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新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制被引量：9: 1; 作者连海金宁一 +7 位作者李霄陈立刚张静敏管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期222-227,共6页; 为了探索新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制,将含有HN基因的重组质粒pVHN经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析肿瘤细胞凋亡;罗丹明123和DCF... 展开更多; 关键词新城疫病毒 HN基因人肺癌细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定被引量：4: 2; 作者陈漉金宁一 +7 位作者李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松李明迟宝荣《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-135,共4页; 目的：构建表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶（Hemagglutinin—neuramidinase，FIN）基因的重组腺病毒，为进一步研究HN基因对消化道肿瘤的抑制作用及分子机制建立基础。方法：用BamHI和XbaⅠ双酶切质粒pVHN，将获得的HN基因片段连接入... 展开更多; 关键词 NDV HN基因重组腺病毒抗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

转染IL-18基因慢性粒细胞白血病树突状细胞的抗白血病作用: 3; 作者李杰丁艳华 +2 位作者邵明柏王冠军金宁一《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1061-1065,共5页; 目的:探讨转染IL-18基因慢性粒细胞白血病(CML)树突状细胞(DCs)的抗白血病免疫作用。方法:以脂质体介导法将pVAX1-IL-18真核表达质粒转染CML DCs,检测转染IL-18 DCs的IL-18表达,通过流式细胞仪检测转染IL-18 DCs的CD80+、CD86+细胞百分... 展开更多; 关键词白血病髓样慢性树突细胞白细胞介素18 抗白血病作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡贫血病毒VP3基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制: 4; 作者连海金宁一 +6 位作者李霄陈立刚管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1063-1066,共4页; 探索了重组质粒pVVP3对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制.将pVVP3经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测了细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色分析了肿瘤细胞凋亡;采用罗丹明123和DCFA染色测定了线粒体跨膜电位（△Ψ... 展开更多; 关键词鸡贫血病毒VP3 人肺癌细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型抗HIV-1蛋白GRFT的构建、表达及活性研究被引量：4: 5; 作者李昌李霄 +7 位作者刘玉生于芳韩佳丽胡博叶明王婧杜寿文金宁一《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期95-99,共5页; 根据已知的新型抗HIV-1蛋白Griffithsin(GRFT)基因氨基酸序列,推测其DNA编码序列,对密码子优化及修饰后进行全基因化学合成,连接到原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,获得目的蛋白.SDS-PAGE和Western Blot分... 展开更多; 关键词 HIV-1 抗病毒蛋白 GRFT 表达生物活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应被引量：1: 6; 作者朱继红崔满华 +6 位作者李霄孙丽丽张钰陈漉刘立明张振民金宁一《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期237-240,共4页; 目的:探讨Apoptin基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用和作用方式。方法:应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin和载体质粒pVAX1分别体外转染Hela细胞,作为重组质粒pVAX1-Apoptin组和载体质粒pVAX1组,同时设空白细胞对照组。应用Wester... 展开更多; 关键词宫颈肿瘤 Apoptin基因细胞凋亡抑瘤作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制被引量：9: 1; 作者连海金宁一李霄陈立刚张静敏管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬; 机构解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室吉林大学农学部图书馆; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期222-227,共6页; 基金国家重点基础研究发展规划(973计划)资助项目(No.G1999011902)~~; 文摘为了探索新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制,将含有HN基因的重组质粒pVHN经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析肿瘤细胞凋亡;罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位(ΔΨm)和活性氧水平变化;流式细胞仪分析MHC-Ⅰ分子表达;底物染色反应检测caspase-3活性.