B7-PE40新型重组融合外毒素的分子生物学特性预测 被引量：2

1

作者 张惠丽 奚永志 +4 位作者 孔繁华 陈汝光 袁志宏 刘楠 关海容 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期327-332,共6页

为探讨构建的重组外毒素融合蛋白B7 1 Linker PE4 0和B7 2 Linker PE4 0及其接头设计的合理性 ,应用核酸和蛋白质序列分析软件系统GOLDKEY ,对上述重组外毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位和二级结构等分子生物学特性进行了... 为探讨构建的重组外毒素融合蛋白B7 1 Linker PE4 0和B7 2 Linker PE4 0及其接头设计的合理性 ,应用核酸和蛋白质序列分析软件系统GOLDKEY ,对上述重组外毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位和二级结构等分子生物学特性进行了计算机模拟预测。结果发现它们分别保留了B7 1,B7 2和PE4 0的表位特征 ,没有出现新的表位 ,其柔性接头处的抗原性也极低。与B7 1,B7 2和PE4 0的一、二级结构比较发现 ,这两种融合蛋白各有数个氨基酸残基改变 ,有的氨基酸改变可轻微影响融合蛋白的二级结构。原核表达的两个融合蛋白经Western印迹分析显示 ,它们能分别与B7 1,B7 2和PE4 0单克隆抗体发生特异性结合 ,表明它们较好地保留了B7和PE4 0的抗原性和空间结构 ,与预测的结果一致。提示预测结果会有助于我们研究该系列融合蛋白的体内、外生物学效应 ,以及设计构建新的其他融合蛋白。 展开更多

关键词 B7-PE40重组融合外毒素蛋白 分子结构预测 计算机模拟 分子生物学 移植免疫学

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MHC结构与功能的研究进展 被引量：2

2

作者 孙玉英 孔繁华 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期227-230,共4页

MHC分子首先作为主要组织相容性抗原被发现 ,进而依此命名。随着其抗原结合分子及T细胞信使生物学功能本质的揭示 ,MHC为什么是主要组织相容性抗原的谜底就昭然于世。约10年前 ,MHC分子的抗原结合骨架结构首次被阐明 ,关于MHC结构与功... MHC分子首先作为主要组织相容性抗原被发现 ,进而依此命名。随着其抗原结合分子及T细胞信使生物学功能本质的揭示 ,MHC为什么是主要组织相容性抗原的谜底就昭然于世。约10年前 ,MHC分子的抗原结合骨架结构首次被阐明 ,关于MHC结构与功能的研究就进入了一个方兴未艾的崭新时代 ,并在这一领域中取得了许多可喜的成果。对此 。 展开更多

关键词 MHC HLA T细胞信使NK细胞 抗原结合骨架

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IL-6D_(24)- Linker-PE40重组毒素的分子生物学特性预测 被引量：1

3

作者 郑黎燕 奚永志 +4 位作者 孔繁华 陈兴国 金荔 屠敏 刘楠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期339-341,共3页

目的：探讨重组毒素ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０融合蛋白及其接头设计的合理性。方法：应用核酸和蛋白质序列分析软件系统ＧＯＬＤＫＥＹ软件，对ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０重组毒素融合蛋白的柔性、抗原性... 目的：探讨重组毒素ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０融合蛋白及其接头设计的合理性。方法：应用核酸和蛋白质序列分析软件系统ＧＯＬＤＫＥＹ软件，对ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０重组毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位等分子生物学特性进行计算机模拟预测，并做Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析进行验证。结果：ＩＬ６Ｄ２４ＬｉｎｋｅｒＰＥ４０分别保留了ＩＬ６Ｄ２４和ＰＥ４０的表位特征，没有新的抗原表位出现，而且柔性接头处具有极低的抗原性。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析结果表明融合蛋白能分别与ＩＬ６和ＰＥＡ的单克隆抗体发生特异结合，这说明融合蛋白保留了ＩＬ６和ＰＥ４０的空间结构特征。 展开更多

关键词 LINKER PE40 重组毒素 分子结构预测

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新型重组免疫抑制融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL的分离纯化 被引量：1

4

作者 关海容 孙玉英 +6 位作者 袁志宏 张惠丽 梁飞 刘楠 郭斯启 习彩霞 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期123-127,共5页

