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PCR在大肠杆菌ST1b基因扩增及其基因检测上的应用被引量：5: 1; 作者冯书章刘晓明 +1 位作者黄培堂李丰生《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第2期19-20,共2页; 作者应用聚合酶链反应(PCR)成功地扩增了产肠毒性大肠杆菌ST1b基因,在ST1b产量、活性和纯度上均满足了基因重组的要求。并利用PCR技术建立了一种新型基因探针标记方法(基因扩增标记法),所制备的ST1b基因探针经相关菌菌落杂交试验证实具... 展开更多; 关键词聚合酶链反应 ST1b基因大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

K_99和ST_1双价保护性抗原基因重组菌株的表达及其免疫原性研究被引量：5: 2; 作者冯书章许崇波 +6 位作者刘子黄培堂刘晓明孟锐奇姚湘燕李丰生王玉炯《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第3期5-9,共5页; 大肠杆菌耐热性肠毒素(ST_1)是引起幼畜腹泻的重要毒力因子之一,其结构基因编码19个氨基酸,无免疫原性。作者以pSLM_(004)工程菌株为始发菌株,亚克隆ST_1基因,并将ST_1基因分别重组到能有效表达K_(99)菌毛抗原的pGK_(99)之K_(99)基因(pS... 展开更多; 关键词 K99 ST1 抗原基因重组菌株免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型的建立被引量：3: 3; 作者宫庭钰关铮 +4 位作者张卓梅刘爱军孙强杨晓李亚里《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第2期148-149,159,I0002,共4页; 目的建立雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型,为进一步研究雌激素受体β基因在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用提供平台。方法用外科手术方法对16只β基因敲除小鼠进行自体子宫移植,术后14d、21d取病灶组织进行光镜观察分... 展开更多; 关键词子宫内膜异位症 β基因敲除小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

采用Red重组系统构建包装菌株DH-gIII 被引量：1: 4; 作者高荣凯王芃王琰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期39-42,共4页; 选择感染性噬菌体技术是研究蛋白相互作用的良好手段,获得基因III缺陷的辅助噬菌体是构成SIP体系的关键。为制备基因III缺失的辅助噬菌体,利用λRed重组系统将完整的噬菌体基因III和氯霉素抗性基因整合到大肠埃希菌DH5α的染色体上组氨... 展开更多; 关键词包装菌株 RED重组系统辅助噬菌体; 在线阅读下载PDF 职称材料