结果重组质粒pVHN转染人肺癌细胞SPC-A148h后,细胞活力明显降低;AO/EB染色可见明显的细胞凋亡形态学变化;与空质粒对照相比,线粒体ΔΨm下降(P<0·01),活性氧水平升高(P<0·05);细胞表面MHC-Ⅰ分子表达上调(P>0·05);caspase-3活性增强(P<0·01).以上结果提示,新城疫病毒HN基因能够上调SPC-A1细胞表面MHC-Ⅰ分子表达,并通过上调ROS水平,下调线粒体ΔΨm,进而激活caspase-3,最终诱导人肺癌细胞凋亡.; 关键词新城疫病毒 HN基因人肺癌细胞凋亡; Keywords Newcastle disease virus hemagglutinin-neuraminidase gene human lung carcinoma cell apoptosis; 分类号 Q255 [生物学—细胞生物学] Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定被引量：4: 2; 作者陈漉金宁一李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松李明迟宝荣; 机构吉林大学第一医院消化科军事医学科学院解放军基因工程重点实验室吉林省人民医院血液科吉林大学第三医院骨科通化市中心医院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-135,共4页; 基金科技部国家高科技发展计划“863计划”(2007AA021004) 吉林省科技发展计划项目(20060566)资助; 文摘目的：构建表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶（Hemagglutinin—neuramidinase，FIN）基因的重组腺病毒，为进一步研究HN基因对消化道肿瘤的抑制作用及分子机制建立基础。方法：用BamHI和XbaⅠ双酶切质粒pVHN，将获得的HN基因片段连接入穿梭质粒pacAd5 CMV K-N pA，构建含HN基因的穿梭质粒pacAd5-HN。利用PacI单酶切对pacAd5-HN和腺病毒基因组质粒（pAd5）进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞，分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定，并测定所获得重组病毒的滴度。结果：所构建重组病毒可有效表达HN基因，表达产物分子量约为63kD，重组病毒滴度为10^8～10610PFU／ml。结论：成功构建含HN基因的重组腺病毒，所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求。; 关键词 NDV HN基因重组腺病毒抗肿瘤; Keywords NDV HN gene Adenovirus vector Anti-tumor; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转染IL-18基因慢性粒细胞白血病树突状细胞的抗白血病作用: 3; 作者李杰丁艳华邵明柏王冠军金宁一; 机构吉林大学第一医院干部病房内科军事医学科学院解放军基因工程重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1061-1065,共5页; 基金吉林省科技厅资助课题(20001108); 文摘目的:探讨转染IL-18基因慢性粒细胞白血病(CML)树突状细胞(DCs)的抗白血病免疫作用。方法:以脂质体介导法将pVAX1-IL-18真核表达质粒转染CML DCs,检测转染IL-18 DCs的IL-18表达,通过流式细胞仪检测转染IL-18 DCs的CD80+、CD86+细胞百分率,并检测IL-18基因修饰DCs刺激T细胞增殖能力、特异性CTL杀伤作用及诱导的NK细胞的杀伤活性。结果:转染IL-18 DCs上清中IL-18的含量为(596±34.1)pg/2×106cells/48 h,而在转染空质粒DCs和DCs上清中未检测到IL-18,且转染IL-18 DCs的CD80+、CD86+细胞百分率高于转染空质粒的DCs(P<0.05)。转染IL-18的DCs刺激T细胞增殖能力、特异性CTL杀伤作用及诱导的NK细胞的杀伤活性明显高于转染空质粒的DCs(P<0.05),且随着S/R或R/T增加,其多种免疫反应逐渐增强。结论:IL-18与DCs抗肿瘤作用具有协同性。; 关键词白血病髓样慢性树突细胞白细胞介素18 抗白血病作用; Keywords leukemia, myelogeous, chronic dendritic cells interleukin-18 antileukemia immune response; 分类号 R733.72 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡贫血病毒VP3基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制: 4; 作者连海金宁一李霄陈立刚管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬; 机构吉林大学农学部畜牧医学院解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室吉林大学农学部; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1063-1066,共4页; 基金 973计划（G1999011902）资助项目; 文摘探索了重组质粒pVVP3对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制.将pVVP3经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测了细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色分析了肿瘤细胞凋亡;采用罗丹明123和DCFA染色测定了线粒体跨膜电位（△Ψm）和活性氧水平变化;通过底物染色反应检测了Caspase-3活性.