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白杨素协同维奈托克杀伤AML细胞的作用及其机制研究
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作者 王艳 朱沛雄 +4 位作者 杨彭月 吴秀丽 李扬秋 余锡宝 徐玲 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1300-1307,共8页
目的:探讨白杨素协同维奈托克诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:体外培养AML细胞系MV411和MOLM13,单独使用白杨素或联合维奈托克处理,CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞的细胞... 目的:探讨白杨素协同维奈托克诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:体外培养AML细胞系MV411和MOLM13,单独使用白杨素或联合维奈托克处理,CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞的细胞周期和凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白及蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白的表达变化。结果:CCK8法检测结果及流式细胞术检测显示,16和32μmol/L白杨素可显著抑制AML细胞活力,G1期细胞比例和凋亡比例显著增加。与白杨素或维奈托克单用组相比,联合用药组细胞的增殖能力显著降低,凋亡率显著增加。Western blot检测结果显示,随着白杨素浓度的增加,DNA修复酶多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]裂解体水平升高,Akt/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平下调。与白杨素及维奈托克单用组相比,联合用药可显著上调PARP裂解体,下调Akt/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结论:白杨素可通过细胞周期阻滞及抑制Akt/NF-κB信号增强维奈托克对AML细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 白杨素 维奈托克 细胞凋亡 Akt/NF-κB信号通路
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NETs通过调控细胞骨架和黏着斑形成抑制子痫前期胎盘中滋养细胞的迁移
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作者 叶迅伽 庸安露 +5 位作者 庾洁盈 鲁馨瑶 李瑞满 杨雪松 宛硕 王广 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1134-1144,共11页
目的:探讨胎盘中中性粒细胞细胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在子痫前期(preeclampsia,PE)发生中可能的作用机制。方法:通过胎盘转录组测序数据分析中性粒细胞在PE和正常孕妇胎盘中的浸润差异,通过胎盘单细胞测序数据... 目的:探讨胎盘中中性粒细胞细胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在子痫前期(preeclampsia,PE)发生中可能的作用机制。方法:通过胎盘转录组测序数据分析中性粒细胞在PE和正常孕妇胎盘中的浸润差异,通过胎盘单细胞测序数据(GSE173193)分析PE胎盘中NETs形成相关基因的表达。免疫荧光染色和ELISA检测NETs在胎盘组织中的水平,以及通过体外诱导NETs产生,用NETs对人绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblast,EVT)株HTR8/Svneo进行处理,结合RNA测序技术,揭示NETs调控滋养细胞功能的潜在信号通路。结果:PE胎盘中中性粒细胞浸润及NETs形成相关基因MPO(myeloperoxidase)和ELANE(elastase,neutrophil expressed)表达相较于对照组胎盘显著增加;对临床胎盘样本进行检测验证,结果显示PE胎盘中NETs水平相较于正常组胎盘增加;NETs显著抑制HTR8/Svneo细胞的迁移;在NETs处理24 h后的HTR8/Svneo细胞中观察到F-actin排列紊乱,聚集体形成以及桩蛋白(paxillin)表达减少。胎盘单细胞测序分析结果显示应力纤维和黏着斑通路在PE胎盘的EVT中下调。结论:中性粒细胞浸润和NETs形成相关基因表达在PE胎盘中增加。NETs可能通过诱导EVT应力纤维解体及下调paxillin表达,进而破坏细胞骨架和黏着斑形成来抑制EVT迁移。 展开更多
关键词 子痫前期 中性粒细胞细胞外诱捕网 滋养细胞 细胞迁移 应力纤维 黏着斑
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局部组织肾素-血管紧张素系统在皮肤损伤修复和再生中的作用 被引量:10
3
作者 刘宏伟 程飚 付小兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期191-195,共5页
随着对皮肤生物学功能认识的深入,人们发现皮肤是一个内分泌器官和激素、神经递质敏感性器官。皮肤的神经-内分泌系统包括局部产生神经-内分泌介导子(neuro-endocrine mediators),与相应的特异性受体通过旁分泌和自分泌产生作用。
