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HIV-1Gag-gp120嵌合基因在重组杆状病毒系统中的嵌合表达: 1; 作者张东威金宁一《中国实用医药》 2009年第35期29-30,共2页; 将中国株HIV-1B亚型gag基因序列克隆到杆状病毒表达载体pFASTBAC1中,将gp120基因以相同的读框克隆到gag基因的3/端下游,构建了重组表达质粒pFge,利用大肠杆菌埃希菌杆状病毒表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞sf9中表达了HIV-1的Gag-g... 展开更多; 关键词 HIV-1嵌合蛋白表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析被引量：6: 2; 作者李霄金宁一 +6 位作者李昌田明尧陈漉贾鹏刘立明刘妍高鹏《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期682-686,共5页; 结合生物信息学方法与已知癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)特异性单链抗体(Single chainFv fragment,scFv)核苷酸序列,经分子设计和密码子优化后,通过化学方法合成CEA二硫键稳定性单链抗体(Disulfide stabilized single chain F... 展开更多; 关键词癌胚抗原二硫键稳定性单链抗体凋亡素基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组HEV衣壳蛋白截短体的表达及鉴定被引量：2: 3; 作者李霄屈勇刚 +5 位作者贾鹏刘立明季慧范赫东芸金宁一迟宝荣《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2481-2485,共5页; 戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的肠道病毒性传染病.HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成,属戊型肝炎病毒科.HEV衣壳蛋白由ORF2编码.本研究根据编码HEV ORF2 aa382～aa674的核苷酸序列克隆... 展开更多; 关键词戊型肝炎病毒衣壳蛋白病毒样颗粒原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

新城疫病毒对Hep-2肿瘤细胞的抑制效应被引量：1: 4; 作者管国芳金春顺 +5 位作者金宁一米志强李霄连海孙丽丽文连姬《中国耳鼻咽喉头颈外科》北大核心 2005年第8期487-490,共4页; 目的探讨新城疫病毒(newcastlediseasevirus,NDV)对Hep-2肿瘤细胞的杀伤效应及其免疫刺激作用。方法采用考马斯亮兰染色法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞细胞骨架的影响。运用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)染色法检测ND... 展开更多; 关键词新城疫病毒喉肿瘤细胞免疫法肿瘤细胞死亡 HEP-2 特异性细胞毒性T淋巴细胞抑制效应人外周血淋巴细胞 MHC-1类分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

反转录病毒介导的稳定表达HIV-1 Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立被引量：4: 5; 作者王婧李昌 +6 位作者李林溪胡博丛艳昭任大勇王卓越杜寿文金宁一《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期203-209,共7页; 本研究旨在建立中国流行株人免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白(Gag)哺乳动物稳定表达细胞系。将HIV-1核心蛋白基因gag和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP依次串联插入反转录病毒载体pFB-neo,构建重组反转录病毒载体pFB-gag-EGFP,并与含有辅助病毒... 展开更多; 关键词反转录病毒载体人免疫缺陷病毒核心蛋白增强型绿色荧光蛋白小鼠骨髓瘤细胞SP2/0; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟荧光抗体的制备及应用评价被引量：1: 6; 作者陈义锋赵亚荣 +2 位作者赵建增金扩世金宁一《中国兽药杂志》 2008年第12期16-19,共4页; 制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应... 展开更多; 关键词猪瘟荧光抗体制备应用评价; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1Gag-gp120嵌合基因在重组杆状病毒系统中的嵌合表达: 1; 作者张东威金宁一; 机构内蒙古民族大学附属医院解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室; 出处《中国实用医药》 2009年第35期29-30,共2页; 文摘将中国株HIV-1B亚型gag基因序列克隆到杆状病毒表达载体pFASTBAC1中,将gp120基因以相同的读框克隆到gag基因的3/端下游,构建了重组表达质粒pFge,利用大肠杆菌埃希菌杆状病毒表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞sf9中表达了HIV-1的Gag-gp120嵌合蛋白。