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人IL-18结合蛋白A在CHO细胞中表达的研究 被引量:3
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作者 黄丰 万永玲 +3 位作者 吴达龙 吴德政 袁志宏 李克勤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期211-213,共3页
目的 克隆人IL 18结合蛋白A (hIL 18BPa)的cDNA ,构建真核表达载体及其在CHO细胞中的表达。方法采用RT PCR ,自人白血病血细胞株Jurkat中获得hIL 18BPa的cDNA。将其克隆至T vector中 ,经测序确证后 ,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA... 目的 克隆人IL 18结合蛋白A (hIL 18BPa)的cDNA ,构建真核表达载体及其在CHO细胞中的表达。方法采用RT PCR ,自人白血病血细胞株Jurkat中获得hIL 18BPa的cDNA。将其克隆至T vector中 ,经测序确证后 ,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3 1中。以脂质体介导法 ,将其转染CHO细胞 ,用G4 18筛选抗性克隆 ,ELISA法测定其生物学活性。结果 获得的IL 18BPa的cDNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。将hIL 18BPa插入载体pcDNA3.1后 ,成功地构建稳定表达的载体。转染CHO细胞后 ,获得可稳定表达hIL 18BPa的基因工程细胞株。经纯化后 ,证明具有良好的生物学活性。结论 成功地克隆hIL 18BPa基因 ,并实现了在CHO细胞中的稳定表达 。 展开更多
关键词 人IL-18结合蛋白A 基因表达 CHO细胞
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