关键词 肾素-血管紧张素系统 创伤愈合 激素
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自体脂肪移植治疗瘢痕的研究进展
4
作者 安希凤 廖选 刘宏伟 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第9期1425-1432,共8页
瘢痕是整形外科研究的重点问题,现有瘢痕治疗方法的临床效果存在一定的局限性。自体脂肪移植是经临床证实可有效治疗病理性瘢痕的新方法。自体脂肪移植物中含有脂肪间充质干细胞和多种活性因子,通过免疫调控炎症反应、促血管生成、促细... 瘢痕是整形外科研究的重点问题,现有瘢痕治疗方法的临床效果存在一定的局限性。自体脂肪移植是经临床证实可有效治疗病理性瘢痕的新方法。自体脂肪移植物中含有脂肪间充质干细胞和多种活性因子,通过免疫调控炎症反应、促血管生成、促细胞分化、重塑细胞外基质、抗氧化应激损伤等机制治疗病理性瘢痕,可有效改善瘢痕外观、质地和局部症状,具有并发症少、治疗效果好等优点,是治疗瘢痕的崭新领域,为瘢痕提供了新的治疗方向。现就自体脂肪移植在瘢痕中的应用及机制作一综述,旨为瘢痕的治疗提供理论基础,归纳其在瘢痕治疗中的应用进展。 展开更多
关键词 瘢痕 自体脂肪移植 脂肪来源干细胞 再生医学
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关节屏障失衡在关节疾病中作用的研究进展
5
作者 彭睿 查兴胜 +1 位作者 彭亚臣 张还添 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1442-1448,共7页
传统上,关节疾病常被归因于软骨退变和炎症,却忽视了关节屏障的关键作用。本综述引入了“关节屏障”这一创新概念,将其作为关节稳态中至关重要的解剖与功能单元。本文从分子代谢和表观遗传机制出发,系统讨论了关节屏障失衡的发病机制及... 传统上,关节疾病常被归因于软骨退变和炎症,却忽视了关节屏障的关键作用。本综述引入了“关节屏障”这一创新概念,将其作为关节稳态中至关重要的解剖与功能单元。本文从分子代谢和表观遗传机制出发,系统讨论了关节屏障失衡的发病机制及最新研究进展。同时,我们基于代谢、免疫、生物制剂及细胞疗法等层面,总结并展望了现有的临床治疗策略。通过整合最新研究成果并提出未来研究方向,本综述为全面理解关节屏障功能障碍及其在关节疾病中的意义提供了框架,为关节疾病的潜在治疗方向和思路开辟了道路。 展开更多
关键词 关节屏障 骨关节炎 类风湿关节炎 痛风性关节炎 免疫稳态
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肾纤维囊为载体培养角膜内皮细胞的实验研究 被引量:1
6
作者 唐光霞 陈建苏 徐锦堂 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第4期304-307,共4页
目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜内皮细胞并研究角膜内皮细胞特性。方法将培养扩增的角膜内皮细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫荧光、HE染色和扫描电镜的方法进行检测,观察角膜内皮细胞... 目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜内皮细胞并研究角膜内皮细胞特性。方法将培养扩增的角膜内皮细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫荧光、HE染色和扫描电镜的方法进行检测,观察角膜内皮细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果角膜内皮细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态为多角形或六边形,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的角膜内皮细胞贴壁生长和增殖情况稍差。结论角膜内皮细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜内皮细胞的体外培养提供了简单和高效的方法。 展开更多
关键词 肾纤维囊 角膜内皮细胞 细胞培养
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低能量激光照射对脂肪源性干细胞临床治疗潜能影响的实验研究
7
作者 廖选 李升红 +4 位作者 陈苑雯 谢光辉 肖丽玲 谢波 刘宏伟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期703-708,共6页
目的观察镓铝砷(Ga Al A s)激光对脂肪源性干细胞(ADSCs)增殖、细胞因子分泌及成脂分化能力的影响,探讨临床治疗过程中提高ADSCs治疗效果的有效方法。方法取来自腹部脂肪抽吸术女性患者的脂肪组织,分离ADSCs,建立人脂肪源性干细胞(h ADS... 目的观察镓铝砷(Ga Al A s)激光对脂肪源性干细胞(ADSCs)增殖、细胞因子分泌及成脂分化能力的影响,探讨临床治疗过程中提高ADSCs治疗效果的有效方法。方法取来自腹部脂肪抽吸术女性患者的脂肪组织,分离ADSCs,建立人脂肪源性干细胞(h ADSCs)培养体系;用650nm波长Ga Al As激光以不同能量(2、4、8J/cm2)对h ADSCs进行照射。采用MTT法检测h ADSCs的增殖能力,ELISA法检测h ADSCs的分泌功能,实时定量PCR法检测细胞表型的变化,油红O染色检测激光照射对h ADSCs成脂分化能力的影响。