为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结... 为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结果表明,在反相层析分离中疏水相分别采用了常规的甲醇和乙腈,结果为所分离的该重组融合蛋白均发生了变性,从色谱柱中分离出来就生成了絮状沉淀。在蓝染料亲和层析一步分离中,由于全菌体蛋白中与亲和树脂发生非特异结合的成分较多,极难区分目的蛋白和杂蛋白。但是,PRSETA-B7-2-PE40KDEL表达载体上带有翻译增强序列T7-g10,可在表达目的蛋白N端融合6个组氨酸,这十分有利于通过Ni-NTA金属鏊和层析法快速高纯度地纯化表达产物。根据这一特性,经反复筛选实验设计最终确定了金属螯合层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步法的纯化路线,用于纯化分离B7-2-PE40KDEL融合蛋白。所得的目的蛋白的纯度可达95%以上,总回收率为8%。Western-blot实验显示,所得蛋白可与B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT生物活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28受体的人T细胞系Jurkat产生特异性杀伤作用,而对不表达CD28的淋巴细胞系Raji无任何杀伤作用。结论:建立了高效快速纯化大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的技术路线,所纯化的重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白能特异性靶向杀伤表达CD28受体的人T细胞。 展开更多

关键词 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 蛋白纯化 靶向杀伤 生物活性

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新霉素耐药基因(Neo^R)的整合与表达并不改变人乳癌细胞(MDA)的原有生物学特性

5

作者 郭斯启 奚永志 +3 位作者 宋三泰 金荔 陈兴国 孔繁华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期729-731,共3页

目的：通过对比ＭＤＡ－ ＮｅｏＲ 与ＭＤＡ 人乳癌细胞的生物学特征，阐明原核标志基因ＮｅｏＲ 的长期稳定整合与表达是否对乳癌细胞原有的生物学特性产生影响。方法：对已建立且证实表达ＮｅｏＲ 基因＞ ６ 个月的７ 株ＭＤＡ－Ｎｅ... 目的：通过对比ＭＤＡ－ ＮｅｏＲ 与ＭＤＡ 人乳癌细胞的生物学特征，阐明原核标志基因ＮｅｏＲ 的长期稳定整合与表达是否对乳癌细胞原有的生物学特性产生影响。方法：对已建立且证实表达ＮｅｏＲ 基因＞ ６ 个月的７ 株ＭＤＡ－ＮｅｏＲ 细胞系进行Ｇ４１８ 抗性、表面抗原、细胞倍增时间、细胞周期、肿瘤细胞集落形成及裸鼠体内成瘤能力的检测。结果：ＭＤＡ－ ＮｅｏＲ 细胞对高浓度的Ｇ４１８ 仍产生抗性并表达Ｎｅｏ Ｒ 基因；其细胞倍增时间、Ｓ 期分数、肿瘤细胞体外集落形成率与ＭＤＡ 无明显区别（ Ｐ＞ ０－０５） ；角蛋白ＣＫ１９ 与表面膜抗原ＥＭＡ 的表达在两组是等同的；并且ＭＤＡ－ ＮｅｏＲ ７ 细胞系在裸鼠体内的成瘤能力与ＭＤＡ 细胞也是相似的。结论：外源标志基因ＮｅｏＲ 的长期稳定整合与表达对ＭＤＡ 展开更多

关键词 新霉素 乳腺癌 MDA-Neo^R 耐药基因

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过继免疫疗法在异基因造血干细胞移植中的应用

6

作者 孙玉英 奚永志 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期676-678,共3页

近年来免疫识别等方面取得的一些研究进展为克服或逆转异基因造血干细胞移植(Allo-HSC T)的主要伴发症--继发性免疫缺陷和移植物抗宿病(GVHD)提供了新思路:如过继输注病毒特异性T淋巴细胞,重建移植病人的特异性免疫功能;Allo-HSCT后行... 近年来免疫识别等方面取得的一些研究进展为克服或逆转异基因造血干细胞移植(Allo-HSC T)的主要伴发症--继发性免疫缺陷和移植物抗宿病(GVHD)提供了新思路:如过继输注病毒特异性T淋巴细胞,重建移植病人的特异性免疫功能;Allo-HSCT后行供体淋巴细胞输入(DLI) 延长病人的缓解期,以及诱导移植物抗白血病(GVL)效应等.因此,本文就近几年来异基因造血干细胞移植中过继免疫疗法的某些研究进展进行综述. 展开更多

关键词 异基因造血干细胞移植 EB病毒 过继免疫治疗 CMV

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脐血采集和分离过程中病原微生物污染概率的研究 被引量：3

