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树突状细胞疫苗设计策略的研究进展 被引量:1
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作者 周勇 王海平 王全立 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1205-1206,共2页
关键词 树突细胞 疫苗 抗原呈递细胞
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丙型肝炎病毒细胞和动物模型研究
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作者 卓海龙 孙萍 詹林盛 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期498-500,共3页
关键词 肝炎病毒 丙型 模型 动物
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人IL-12表达质粒联合含信号肽Mtb8.4基因疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果 被引量:1
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作者 李晖 李榕 +1 位作者 钟森 任红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期291-294,共4页
目的研究结核分枝杆菌含信号肽Mtb8.4(MS)基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠后,诱导的细胞免疫应答及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。方法将40只C57BL/6N小鼠随机分为联合免疫组(MS基因疫苗+hIL-12组)、MS基因疫苗组、... 目的研究结核分枝杆菌含信号肽Mtb8.4(MS)基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠后,诱导的细胞免疫应答及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。方法将40只C57BL/6N小鼠随机分为联合免疫组(MS基因疫苗+hIL-12组)、MS基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组。将基因疫苗、空载体和PBS,经肌内注射免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次;BCG组经尾部皮下注射1×106CFU BCG免疫1次。采用ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子的水平;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠细胞毒性T细胞的杀伤活性。用结核杆菌强毒株H37Rv静脉攻击小鼠后,计数肺和脾组织中结核杆菌的菌落数。对小鼠的部分肺和脾组织作病理切片,经HE染色观察组织病变的程度,经ZN染色检查抗酸杆菌,观察该疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。结果联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-2的水平,与BCG组相当,显著高于MS基因疫苗组,IL-4分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强,对小鼠结核杆菌感染有较好的免疫保护效果。表现为小鼠肺和脾组织中结核杆菌的菌落数显著减少,组织病变明显减轻,其效果与卡介苗(BCG)组相当,但优于MS基因疫苗组。结论以hIL-12表达质粒与MS基因疫苗联合免疫后,能显著增强MS基因疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。 展开更多
关键词 含信号肽Mtb8.4(MS) hIL-12 联合免疫 细胞免疫应答 小鼠
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NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区的表达及纯化
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作者 李晖 崔玉 +4 位作者 周勇 彭剑淳 孙红琰 詹林盛 王全立 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期943-945,960,共4页
目的表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区。方法以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-D... 目的表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区。方法以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-DsbA/KIR3DL1重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DL1融合蛋白表达,溶解于8mol/L尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Superdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Westernblot鉴定目的蛋白的表达及纯化。结果表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度95%以上的DsbA-KIR3DS1融合蛋白。结论KIR3DL1胞外区的成功表达及纯化为进一步研究KIR3DL1与相应配体之间的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 NK细胞免疫球蛋白样受体 原核表达 蛋白纯化
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