者朱美玲陈汝光 +4 位作者奚永志胡燕芬欧阳玲张健黄建国《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期355-358,共4页; 为探讨脐血采集、分离过程中病原微生物污染的概率及不同检测方法的有效性,采用BACTEC 9050细菌培养系统和改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃)及硫乙醇酸盐(35℃)培养法对60份脐血同时进行采集后及分离后细菌和真菌的培养;对206份脐血血清标本采... 展开更多; 关键词脐血病原微生物污染概率造血干/祖细胞移植血细胞采集血细胞分离; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型重组免疫抑制融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL的分离纯化被引量：1: 2; 作者关海容孙玉英 +6 位作者袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期123-127,共5页; 为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结... 展开更多; 关键词重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 蛋白纯化靶向杀伤生物活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达被引量：4: 3; 作者刘爽奚永志 +5 位作者郭斯启刘楠梁飞金荔陈兴国孔繁华《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期22-26,共5页; 为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单... 展开更多; 关键词 IL-6受体 α亚单位mRNA 基因表达白血病细胞白血病; 在线阅读下载PDF 职称材料

IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力被引量：2: 4; 作者刘爽奚永志 +5 位作者郭斯启刘楠屠敏金荔陈兴国孔繁华《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期255-260,共6页; 目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6... 展开更多; 关键词白血病细胞 IL-6受体放射配体结合实验亲和力; 在线阅读下载PDF 职称材料

成体组织干细胞的“可塑性”或“横向分化”特性遭受重大质疑——成体组织干细胞真的具有“横向分化”或“可塑性”潜能? 被引量：1: 5; 作者奚永志唐佩弦《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期457-460,共4页; 关键词成体组织干细胞可塑性横向分化可塑性全能干细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定: 6; 作者关海容孙玉英 +6 位作者袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,166,共5页; 目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀... 展开更多; 关键词重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 肽谱抗原特异性生物学活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脐血采集和分离过程中病原微生物污染概率的研究被引量：3: 1; 作者朱美玲陈汝光奚永志胡燕芬欧阳玲张健黄建国; 机构深圳市宝安中心血站及脐血细胞库军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期355-358,共4页; 文摘为探讨脐血采集、分离过程中病原微生物污染的概率及不同检测方法的有效性,采用BACTEC 9050细菌培养系统和改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃)及硫乙醇酸盐(35℃)培养法对60份脐血同时进行采集后及分离后细菌和真菌的培养;对206份脐血血清标本采用ELISA法检测HBsAg,Anti-HBC,Anti-HCV,Anti-HCMV-IgM,HTLV-1,HTLV-2,HIV-1及HIV-2;用分子生物学方法检测HBV DNA和HCV RNA;用红细胞凝集法检测TPHA。研究结果显示:采用BACTEC 9050细菌培养系统,采集后脐血中细菌污染率为3.33％,真菌污染率为0％;细胞分离后细菌和真菌污染率分别增高到6.67％和1.67％;在该系统中,厌氧菌的阳性检出率远高于改马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃)。脐血血清病原菌检测结果表明:采用ELISA方法,HBsAg阳性率2.4％,Anti-HBC单项阳性率29.4％,Anti-HCMV-IgM阳性率1.89％ ;采用分子生物学方法,HBV DNA阳性率5.8％,HBsAg阴性而HBCAb单项阳性标本中HBV DNA阳性率6.7％,HCV RNA阳性率2.4％。结论:采集及分离后脉血细胞中病原微生物阳性率甚高;目前沿用的改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃)培养系统,会导致脐血中厌氧菌漏检,有必要更新该培养方法,如采用先进的BACTEC 9050培养体系。分子生物学方法可弥补ELISA等常规脐血传染病检测方法的缺陷。; 关键词脐血病原微生物污染概率造血干/祖细胞移植血细胞采集血细胞分离; Keywords cord blood pathogenic microorganism contamination probability; 分类号 R457.1 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型重组免疫抑制融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL的分离纯化被引量：1: 2; 作者关海容孙玉英袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志; 机构军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期123-127,共5页; 基金国家自然科学基金资助课题编号30200111; 文摘为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结果表明,在反相层析分离中疏水相分别采用了常规的甲醇和乙腈,结果为所分离的该重组融合蛋白均发生了变性,从色谱柱中分离出来就生成了絮状沉淀。在蓝染料亲和层析一步分离中,由于全菌体蛋白中与亲和树脂发生非特异结合的成分较多,极难区分目的蛋白和杂蛋白。但是,PRSETA-B7-2-PE40KDEL表达载体上带有翻译增强序列T7-g10,可在表达目的蛋白N端融合6个组氨酸,这十分有利于通过Ni-NTA金属鏊和层析法快速高纯度地纯化表达产物。根据这一特性,经反复筛选实验设计最终确定了金属螯合层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步法的纯化路线,用于纯化分离B7-2-PE40KDEL融合蛋白。所得的目的蛋白的纯度可达95%以上,总回收率为8%。Western-blot实验显示,所得蛋白可与B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT生物活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28受体的人T细胞系Jurkat产生特异性杀伤作用,而对不表达CD28的淋巴细胞系Raji无任何杀伤作用。结论:建立了高效快速纯化大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的技术路线,所纯化的重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白能特异性靶向杀伤表达CD28受体的人T细胞。; 关键词重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 蛋白纯化靶向杀伤生物活性; Keywords recombination exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL protein purification selective killing biological activity; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R730.