结果 MTT法检测结果显示:照射后第4、6天时2J/cm2照射组吸光度值与对照组无明显差异(P>0.05),4、8J/cm2照射组吸光度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其中4J/cm2照射组吸光度差异最为明显。ELISA法检测结果显示:4J/cm2照射组上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β(TGF-β)的蛋白含量分别为287.5±15.2pg/ml、36.0±0.7ng/ml、292.6±10.5pg/ml,明显高于对照组(分别为145.3±21.6pg/ml、26.7±0.6ng/ml、130.6±6.0pg/ml),差异有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR检测结果显示:经4J/cm2 Ga Al As激光照射后h ADSCs中细胞表面标记物CD13、CD29、CD44、CD90 m RNA的相对表达量分别为对照组的1.19、22.05、4.38、7.22倍,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。油红O染色显示,经Ga Al As激光照射后h ADSCs的成脂分化能力明显高于对照组。结论低能量激光照射可增强ADSCs的增殖、分泌及成脂分化能力,可能有助于提高其临床治疗效果,是一种简便、安全、有效的方法。 展开更多
关键词 激光 半导体 脂肪源性干细胞 临床转化
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长链非编码RNA LINC00987通过细胞色素P450途径促进AML细胞凋亡的机制研究
8
作者 杨彭月 刘暄 +3 位作者 王艳 徐玲 李扬秋 余锡宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期265-273,共9页
目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987)... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987),通过Annexin V/PI检测LINC00987低表达对阿糖胞苷诱导AML细胞凋亡的影响。对LINC00987共表达基因进行信号通路富集,分析LINC00987的表达对细胞色素家族基因的影响。结果:与健康对照组相比,lncRNA LINC00987在AML细胞系和AML病人标本中均显著降低,而在抗AML治疗后缓解组中高表达;此外,低表达LINC00987与AML患者预后不良有关。抗肿瘤药物阿糖胞苷、阿霉素、三氧化二砷和维奈托克可显著诱导AML细胞系Molm13和MV411的LINC00987表达。下调LINC00987的表达可抑制阿糖胞苷诱导的Molm13细胞凋亡。进一步研究发现,LINC00987共表达基因可富集于细胞色素P450(cytochrome,P450,CYP450)介导的氧化应激通路/网络,且LINC00987的表达与CYP450家族基因CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的表达水平呈正相关。下调LINC00987的表达则可抑制阿糖胞苷诱导的CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的mRNA表达。结论:LINC00987可以作为AML的预后标志物,其可能通过CYP450介导的氧化应激途径促进阿糖胞苷诱导的AML细胞凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 LINC00987 细胞色素P450 阿糖胞苷 细胞凋亡
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非小细胞肺癌肿瘤白细胞介素的表达模式对免疫治疗疗效和预后的作用
9
作者 钟思敏 张东东 +3 位作者 郭舒月 张逸铠 刘思阳 金真伊 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期557-566,共10页
【目的】为了明确对免疫检查点阻断(ICB)治疗应答反应较差的非小细胞肺癌(NSCLC)患者与肿瘤组织白细胞介素(ILs)表达水平之间的潜在关联,探讨其在NSCLC患者肿瘤中的表达差异及其对患者ICB疗效和预后的影响。【方法】从既往研究数据中回... 【目的】为了明确对免疫检查点阻断(ICB)治疗应答反应较差的非小细胞肺癌(NSCLC)患者与肿瘤组织白细胞介素(ILs)表达水平之间的潜在关联,探讨其在NSCLC患者肿瘤中的表达差异及其对患者ICB疗效和预后的影响。【方法】从既往研究数据中回顾性收集确诊为NSCLC且经过ICB治疗的61例患者,取得其ICB治疗前的肿瘤组织转录组测序及生存相关的数据,通过生物信息学方法,筛选出显著影响患者ICB治疗疗效与预后的ILs,以无进展生存期(PFS)评价疗效和总生存期(OS)评价患者的预后,使用Kaplan-Meier生存曲线和ROC曲线分析ILs对NSCLC患者ICB疗效和预后的预测作用及效能。【结果】通过单因素Cox回归分析,筛选出9个与NSCLC患者OS相关的ILs(P<0.1),经过多因素Cox回归分析进一步筛选得到与NSCLC患者不良预后显著相关的ILs,结果提示IL-11、IL-17D和IL-36A高表达与NSCLC患者ICB治疗的不良预后相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线结果表明IL-17D高表达与NSCLC患者的PFS和OS显著负相关,高表达患者的中位PFS为3.1个月对比低表达患者6.5个月[95%CI为(1.178,3.655),P=0.009],中位OS高表达组对比低表达组为9.8个月对比21.8个月[95%CI(1.116,4.392),P=0.018],ROC曲线表明其预测性能较好[AUCPFS=0.702,95%CI(0.562,0.842),P=0.027;AUCOS=0.684,95%CI(0.550,0.818),P=0.014]。