7

作者 朱美玲 陈汝光 +4 位作者 奚永志 胡燕芬 欧阳玲 张健 黄建国 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期355-358,共4页

为探讨脐血采集、分离过程中病原微生物污染的概率及不同检测方法的有效性,采用BACTEC 9050细菌培养系统和改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃)及硫乙醇酸盐(35℃)培养法对60份脐血同时进行采集后及分离后细菌和真菌的培养;对206份脐血血清标本采... 为探讨脐血采集、分离过程中病原微生物污染的概率及不同检测方法的有效性,采用BACTEC 9050细菌培养系统和改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃)及硫乙醇酸盐(35℃)培养法对60份脐血同时进行采集后及分离后细菌和真菌的培养;对206份脐血血清标本采用ELISA法检测HBsAg,Anti-HBC,Anti-HCV,Anti-HCMV-IgM,HTLV-1,HTLV-2,HIV-1及HIV-2;用分子生物学方法检测HBV DNA和HCV RNA;用红细胞凝集法检测TPHA。研究结果显示:采用BACTEC 9050细菌培养系统,采集后脐血中细菌污染率为3.33％,真菌污染率为0％;细胞分离后细菌和真菌污染率分别增高到6.67％和1.67％;在该系统中,厌氧菌的阳性检出率远高于改马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃)。脐血血清病原菌检测结果表明:采用ELISA方法,HBsAg阳性率2.4％,Anti-HBC单项阳性率29.4％,Anti-HCMV-IgM阳性率1.89％ ;采用分子生物学方法,HBV DNA阳性率5.8％,HBsAg阴性而HBCAb单项阳性标本中HBV DNA阳性率6.7％,HCV RNA阳性率2.4％。结论:采集及分离后脉血细胞中病原微生物阳性率甚高;目前沿用的改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃)培养系统,会导致脐血中厌氧菌漏检,有必要更新该培养方法,如采用先进的BACTEC 9050培养体系。分子生物学方法可弥补ELISA等常规脐血传染病检测方法的缺陷。 展开更多

关键词 脐血 病原微生物 污染概率 造血干/祖细胞移植 血细胞采集 血细胞分离

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我国汉族人群HLAⅠ类经典基因单倍型及连锁分析 被引量：11

8

作者 袁方 孙玉英 +6 位作者 骆媛 梁飞 刘楠 金荔 刘金锋 刘曙光 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期1084-1089,共6页

本研究旨在探讨我国汉族人群HLAⅠ类经典基因座位HLA-A、HLA-B、HLA-Cw位点的基因频率,单倍型频率及连锁特征。采用序列特异性引物(SSP)PCR低分辨基因分型技术对1014例随机选择的无关个体的经典HLAⅠ类位点进行基因分型,并对其相关遗传... 本研究旨在探讨我国汉族人群HLAⅠ类经典基因座位HLA-A、HLA-B、HLA-Cw位点的基因频率,单倍型频率及连锁特征。采用序列特异性引物(SSP)PCR低分辨基因分型技术对1014例随机选择的无关个体的经典HLAⅠ类位点进行基因分型,并对其相关遗传学参数进行统计学分析。结果发现汉族人群中较为常见的HLA-Ⅰ类基因是A*02(0.33)、A*11(0.24)、B*15(0.14)、B*13(0.13)、Cw*03(0.25)、Cw*07(0.18);较为常见的单倍型是A*02-B*46(0.071)、A*11-B*15(0.051)、A*02-Cw*01(0.084)、A*11-Cw*03(0.079)、B*46-Cw*01(0.095)和B*13-Cw*03(0.071)等,其中A*02-B*46、A*30-B*13、A*30-Cw*06、A*02-Cw*01、B*46-Cw*01和B*58-Cw*03等单倍型呈现出显著的连锁不平衡;而A*02-B*15、A*02-B*40、A*24-Cw*03、A*02-Cw*03、A*31-Cw*03等连锁不平衡性相对较低,其中A*24-Cw*03在重组事件中较常出现。此外,A*02-B*46-Cw*01(0.075)、A*30-B*13-Cw*06(0.046)、A*11-B*13-Cw*03(0.045)、A*33-B*58-Cw*03(0.044)、A*11-B*15-Cw*08(0.027)、A*02-B*38-Cw*07(0.023)、A*11-B*40-Cw*07(0.022)等为常见扩展单倍型。结论:本研究较系统地分析了我国汉族人群的HLA遗传学分布特点,为群体进化、临床移植及疾病相关研究等提供了有价值的遗传学资料。 展开更多