; 关键词 HIV-1嵌合蛋白表达; Keywords HIV-1 Chimric protein Expression; 分类号 R378 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析被引量：6: 2; 作者李霄金宁一李昌田明尧陈漉贾鹏刘立明刘妍高鹏; 机构吉林大学畜牧兽医学院吉林大学军事医学科学院吉林大学第一临床医院吉林农业大学; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期682-686,共5页; 基金国家“八六三”计划(批准号:2007AA021004) 吉林省科技发展计划(批准号:20060566) 重大新药创制科技重大专项(批准号:2008ZXJ09003-014)资助; 文摘结合生物信息学方法与已知癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)特异性单链抗体(Single chainFv fragment,scFv)核苷酸序列,经分子设计和密码子优化后,通过化学方法合成CEA二硫键稳定性单链抗体(Disulfide stabilized single chain Fv fragments,scdsFv)基因片段.将凋亡素基因(Apoptin)通过一段柔性连接肽(Linker)连接在CEA scdsFv基因下游,并克隆入大肠杆菌表达载体质粒pET28a,转化BL21感受态菌后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导,表达融合蛋白CAtin.SDS-PAGE和Western-Blot分析表明,目的蛋白得到良好表达,经条件优化后表达量最高可达44.1 mg/L.融合蛋白经分步洗涤法和谷胱甘肽对表达的目的蛋白进行初步纯化和复性后,利用人肝癌细胞(HCC)对所制备融合蛋白进行亲和力测定、细胞结合活性测定和特异性细胞杀伤活性分析.结果显示,所制备融合蛋白不仅能够有效地与上述肿瘤细胞结合,并对其具有明显的杀伤活性,表明成功制备了具有特异性识别和特异性杀伤活性的双特异抗肿瘤免疫导向制剂.; 关键词癌胚抗原二硫键稳定性单链抗体凋亡素基因原核表达; Keywords Carcinoembryonic antigen （ CEA ） Disulfide stabilized single chain Fv fragments （ scdsFv ） Apoptin Prokaryotic expression; 分类号 O629.73 [理学—有机化学] Q511 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组HEV衣壳蛋白截短体的表达及鉴定被引量：2: 3; 作者李霄屈勇刚贾鹏刘立明季慧范赫东芸金宁一迟宝荣; 机构吉林大学第一临床医院军事医学科学院全军基因工程实验室石河子大学动物科技学院深圳出入境检验检疫局吉林农业科技学院动物医学学院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2481-2485,共5页; 基金国家自然科学基金项目(批准号:81072210 81101140) +1 种基金中国博士后科学基金(批准号:20100481057)资助; 文摘戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的肠道病毒性传染病.HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成,属戊型肝炎病毒科.HEV衣壳蛋白由ORF2编码.本研究根据编码HEV ORF2 aa382～aa674的核苷酸序列克隆了p293基因,并将其克隆入原核表达载体pET28a,利用大肠杆菌BL21(DE3)对HEV衣壳蛋白截短体(p293)进行了表达.SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,在优化的表达条件下(1 mmol/L IPTG,250 r/min,37℃,5 h),重组蛋白p293能够在大肠杆菌内有效表达,目的蛋白约占总蛋白的66.15%.TEM检测结果显示,原核表达的p293能够在体外形成约30～40 nm的病毒样颗粒.免疫印迹和免疫荧光检测结果表明,p293与HEV标准阳性血清具有良好的反应原性和反应特异性.实验结果表明,p293可应用于HEV宿主吸附和病毒装配研究,为HEV的预防与诊断研究奠定了基础.; 关键词戊型肝炎病毒衣壳蛋白病毒样颗粒原核表达; Keywords Hepatitis E virus（HEV） Capsid Protein Viral-like particle（VLP） Prokaryotic expression; 分类号 O629 [理学—有机化学] Q51 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新城疫病毒对Hep-2肿瘤细胞的抑制效应被引量：1: 4; 作者管国芳金春顺金宁一米志强李霄连海孙丽丽文连姬; 机构吉林大学白求恩医学部第二临床医院耳鼻咽喉科军事医学科学院全军基因工程重点实验室; 出处《中国耳鼻咽喉头颈外科》北大核心 2005年第8期487-490,共4页; 基金 "973"规划(G199011902) 自然科学基金重大项目资助(39893290-4-3); 文摘目的探讨新城疫病毒(newcastlediseasevirus,NDV)对Hep-2肿瘤细胞的杀伤效应及其免疫刺激作用。方法采用考马斯亮兰染色法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞细胞骨架的影响。运用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)染色法检测NDV感染致Hep-2肿瘤细胞死亡的杀伤率。通过免疫荧光结合流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测Hep-2肿瘤细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(majorhistocompabilitycomplexclassImolecules,MHC-I)的表达情况。