虽然IL-11和IL-36A不能很好地预测NSCLC患者的PFS和OS(P>0.05),但当两者与IL-17D的表达模式联合时,发现上述3种ILs均为高表达的NSCLC患者,中位PFS与OS分别缩短至2.2个月(P=0.003)和3.0个月(P<0.001),ROC曲线表明其预测效能得到提升[AUCPFS=0.748,95%CI(0.615,0.880),P=0.007;AUCOS=0.703,95%CI(0.573,0.833),P=0.007]。【结论】IL-11、IL-17D和IL-36A高表达提示NSCLC患者疾病进展的风险较高,与患者不良的PFS和OS相关,可能为NSCLC的ICB辅助治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 IL-11 IL-17D IL-36A 非小细胞肺癌 免疫检查点阻断治疗
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骨髓间充质干细胞对免疫损伤卵巢的修复作用 被引量:9
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作者 李威娜 谢琪璇 +5 位作者 秦俊文 黄伟 叶绍恩 罗峰 张春雪 肖銮娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期825-829,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6~8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨... 目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6~8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS。MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制。结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少。结论腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 卵巢 免疫损伤 修复
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枸杞多糖通过抑制NF-κB信号通路保护脂多糖损伤的人脐静脉血管内皮细胞增殖活性与分泌功能 被引量:10
11
作者 刘倩 韦建瑞 +2 位作者 张雷 周兆 吕林林 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期240-246,共7页
目的:观察枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)致人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分为空白对照组、LBP组、LPS模型组、LBP+LPS实验组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western-blo... 目的:观察枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)致人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分为空白对照组、LBP组、LPS模型组、LBP+LPS实验组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western-blot法检测诱导型一氧化氮活酶(iNOS)、Caspase-3及NF-κB p65蛋白水平,ELISA法检测上清液TNF-α、IL-1β水平,Gries法测上清一氧化氮(NO)含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA).结果:与对照组相比,LPS模型组HUVEC增殖活力显著下降,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著升高,LBP处理则可部分增加受损内皮细胞的增殖活性,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著下降.结论:枸杞多糖对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,与抑制NF-k B信号通路、抑制促炎因子TNF-α和IL-1β释放,抑制NO合成、减轻氧化应激,抑制凋亡蛋白Caspase-3表达有关. 展开更多
关键词 枸杞多糖 脂多糖 人脐静脉血管内皮细胞 NF-ΚB
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实时定量RT-PCR检测TCRVγ亚家族基因表达水平 被引量:7
12
作者 陈少华 李扬秋 +3 位作者 杨力建 李萡 罗更新 张涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期166-168,共3页