关键词 HIA Ⅰ类基因 遗传多态性 基因频率 单倍型频率 连锁不平衡

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IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达 被引量：4

9

作者 刘爽 奚永志 +5 位作者 郭斯启 刘楠 梁飞 金荔 陈兴国 孔繁华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期22-26,共5页

为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单... 为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单位基因及蛋白在多种人白血病细胞细胞系中的表达。结果表明 ,粒系、单核系、红白血病细胞系HL 6 0 ,KG 1,U937和TF 1均高表达IL 6R的α亚单位基因和蛋白 ;淋巴系白血病细胞系Raji亦有一定量的基因表达 ;而淋巴系细胞等CEM和HuT2 8以及慢性粒细胞白血病细胞系K5 6 2无论是IL 6Rα亚单位的基因还是蛋白均为阴性。相对表达丰度依次为KG 1>TF 1>U2 6 6 >U937>HL 6 0 >Raji。鉴于粒系、单核系、红白血病细胞高表达IL 6Rα亚单位的基因和蛋白 ,而IL 6Rα亚单位蛋白在正常人外周血细胞均为阴性表达这一事实 ,提示可以利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白进行靶向杀伤和治疗这些白血病 。 展开更多

关键词 IL-6受体 α亚单位mRNA 基因表达 白血病细胞 白血病

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IL-6/IL-6R系统介导靶向治疗白血病策略 被引量：7

10

作者 崔建武 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期184-187,共4页

导向杀伤是治疗白血病的必然趋势 ,而IL 6 IL 6R系统是细胞因子 受体导向治疗的重要部分。IL 6R在很多肿瘤细胞上都有表达 ,如多发性骨髓瘤、前列腺癌、白血病等。本文简要综述了IL 6R的表达、IL

关键词 白细胞介素6 IL-6R IL-6重组毒素融合蛋白 抗白血病效应 白血病 靶向治疗

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编码人B7-2胞外区cDNA的克隆、表达及生物活性鉴定 被引量：2

11

作者 袁志宏 奚永志 +3 位作者 孔繁华 张惠丽 刘楠 梁飞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期508-511,共4页

B7 2分子是共刺激信号系统B7/CD2 8/CTLA 4中的重要成员之一 ,为了更深入地探讨B7 2分子在调控T细胞增殖、分化及相关信号传导过程中的作用 ,本研究通过聚合酶链式反应 (PCR)扩增编码人B7 2分子胞外区的cDNA ,测序后定向插入多个原核表... B7 2分子是共刺激信号系统B7/CD2 8/CTLA 4中的重要成员之一 ,为了更深入地探讨B7 2分子在调控T细胞增殖、分化及相关信号传导过程中的作用 ,本研究通过聚合酶链式反应 (PCR)扩增编码人B7 2分子胞外区的cDNA ,测序后定向插入多个原核表达载体并诱导目的蛋白表达 ,用Western印迹和MTT鉴定生物活性。结果表明 :通过pGEX 4T 2载体实现了在宿主菌BL 2 1 (DE3) codenplus RIL中较高水平的表达 ,蛋白表达量为 2 0 %。经Western印迹和MTT鉴定 ,所表达及初步纯化的B7 2胞外区重组蛋白能与抗人B7 2单抗发生特异性结合 ;在抗人CD3单抗的协同下 ,B7 2胞外区重组蛋白能有效地促进外周血单核细胞的增殖。结论 :B7 2胞外区重组蛋白的获得为进一步研究B7 展开更多

关键词 编码 人B7-2胞外区 CDNA 生物活性 鉴定 共刺激信号系统 原核表达 基因克隆

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HL-60细胞中IL6基因的克隆及鉴定 被引量：2

12

作者 郑黎燕 奚永志 +5 位作者 孔繁华 鱼咏涛 金荔 陈兴国 屠敏 刘楠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期389-391,共3页