另外,分离人外周血淋巴细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)作为效应细胞,以NDV感染的Hep-2肿瘤细胞作为靶细胞,同时设空白细胞对照,通过特异性细胞毒T淋巴细胞实验,探讨NDV所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的细胞骨架发生改变,对体外培养Hep-2肿瘤细胞的杀伤率达77.7%,可上调其表面MHC-I类分子的表达,并且能够刺激增强人外周血淋巴细胞中肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)活性,杀伤率为23.54%。结论NDV可有效杀伤Hep-2肿瘤细胞,并刺激产生特异性抗肿瘤免疫反应。; 关键词新城疫病毒喉肿瘤细胞免疫法肿瘤细胞死亡 HEP-2 特异性细胞毒性T淋巴细胞抑制效应人外周血淋巴细胞 MHC-1类分子; Keywords Newcastle disease virus Laryngeal Neoplasms Cell Immunization; 分类号 R73-36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反转录病毒介导的稳定表达HIV-1 Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立被引量：4: 5; 作者王婧李昌李林溪胡博丛艳昭任大勇王卓越杜寿文金宁一; 机构吉林大学畜牧兽医学院军事医学科学院全军基因工程重点实验室延边大学农学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期203-209,共7页; 基金重大传染病专项(2008ZX10004-015) 军内十一五科技攻关项目(06G127) +1 种基金长春市科技特派员行动计划(09KT04); 文摘本研究旨在建立中国流行株人免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白(Gag)哺乳动物稳定表达细胞系。将HIV-1核心蛋白基因gag和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP依次串联插入反转录病毒载体pFB-neo,构建重组反转录病毒载体pFB-gag-EGFP,并与含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装出的反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白EGFP表达,验证HIV-1核心蛋白Gag表达,G418抗性筛选阳性细胞。结果表明,HIV-1核心蛋白Gag和增强型绿色荧光蛋白可在SP2/0细胞中稳定表达,HIV-1核心蛋白gag基因稳定表达细胞系成功建立,为抗AIDS治疗用基因工程制剂及靶向药物的活性检测提供了理想方法。; 关键词反转录病毒载体人免疫缺陷病毒核心蛋白增强型绿色荧光蛋白小鼠骨髓瘤细胞SP2/0; Keywords retroviral vector HIV-1 core protein enhanced green fluorescent protein SP2/0 cells; 分类号 R512.91 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟荧光抗体的制备及应用评价被引量：1: 6; 作者陈义锋赵亚荣赵建增金扩世金宁一; 机构福州大北农动物医学研究中心军事医学科学院全军基因工程重点实验室; 出处《中国兽药杂志》 2008年第12期16-19,共4页; 文摘制备猪瘟荧光抗体并用于猪只活体扁桃体组织抹/涂片检测。将制备的猪瘟高免血清采用硫酸铵分级沉淀法纯化免疫球蛋白,反向透析法标记荧光素,过葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-50)去除游离荧光素,通过扁桃体组织匀浆吸附去除异嗜性或交叉反应抗体。以5%FCS做稀释液,以RT-PCR检测阳性样本的冰冻切片确定其最大稀释度为1/60,最佳工作浓度为1/30,阻抑试验证明荧光为特异荧光。用标记的荧光抗体检测活体扁桃体样本39份,检出阳性11份,与IDEXX猪瘟抗原检测试剂盒复核结果完全吻合。结果表明,本实验所制备的猪瘟荧光抗体具有很高的灵敏性和特异性,可用于猪瘟净化中扁桃体组织抹/涂片检测。; 关键词猪瘟荧光抗体制备应用评价; Keywords classical swine fever fluorescent antibody preparation applied evaluation; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HIV-1Gag-gp120嵌合基因在重组杆状病毒系统中的嵌合表达	张东威金宁一	《中国实用医药》	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析	李霄金宁一李昌田明尧陈漉贾鹏刘立明刘妍高鹏	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2009	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组HEV衣壳蛋白截短体的表达及鉴定	李霄屈勇刚贾鹏刘立明季慧范赫东芸金宁一迟宝荣	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	新城疫病毒对Hep-2肿瘤细胞的抑制效应	管国芳金春顺金宁一米志强李霄连海孙丽丽文连姬	《中国耳鼻咽喉头颈外科》北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	反转录病毒介导的稳定表达HIV-1 Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立	王婧李昌李林溪胡博丛艳昭任大勇王卓越杜寿文金宁一	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪瘟荧光抗体的制备及应用评价	陈义锋赵亚荣赵建增金扩世金宁一	《中国兽药杂志》	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料