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达被引量：4: 3; 作者刘爽奚永志郭斯启刘楠梁飞金荔陈兴国孔繁华; 机构军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期22-26,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目编号 3950 0 0 62和 39870 875; 文摘为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单位基因及蛋白在多种人白血病细胞细胞系中的表达。结果表明 ,粒系、单核系、红白血病细胞系HL 6 0 ,KG 1,U937和TF 1均高表达IL 6R的α亚单位基因和蛋白 ;淋巴系白血病细胞系Raji亦有一定量的基因表达 ;而淋巴系细胞等CEM和HuT2 8以及慢性粒细胞白血病细胞系K5 6 2无论是IL 6Rα亚单位的基因还是蛋白均为阴性。相对表达丰度依次为KG 1>TF 1>U2 6 6 >U937>HL 6 0 >Raji。鉴于粒系、单核系、红白血病细胞高表达IL 6Rα亚单位的基因和蛋白 ,而IL 6Rα亚单位蛋白在正常人外周血细胞均为阴性表达这一事实 ,提示可以利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白进行靶向杀伤和治疗这些白血病。; 关键词 IL-6受体 α亚单位mRNA 基因表达白血病细胞白血病; Keywords interleukin 6 receptor α subunit mRNA gene expression leukemic cell leukemia; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力被引量：2: 4; 作者刘爽奚永志郭斯启刘楠屠敏金荔陈兴国孔繁华; 机构军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期255-260,共6页; 基金国家自然科学基金 (3 95 0 0 0 62 ) (3 9870 875 )资助; 文摘目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6R在 8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL 6 0 ,KG1,TF1,K5 6 2 ,CEM ,HuT2 8和Raji上的表达密度及亲和力 ,同时应用流式细胞术 (FACS)检测IL 6R的α和 β亚单位蛋白在这些白血病细胞上的表达。结果 :RBA表明 ,粒、单、红白血病细胞系HL 6 0 ,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL 6R ,平均IL 6R密度 /细胞分别为 2 5 0 2个 ,2 874个 ,2 319个及 932 9个 ,而淋系白血病细胞系CEM ,HuT2 8和Raji以及慢粒K5 6 2细胞系则未测到IL 6R。FACS显示 ,HL 6 0 ,KG1,U937和TF1均高表达IL 6R的α亚单位蛋白 ,而CEM ,HuT2 8及K5 6 2则不表达IL 6Rα亚单位蛋白 ;IL 6Rβ亚单位蛋白在U937,KG1,TF1,HuT2 8及CEM中呈阳性表达 ,而在HL 6 0 ,Raji和K5 6 2细胞中则为阴性。结论 :鉴于粒、单、红白血病细胞异常高表达IL 6R ,而淋系和慢粒白血病呈阴性表达这一事实 ,提示急非淋白血病可能更适合用重组IL 6 PE40外毒素融合蛋白进行IL 6 /IL 6R介导的靶向治疗。; 关键词白血病细胞 IL-6受体放射配体结合实验亲和力; Keywords leukemic cells interleukin 6 receptor radial ligand binding assay affinity; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名成体组织干细胞的“可塑性”或“横向分化”特性遭受重大质疑——成体组织干细胞真的具有“横向分化”或“可塑性”潜能? 被引量：1: 5; 作者奚永志唐佩弦; 机构军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室军事医学科学院基础医学研究所; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期457-460,共4页; 关键词成体组织干细胞可塑性横向分化可塑性全能干细胞; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定: 6; 作者关海容孙玉英袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志; 机构北京军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫学研究室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,166,共5页; 基金国家自然科学基金资助课题(No.30200111); 文摘目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果:B7-2-PE40KDEL经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为72628,与理论预测值69561相比误差在5%之内;全波长扫描分析显示该目的蛋白分别在225nm和276nm处各有一吸收峰;MALTI-TOF-MS质谱测定共获得15个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为60000～80000的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与我们预测的目的蛋白相符;Westernblot实验显示B7-2-PE40KDEL能与人B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT杀伤活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28+的人T淋巴瘤细胞系Jurkat产生特异性杀伤,而对不表达的CD28-淋巴细胞系Raji无任何杀伤。结论:重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白为一全新的具有靶向B7:CD28细胞杀伤活性的蛋白质。; 关键词重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 肽谱抗原特异性生物学活性; Keywords Recombination exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL Peptide mass fingerprinting Antigen specificity Biogical activity; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	脐血采集和分离过程中病原微生物污染概率的研究	朱美玲陈汝光奚永志胡燕芬欧阳玲张健黄建国	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	新型重组免疫抑制融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL的分离纯化	关海容孙玉英袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达	刘爽奚永志郭斯启刘楠梁飞金荔陈兴国孔繁华	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力	刘爽奚永志郭斯启刘楠屠敏金荔陈兴国孔繁华	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2000	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	成体组织干细胞的“可塑性”或“横向分化”特性遭受重大质疑——成体组织干细胞真的具有“横向分化”或“可塑性”潜能?	奚永志唐佩弦	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定	关海容孙玉英袁志宏张惠丽梁飞刘楠郭斯启习彩霞奚永志	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料