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BEP2D细胞和R15Hp35T-2细胞中60个肺癌相关基因的表达研究 被引量:1
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作者 范保星 孙敬芬 +1 位作者 张开泰 吴德昌 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第5期321-325,共5页
目的 研究永生化人支气管上皮细胞 (BEP2D)和α粒子辐射诱发BEP2D细胞后形成的恶性转化细胞 (R15Hp35T 2 )中 6 0个肺癌相关基因的表达谱。 方法 首先搜集了 6 0个肺癌相关的基因 ,经扩增和纯化后 ,用CartesianPixSys5 5 0 0cDNAMicro... 目的 研究永生化人支气管上皮细胞 (BEP2D)和α粒子辐射诱发BEP2D细胞后形成的恶性转化细胞 (R15Hp35T 2 )中 6 0个肺癌相关基因的表达谱。 方法 首先搜集了 6 0个肺癌相关的基因 ,经扩增和纯化后 ,用CartesianPixSys5 5 0 0cDNAMicroarray点样仪将 6 0个肺癌相关基因以微阵列形式点布于醛基化的玻璃片上。然后提取BEP2D细胞和R15Hp35T 2细胞的RNA ,经长片段反转录和线性扩增标记成荧光探针后与微阵列中的cDNA进行杂交。结果 与BEP2D细胞相比 ,R15Hp35T 2细胞中上调表达的基因有 2 7个 ,下调表达的基因有 7个。大部分抑癌基因的mRNA丰度在 2种细胞中表达相似 ;而大多数癌基因和生长因子类基因的mRNA丰度在R15Hp35T 2细胞中高表达。结论 在辐射诱发的人支气管上皮恶性转化细胞中 。 展开更多
关键词 CDNA MICROARRAY BEP2D细胞 基因表达谱 肺癌
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基于Smad7基因为靶序列的RNA干涉作用研究
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作者 王菊萍 王莹 +3 位作者 霍艳英 郭蔼光 徐勤枝 张开泰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第12期13-17,共5页
 为了探讨小干涉RNA(siRNA)对靶基因Smad7mRNA表达的阻断作用,采用体外转录方法制备Smad7基因的小干涉RNAs(siRNAs),用脂质体介导瞬时转染BERP35T 2肺癌细胞系,并采用Northernblot杂交检测靶基因mRNA的表达丰度。结果表明,根据Smad7编...  为了探讨小干涉RNA(siRNA)对靶基因Smad7mRNA表达的阻断作用,采用体外转录方法制备Smad7基因的小干涉RNAs(siRNAs),用脂质体介导瞬时转染BERP35T 2肺癌细胞系,并采用Northernblot杂交检测靶基因mRNA的表达丰度。结果表明,根据Smad7编码区序列在体外成功地制备了针对2个不同靶序列的siRNAs;Northernblot杂交显示,在转染siRNA的BERP35T 2细胞中,不管是内源性的还是外源性的,Smad7mRNA的表达丰度均明显下降。说明Smad7基因编码区中542563bp及701722bp2个区域均是siRNA作用的有效靶序列,本研究设计并制备的siRNAs能有效抑制Smad7基因的表达。 展开更多
关键词 小干涉RNA Smad 7基因 体外转录 瞬时转染 靶序列
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联合应用SSH和cDNA Microarray筛选肺癌相关基因 被引量:4
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作者 范保星 张开泰 +3 位作者 笪冀平 谢玲 王升启 吴德昌 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第2期97-101,共5页
目的 利用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)和cDNAMicroarray筛选肺癌组织、肺癌旁组织和其它肿瘤组织中相互差异表达的基因。方法 将利用SSH构建的BEP2D细胞永生化阶段、恶性转化前阶段和恶性转化阶段三个c... 目的 利用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)和cDNAMicroarray筛选肺癌组织、肺癌旁组织和其它肿瘤组织中相互差异表达的基因。方法 将利用SSH构建的BEP2D细胞永生化阶段、恶性转化前阶段和恶性转化阶段三个cDNA文库中的克隆制作在一张芯片上 ,筛选了 15例肺癌组织、5例肺癌旁组织和其他癌组织 2 4例 (肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、白血病、子宫内膜癌、脑神经胶质瘤和结肠癌各 3例 )中mRNA的表达差异。结果 获得肺癌组织高于肺癌旁组织表达的cDNA 2 6个 ,肺癌旁组织高于肺癌组织表达的 31个。二者高于其它 8种癌组织的分别为 :肺癌旁组织中 63个 ,肺癌组织中 87个。结论 联合应用SSH和cDNAMicroarray是筛选和鉴定不同样本中差异表达基因的快速和有效的方法 ;肺癌旁组织和肺癌组织中差异表达的基因 ,以及这二者与其它组织差异表达的基因 ,不仅可能是肺癌发生发展机制中的重要基因 。 展开更多
关键词 SSH 基因 肺癌 肿瘤 治疗 诊断 BEP2D细胞
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