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)新型突变体克隆载体的构建: 5; 作者周红王国力 +1 位作者黄培堂黄翠芬《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期395-398,共4页; 目的构建含有K10Q、R30I、S165W及K10Q/R30I/S165W4种t PA突变体。方法采用PCR重叠延伸法进行突变体的构建。结果成功地构建了上述4种t PA突变体克隆质粒 ,测序结果表明构建完全正确。结论PCR重叠延伸法为构建突变体的可靠快捷的方法。; 关键词 T-PA 突变体克隆载体质粒 PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PCR在大肠杆菌ST1b基因扩增及其基因检测上的应用被引量：5: 1; 作者冯书章刘晓明黄培堂李丰生; 机构长春兽医大学研究所军事医学科学院八所; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第2期19-20,共2页; 文摘作者应用聚合酶链反应(PCR)成功地扩增了产肠毒性大肠杆菌ST1b基因,在ST1b产量、活性和纯度上均满足了基因重组的要求。并利用PCR技术建立了一种新型基因探针标记方法(基因扩增标记法),所制备的ST1b基因探针经相关菌菌落杂交试验证实具有良好的特异性和敏感性。通过对180株婴幼儿腹泻大肠杆菌分离株、52株仔猪腹泻大肠杆菌分离株和28株大肠杆菌标准菌株的基因诊断以及96株K99—ST1b基因重组转化菌的基因检测,菌落杂交阳性率分别为11/180、2/52、2/28和5/96。; 关键词聚合酶链反应 ST1b基因大肠杆菌; Keywords Polymerase chain reaction , STlb gene, Amplification.; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名K_99和ST_1双价保护性抗原基因重组菌株的表达及其免疫原性研究被引量：5: 2; 作者冯书章许崇波刘子黄培堂刘晓明孟锐奇姚湘燕李丰生王玉炯; 机构解放军农牧大学家畜传染病及预防兽医学国家重点学科军事医学科学院八所宁夏农学院; 出处《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第3期5-9,共5页; 基金 "八.五"科学基金; 文摘大肠杆菌耐热性肠毒素(ST_1)是引起幼畜腹泻的重要毒力因子之一,其结构基因编码19个氨基酸,无免疫原性。作者以pSLM_(004)工程菌株为始发菌株,亚克隆ST_1基因,并将ST_1基因分别重组到能有效表达K_(99)菌毛抗原的pGK_(99)之K_(99)基因(pSK_(219))和pUC_(18)多克隆位点中(pXST系列)。从而成功构建了能表达ST_1-K_(99)两种抗原的工程菌苗候选株pSK_(219)以及能表达ST_1抗原的工程菌株pXST。利用这两种基因重组株的表达产物制备了免疫原。经BALB/c鼠免疫效果研究证实,所构建的pS_(219)菌苗候选株安全无毒,且pSK_(219)中K_(99)基因赋于ST_1基因免疫原性。pSK_(219)免疫接种鼠血清及其初乳均可中和ST_1毒性(1个鼠单位),具有较好的免疫保护作用。pSK_(219)工程菌株作为菌苗候选株,为幼畜大肠杆菌性腹泻多价工程菌苗的研制奠定了基础。; 关键词 K99 ST1 抗原基因重组菌株免疫原性; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型的建立被引量：3: 3; 作者宫庭钰关铮张卓梅刘爱军孙强杨晓李亚里; 机构解放军总医院妇产科武警总医院妇产科解放军总医院病理科军事医学科学院八所生物工程研究所; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第2期148-149,159,I0002,共4页; 文摘目的建立雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型,为进一步研究雌激素受体β基因在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用提供平台。方法用外科手术方法对16只β基因敲除小鼠进行自体子宫移植,术后14d、21d取病灶组织进行光镜观察分析。结果建模成功率达95.8%,可形成明显囊肿,内含囊液,囊肿内壁有子宫内膜上皮细胞生长。结论应用本方法可建立稳定的子宫内膜异位症转基因小鼠模型,便于研究雌激素受体β亚型及其相关基因、蛋白在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用机制。; 关键词子宫内膜异位症 β基因敲除小鼠; Keywords Endometriosis ER-β ER-β knockout,mice; 分类号 R711.71 [医药卫生—妇产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名采用Red重组系统构建包装菌株DH-gIII 被引量：1: 4; 作者高荣凯王芃王琰; 机构海军总医院中心实验科军事医学科学院八所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期39-42,共4页; 基金国家自然科学基金项目(30200156); 文摘选择感染性噬菌体技术是研究蛋白相互作用的良好手段,获得基因III缺陷的辅助噬菌体是构成SIP体系的关键。为制备基因III缺失的辅助噬菌体,利用λRed重组系统将完整的噬菌体基因III和氯霉素抗性基因整合到大肠埃希菌DH5α的染色体上组氨酸操纵元位点构建包装菌株,经氯霉素抗性筛选并用PCR及组氨酸表型鉴定,获得包装菌株DH-gIII;将缺失功能基因III的缺陷型噬菌体基因组转化到包装菌株中培养制备辅助噬菌体,以集落形成试验来检测缺陷型噬菌体的感染能力,结果滴度可达到4.3×108,只具备一次感染力,表明包装菌株构建成功,能用来制备辅助噬菌体,有望用于SIP体系。; 关键词包装菌株 RED重组系统辅助噬菌体; Keywords packing strain Red recombination system helper phage; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)新型突变体克隆载体的构建: 5; 作者周红王国力黄培堂黄翠芬; 机构第三军医大学附属西南医院烧伤研究所北京军事医学科学院八所三室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期395-398,共4页; 基金总后"九五"重点课题; 文摘目的构建含有K10Q、R30I、S165W及K10Q/R30I/S165W4种t PA突变体。方法采用PCR重叠延伸法进行突变体的构建。结果成功地构建了上述4种t PA突变体克隆质粒 ,测序结果表明构建完全正确。结论PCR重叠延伸法为构建突变体的可靠快捷的方法。; 关键词 T-PA 突变体克隆载体质粒 PCR; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PCR在大肠杆菌ST1b基因扩增及其基因检测上的应用	冯书章刘晓明黄培堂李丰生	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	1993	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	K_99和ST_1双价保护性抗原基因重组菌株的表达及其免疫原性研究	冯书章许崇波刘子黄培堂刘晓明孟锐奇姚湘燕李丰生王玉炯	《中国畜禽传染病》 CSCD	1996	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型的建立	宫庭钰关铮张卓梅刘爱军孙强杨晓李亚里	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	采用Red重组系统构建包装菌株DH-gIII	高荣凯王芃王琰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)新型突变体克隆载体的构建	周红王国力黄培堂黄翠芬	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料