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蓖麻毒素快速ELISA检测法的建立 被引量:5
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作者 郭建巍 沈倍奋 +3 位作者 冯健男 孙瑛勋 胡美茹 于鸣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期536-538,共3页
目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,... 目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,对蓖麻毒素的最低检出浓度为175ng/L,目视检测最低浓度为625ng/L,整个实验不需仪器可在40min内完成检测。结论:蓖麻毒素快速ELISA检测法为蓖麻毒素生物战剂的快速侦检提供了有效手段。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 单克隆抗体 快速ELISA
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用于筛选人IL-6受体拮抗剂生物学活性的M1细胞模型的建立
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作者 康晓平 任蕴芳 +2 位作者 李松 冯建男 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期172-174,共3页
目的  建立用于筛选人IL-6受体拮抗剂的M1细胞模型,并在该细胞模型上筛选具有人IL-6受体拮抗活性的化合物。方法 用反转录PCR,检测M1细胞系上IL-6Rα/gp130 mRNA的表达情况,然后应用MTT比色法... 目的  建立用于筛选人IL-6受体拮抗剂的M1细胞模型,并在该细胞模型上筛选具有人IL-6受体拮抗活性的化合物。方法 用反转录PCR,检测M1细胞系上IL-6Rα/gp130 mRNA的表达情况,然后应用MTT比色法检测在体外液体培养中,M1细胞对rhIL-6的反应性和多种小分子化合物对rhIL-6的拮抗活性。 结果 M1细胞有高丰度的IL-6Rα/gp130 mRNA表达;并对rhIL-6具有较为灵敏的反应性;经对113个化合物的筛选,发现两个化合物能部分地拮抗人IL-6受体的生物学活性。 结论 以M1细胞作为筛选人IL-6受体拮抗剂的细胞模型,筛选出具有一定人IL-6受体拮抗活性的两个化合物。 展开更多
关键词 M1细胞系 MTT比色 人IL-6受体拮抗剂 生物学活性
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人B淋巴细胞刺激因子体外活性分析
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作者 孙剑 林周 +2 位作者 黎燕 冯建男 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期729-730,共2页
目的:分别采用MTT和ATPLiteTM-M发光法分析人B细胞刺激因子对培养的小鼠脾细胞的生物学活性。方法:分离小鼠脾细胞,培养72h后,MTT和ATP方法测定不同密度脾细胞的增殖,从中选定适当的脾细胞密度分析BLyS活性。然后,检测不同剂量的BLyS对... 目的:分别采用MTT和ATPLiteTM-M发光法分析人B细胞刺激因子对培养的小鼠脾细胞的生物学活性。方法:分离小鼠脾细胞,培养72h后,MTT和ATP方法测定不同密度脾细胞的增殖,从中选定适当的脾细胞密度分析BLyS活性。然后,检测不同剂量的BLyS对脾细胞的刺激作用。结果:用MTT和ATPLiteTM-M发光法分析发现:BLyS在1、5、10和20mg/L时,都能明显促进小鼠脾细胞的增殖。结论:MTT法检测BLyS对小鼠脾细胞的增殖作用是一种简单、快捷的方法。利用这种细胞模型,可以对BLyS拮抗剂进行初步筛选以期获得具有潜在应用价值的治疗剂。 展开更多
关键词 B细胞刺激因子 自身免疫性疾病 ATPLiteTM B细胞 MTT
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人心肌肌钙蛋白T亚型的克隆及表达
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作者 陆青 赖春宁 +3 位作者 李志梁 王建安 李五举 沈倍奋 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第3期204-206,共3页