目的：为探索性构建重组人白细胞介素６－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＩＬ６－ＰＥ４０）以选择性杀伤高表达ＩＬ６受体（ＩＬ６Ｒ）的白血病细胞，本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株（ＨＬ－６０）中克隆Ｎ－末端缺失２４个氨基... 目的：为探索性构建重组人白细胞介素６－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＩＬ６－ＰＥ４０）以选择性杀伤高表达ＩＬ６受体（ＩＬ６Ｒ）的白血病细胞，本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株（ＨＬ－６０）中克隆Ｎ－末端缺失２４个氨基酸的人ＩＬ６基因（ＩＬ６ｃＤＮＡ）并构建含此基因的重组质粒。方法：根据ＩＬ６基因序列设计合成可扩增ＩＬ６ｃＤＮＡ的特异性引物；利用基因重组技术，构建含ＩＬ６基因的重组质粒ｐＵＣ－ＩＬ６。结果与结论：本文首次从ＨＬ－６０中扩增出预期４８０ｂｐ的ＩＬ６ｃＤＮＡ，将其克隆至ｐＵＣ１８质粒中，命名为ｐＵＣ－ＩＬ６，并经ＥｃｏＲＩ／ＢａｍＨＩ双酶切电泳及序列分析鉴定加以确证，为进一步构建重组人ＩＬ６－ＰＥ４０奠定了坚实基础。 展开更多

关键词 白细胞介素6 白血病 HL-60细胞 克隆 融合蛋白

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IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力 被引量：2

13

作者 刘爽 奚永志 +5 位作者 郭斯启 刘楠 屠敏 金荔 陈兴国 孔繁华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期255-260,共6页

目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6... 目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6R在 8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL 6 0 ,KG1,TF1,K5 6 2 ,CEM ,HuT2 8和Raji上的表达密度及亲和力 ,同时应用流式细胞术 (FACS)检测IL 6R的α和 β亚单位蛋白在这些白血病细胞上的表达。结果 :RBA表明 ,粒、单、红白血病细胞系HL 6 0 ,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL 6R ,平均IL 6R密度 /细胞分别为 2 5 0 2个 ,2 874个 ,2 319个及 932 9个 ,而淋系白血病细胞系CEM ,HuT2 8和Raji以及慢粒K5 6 2细胞系则未测到IL 6R。FACS显示 ,HL 6 0 ,KG1,U937和TF1均高表达IL 6R的α亚单位蛋白 ,而CEM ,HuT2 8及K5 6 2则不表达IL 6Rα亚单位蛋白 ;IL 6Rβ亚单位蛋白在U937,KG1,TF1,HuT2 8及CEM中呈阳性表达 ,而在HL 6 0 ,Raji和K5 6 2细胞中则为阴性。结论 :鉴于粒、单、红白血病细胞异常高表达IL 6R ,而淋系和慢粒白血病呈阴性表达这一事实 ,提示急非淋白血病可能更适合用重组IL 6 PE40外毒素融合蛋白进行IL 6 /IL 6R介导的靶向治疗。 展开更多

关键词 白血病细胞 IL-6受体 放射配体结合实验 亲和力

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两代间HLA基因分型完全相合家系2例 被引量：4

14

作者 梁飞 刘楠 +1 位作者 孙玉英 奚永志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1159-1160,共2页

完全相合的异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的有效手段。由于我国独生子女日益增多,大部分儿童患者没有获得人类白细胞抗原（HLA）完全相合供者的可能,导致多数高危白血病患儿失去了治疗机会。根据遗传学规律,

关键词 血液肿瘤 HLA抗原

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人正常骨髓CD34^+造血细胞体外扩增形成粒单系造血祖细胞的能力 被引量：2

15

作者 奚永志 孔繁华 +4 位作者 金荔 陈兴国 张双喜 唐佩弦 魏文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期574-578,共5页

CD34+造血细胞以其独特的生物学功能正成为造血调控、造血于细胞移植和基因治疗最理想的靶细胞。本文探讨人正常骨髓CD34+造血细胞在体外扩增形成单个核细胞（MNC）及粒单系集落形成单位（CFU－GM）的能力，采用CIMS－100新型免疫磁性... CD34+造血细胞以其独特的生物学功能正成为造血调控、造血于细胞移植和基因治疗最理想的靶细胞。本文探讨人正常骨髓CD34+造血细胞在体外扩增形成单个核细胞（MNC）及粒单系集落形成单位（CFU－GM）的能力，采用CIMS－100新型免疫磁性无菌分离术可获得纯度＞90％的CD34+造血细胞，其直接形成CFLJ－GM的能力要较骨髓MNC提高的倍，并且在含EGIIS组合造血生长因子的无基质液培养系统中，CD34+造血细胞在四周内可持续扩增产生大量MNC及CFU－GM，最高分别可达1770倍和48倍，但不同个体问CD34+造血细胞的这种能力差别较大。上述结果提示，CD34+造血细胞在最佳组合HGFs的无基质液培养条件下，能扩增产生大量成熟及晚期造血祖细胞，可以适用于临床治疗的需求， 展开更多