检测分析结果表明：重组质粒pVVP3转染人肺癌细胞SPC-A1后,细胞活力明显降低; AO/EB染色可见明显的细胞凋亡形态学变化;与空质粒对照相比,线粒体△Ψm下降（P＜0.01）,活性氧水平升高（P＜0.05）,Caspase-3活性增强（P＜0.01）.以上结果提示,重组质粒pVVP3能够通过上调ROS水平,下调线粒体△Ψm,进而激活Caspase-3,最终诱导人肺癌细胞凋亡.; 关键词鸡贫血病毒VP3 人肺癌细胞凋亡; Keywords chicken anemia virus VP3, human lung carcinoma cell, apoptosis; 分类号 Q279 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型抗HIV-1蛋白GRFT的构建、表达及活性研究被引量：4: 5; 作者李昌李霄刘玉生于芳韩佳丽胡博叶明王婧杜寿文金宁一; 机构军事医学科学院解放军基因工程实验室沈阳农业大学畜牧兽医学院延边大学农学院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期95-99,共5页; 基金国家重大传染病专项基金(批准号:2008ZX10004-015) 军内十一五科技攻关项目(批准号:06G127) +1 种基金吉林省高新技术产业发展项目长春市科技特派员行动计划项目资助; 文摘根据已知的新型抗HIV-1蛋白Griffithsin(GRFT)基因氨基酸序列,推测其DNA编码序列,对密码子优化及修饰后进行全基因化学合成,连接到原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,获得目的蛋白.SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明,目的蛋白得到良好表达并具有抗原活性.对表达条件进行了优化,在最佳表达条件下,目的蛋白的表达量可占菌体总蛋白的55.84%.利用Ni2+-NTA柱亲和层析法进行目的蛋白的复性和纯化,凝胶成像系统扫描分析表明,其纯度可达94.06%.运用Dot-ELISA法进行复性蛋白的抗原结合活性检测发现,目的蛋白可与HIV-1膜蛋白抗原特异性结合,初步证明所表达的重组蛋白具有良好的体外结合活性.基于制备的能够表达HIV-1 gp120基因的靶细胞模型,运用IFA法开展目的蛋白的细胞结合活性研究,结果发现,目的蛋白能够与靶细胞发生特异性反应,表明成功制备了具有生物活性的新型抗HIV-1蛋白GRFT,为进一步研制新型抗HIV-1基因工程药物及其靶向治疗制剂奠定了基础.; 关键词 HIV-1 抗病毒蛋白 GRFT 表达生物活性; Keywords HIV-1 Anti-virus protein Griffithsin（GRFT） Expression Biological activity; 分类号 O629.73 [理学—有机化学] Q512 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应被引量：1: 6; 作者朱继红崔满华李霄孙丽丽张钰陈漉刘立明张振民金宁一; 机构吉林大学第一医院妇产科吉林大学第二医院妇产科军事医学科学院解放军基因工程实验室吉林省肿瘤医院头颈外科; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期237-240,共4页; 基金吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(20060566); 文摘目的:探讨Apoptin基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用和作用方式。方法:应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin和载体质粒pVAX1分别体外转染Hela细胞,作为重组质粒pVAX1-Apoptin组和载体质粒pVAX1组,同时设空白细胞对照组。应用Western blotting检测Apoptin基因在Hela细胞中的表达;运用噻唑兰(MTT)分析法检测重组质粒对Hela肿瘤细胞的抑制作用;罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位(ΔΨm)和活性氧水平变化;底物染色反应检测caspase-3活性。结果:pVAX1-Apoptin组转染48h后,Hela细胞的抑制率为69.28%,明显高于对照组(0.74%)和pVAX1组(10.11%)(P<0.01)。与对照组比较,pVAX1-Apoptin组线粒体ΔΨm下降(P<0.01),细胞内活性氧水平升高(P<0.05),caspase-3活性增强(P<0.01)。结论:Apoptin可通过诱导Hela细胞凋亡,进而特异性杀伤Hela肿瘤细胞。; 关键词宫颈肿瘤 Apoptin基因细胞凋亡抑瘤作用; Keywords uterine cervix neoplasms Apoptin gene apoptosis anti-tumor; 分类号 Q255 [生物学—细胞生物学] Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制	连海金宁一李霄陈立刚张静敏管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定	陈漉金宁一李霄刘立明贾鹏刘妍高鹏陆蕴松李明迟宝荣	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	转染IL-18基因慢性粒细胞白血病树突状细胞的抗白血病作用	李杰丁艳华邵明柏王冠军金宁一	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鸡贫血病毒VP3基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制	连海金宁一李霄陈立刚管国芳孙丽丽李雪梅郑洪玲崔英姬	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	新型抗HIV-1蛋白GRFT的构建、表达及活性研究	李昌李霄刘玉生于芳韩佳丽胡博叶明王婧杜寿文金宁一	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应	朱继红崔满华李霄孙丽丽张钰陈漉刘立明张振民金宁一	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料