目的 构建人心肌肌钙蛋白T(cTnT)亚型的重组载体。 方法 应用RT-PCR技术,从人胚胎心肌组织中扩增cTnT1及cTnT2基因,连接到T Easy vector载体上,筛选重组子。结果 成功地扩增出cTnT1(764 bp)及cTnT2(124)基因片段,经测序证实,构建... 目的 构建人心肌肌钙蛋白T(cTnT)亚型的重组载体。 方法 应用RT-PCR技术,从人胚胎心肌组织中扩增cTnT1及cTnT2基因,连接到T Easy vector载体上,筛选重组子。结果 成功地扩增出cTnT1(764 bp)及cTnT2(124)基因片段,经测序证实,构建pExSecI-cTnT1表达载体并获得表达。结论 获得单一亚型的cTnT1及cTnT2基因片段,为研究心力衰竭时的胚胎型基因重构与发病关系提供了依据。 展开更多
关键词 人心肌肌钙蛋白T亚型 基因表达 心力衰竭 克隆
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增强树突状细胞抗原呈递功能的新进展 被引量:6
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作者 钟国成 郭宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期253-256,共4页
关键词 树突状细胞 肿瘤 抗原呈递 疫苗
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异基因造血干细胞移植后早期和成熟T细胞亚群的恢复 被引量:3
6
作者 金瓯 黎燕 +2 位作者 孙英勋 于鸣 郭乃揽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期133-135,共3页
对 2 1例异基因造血干细胞移植病人移植后 3个月内外周血T细胞CD3- CD5 +和CD3+CD5 +亚群的百分比进行了测定。CD3- CD5 +细胞作为早期胸腺细胞的标志 ,在移植后 3个月内均低于正常对照 ,CD3+CD5 +细胞作为成熟T细胞的标志 ,在移植后 2 ... 对 2 1例异基因造血干细胞移植病人移植后 3个月内外周血T细胞CD3- CD5 +和CD3+CD5 +亚群的百分比进行了测定。CD3- CD5 +细胞作为早期胸腺细胞的标志 ,在移植后 3个月内均低于正常对照 ,CD3+CD5 +细胞作为成熟T细胞的标志 ,在移植后 2 - 3个月开始恢复 ,说明移植后早期 (3个月内 )T细胞数量的恢复主要依靠成熟T细胞的扩增。CD3+CD5 展开更多
关键词 造血干细胞移植 T细胞亚群 免疫重建
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组成性JNK活化促进B淋巴瘤细胞增殖
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作者 郭媛媛 崔健 +4 位作者 侯春梅 王庆阳 王晶 马远方 张纪岩 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期100-104,共5页
本研究以人B淋巴瘤细胞系Daudi和Raji为研究对象,探讨组成性JNK活化对B淋巴瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测Daudi、Raji B淋巴瘤细胞中组成性JNK的变化;用免疫荧光方法检测Daudi、raji B淋巴瘤细胞中JNK的亚细胞定位;用JNK抑制因... 本研究以人B淋巴瘤细胞系Daudi和Raji为研究对象,探讨组成性JNK活化对B淋巴瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测Daudi、Raji B淋巴瘤细胞中组成性JNK的变化;用免疫荧光方法检测Daudi、raji B淋巴瘤细胞中JNK的亚细胞定位;用JNK抑制因子(SP600125)处理Daudi和raji B淋巴瘤细胞,用流式细胞术检测其细胞周期;用ATPLite法检测SP600125对Daudi、Raji B淋巴瘤细胞生长的影响。结果显示:Daudi和raji B淋巴瘤细胞有组成性JNK活化;Daudi和raji B淋巴瘤细胞JNK亚细胞定位异常,存在不同程度的入核;JNK特异性抑制因子SP600125诱导B淋巴瘤细胞Daudi、Raji G2/M期细胞比例升高,并具有时间依赖性,且G0/G1峰前出现亚二倍体峰,证实SP600125在B淋巴瘤细胞中诱导G2/M阻滞和凋亡。ATPLite检测结果显示,SP600125显著抑制Daudi和Raji B淋巴瘤细胞的生长,并随着抑制因子浓度的升高,抑制作用更加明显,呈现剂量依赖性。结论:组成性JNK活化促进Daudi和Raji B淋巴瘤细胞增殖。JNK活性的升高通过促进JNK从胞浆进入胞核来促进B淋巴瘤细胞的增殖。SP600125通过多种机制阻抑JNK的活性抑制B淋巴瘤细胞的恶性生长。JNK可作为临床治疗B淋巴瘤的潜在靶点。 展开更多
关键词 JNK B淋巴瘤细胞 DAUDI细胞 RAJI细胞 亚细胞定位
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