关键词 造血干细胞 培养基 骨髓 体外扩增 靶细胞

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IL-6/IL-6R系统与重组IL-6-PE40融合蛋白 被引量：7

16

作者 奚永志 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期433-437,共5页

ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒ系统与重组ＩＬ－６－ＰＥ４０融合蛋白军事医学科学院附属医院免疫学研究室（北京１０００３９）奚永志ＩＬ－６／ＩＬ－６－ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｙｓｔｅｍａｎｄｒｅｃｏｍｂｉｎａｎＩＬ６－ＰＥ４０ｅｘｏｔ... ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒ系统与重组ＩＬ－６－ＰＥ４０融合蛋白军事医学科学院附属医院免疫学研究室（北京１０００３９）奚永志ＩＬ－６／ＩＬ－６－ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｙｓｔｅｍａｎｄｒｅｃｏｍｂｉｎａｎＩＬ６－ＰＥ４０ｅｘｏｔｏｘｉｎｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ... 展开更多

关键词 IL-6 IL-6R 白血病 IL-6P-E40 融合蛋白

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重组GM-CSF/IL3融合蛋白——细胞生长因子发展的新趋势 被引量：1

17

作者 奚永志 孔繁华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期544-548,共5页

正常状态下造血细胞的生存增殖、分化、成熟及程序性死亡是由造血网络调控的，这是一个十分精密复杂而又协调的过程，涉及到各种已知的正负造血生长因子、转录因子、基质细胞以及造血干／祖细胞和成熟细胞等因素。业已证明，多种造血生... 正常状态下造血细胞的生存增殖、分化、成熟及程序性死亡是由造血网络调控的，这是一个十分精密复杂而又协调的过程，涉及到各种已知的正负造血生长因子、转录因子、基质细胞以及造血干／祖细胞和成熟细胞等因素。业已证明，多种造血生长因子的联合能最有效地刺激造血，该... 展开更多

关键词 细胞生长因子 融合蛋白 GM-CSF IL3

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成体组织干细胞的“可塑性”或“横向分化”特性遭受重大质疑——成体组织干细胞真的具有“横向分化”或“可塑性”潜能? 被引量：1

18

作者 奚永志 唐佩弦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期457-460,共4页

关键词 成体组织干细胞 可塑性 横向分化 可塑性 全能干细胞

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新型重组融合毒素蛋白B7-2-PE40KDEL部分表征的鉴定

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作者 关海容 孙玉英 +6 位作者 袁志宏 张惠丽 梁飞 刘楠 郭斯启 习彩霞 奚永志 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,166,共5页

目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀... 目的:对构建的新型重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分表征进行分析鉴定。方法:采用SDS-PAGE相对分子量、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱、蛋白印迹、全波长扫描和MTT法分别测定该融合蛋白相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果:B7-2-PE40KDEL经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为72628,与理论预测值69561相比误差在5%之内;全波长扫描分析显示该目的蛋白分别在225nm和276nm处各有一吸收峰;MALTI-TOF-MS质谱测定共获得15个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为60000～80000的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与我们预测的目的蛋白相符;Westernblot实验显示B7-2-PE40KDEL能与人B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT杀伤活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28+的人T淋巴瘤细胞系Jurkat产生特异性杀伤,而对不表达的CD28-淋巴细胞系Raji无任何杀伤。结论:重组B7-2-PE40KDEL外毒素融合蛋白为一全新的具有靶向B7:CD28细胞杀伤活性的蛋白质。 展开更多

关键词 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 肽谱 抗原特异性 生物学活性

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多次成分血输注致HLA基因分型结果无法判定1例

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作者 梁飞 刘楠 +1 位作者 孙玉英 奚永志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期549-549,共1页

目前临床用血多为成分输血，成分血分离自全血，不可避免会残留少量白细胞或血小板。而有核细胞或血小板表面存在的HLA会随着输血进入患者体内，异体HLA抗原可对患者的HLA分型判定产生干扰。

关键词 HLA抗原 血液成分输血 序列特异性引物-聚合酶 链式反应

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