目的:建立SYBRGreenI实时定量检测TCRVγ亚家族T细胞表达水平的比较Ct法。方法:利用倍比稀释的成人正常胸腺组织cDNA建立TCRVγⅠ—VγⅢ和B2微球蛋白基因(B2M)基因的相对标准曲线,实验证实靶基因(VγⅠ~VγⅢ)分别和看家基因(... 目的:建立SYBRGreenI实时定量检测TCRVγ亚家族T细胞表达水平的比较Ct法。方法:利用倍比稀释的成人正常胸腺组织cDNA建立TCRVγⅠ—VγⅢ和B2微球蛋白基因(B2M)基因的相对标准曲线,实验证实靶基因(VγⅠ~VγⅢ)分别和看家基因(152M)的扩增效率-致,可采用比较ct法对TCRVγI—VγⅢ的表达进行相对定量,并运用该方法检测20例健康成人外周血TCRVγI—VγⅢ的表达水平。结果:成人外周血TCRVγⅡ的表达量最高,TCRVγ1次之,TCRVγⅢ的表达量最低,三者比较有统计学意义(P〈0.05)。结论:本研究率先建立了利用SYBRGreenI实时荧光定量RT—PCR检测人TCRV7基因mRNA表达水平比较Ct法,并在国内首先提供了健康成人外周血TCRVγ基因各亚家族mRNA表达水平的资料。 展开更多
关键词 实时荧光定量RT-PCR 比较Ct法 TCR
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Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况 被引量:4
13
作者 沈琦 郑海涛 +2 位作者 陈少华 杨力建 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期581-584,共4页
目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的... 目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-ΔCt×100%计算Elf-1基因表达水平。结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况。 展开更多
关键词 Elf-1基因 实时定量PCR 急性髓细胞性白血病(AML) T细胞免疫缺陷 TCRζ链
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脂肪源性血管基质成分对皮肤光老化的影响 被引量:6
14
作者 王婧薷 陈苑雯 +5 位作者 李朦 李升红 廖选 张志丹 谢光辉 刘宏伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期892-899,共8页
目的:观察人脂肪源性血管基质成分(stromal vascular fractions,SVF)对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)诱导的裸大鼠皮肤光老化的影响。方法:6周龄裸大鼠随机分为正常对照组及实验组,实验组持续UVB照射8周建立皮肤光老化模型并随... 目的:观察人脂肪源性血管基质成分(stromal vascular fractions,SVF)对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)诱导的裸大鼠皮肤光老化的影响。方法:6周龄裸大鼠随机分为正常对照组及实验组,实验组持续UVB照射8周建立皮肤光老化模型并随机分为模型组,以及SVF低剂量(low-dose,LD)、中剂量(middle-dose,MD)和高剂量(high-dose,HD)(100μL悬液中的细胞数分别为10~4、10~5和10~6)治疗组;采用酶消化法提取健康女性脂肪组织中的SVF,分别取低、中、高剂量的SVF悬液注射于裸大鼠背部皮下;模型组注射相同剂量的生理盐水,正常对照组不做任何处理;7 d后取材,观察注射部位表皮厚度及结构的改变;28 d后取材观察注射部位真皮厚度及结构的改变。结果:SVF治疗7 d后,中、高剂量治疗组裸大鼠皮肤较实验对照组表皮层厚度减小、角质层比例下降、基底层处于异常增殖状态的细胞核减少(P〈0.05)。治疗28 d后,中剂量及高剂量治疗组Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达量增加,Ⅲ型胶原蛋白及基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)mRNA相对表达量下降(P〈0.05),高剂量治疗组皮肤真皮层厚度增加(P〈0.05)。结论:SVF具有抗皮肤光老化的潜能,有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 血管基质成分 脂肪源性干细胞 光老化
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CML细胞抗原相关TCR Vα13/Vβ21和Vα18/Vβ21寡克隆T细胞及其CDR3序列特点 被引量:3
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作者 查显丰 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 卢育洪 张涛 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期538-542,共5页
目的:分析慢性粒细胞白血病(CML)病人的克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR和基因扫描分析1例CML患者外周血单个核细胞中的TCR Vα和Vβ基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα和Vβ亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增... 目的:分析慢性粒细胞白血病(CML)病人的克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR和基因扫描分析1例CML患者外周血单个核细胞中的TCR Vα和Vβ基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα和Vβ亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增殖特点,寡克隆的PCR产物再进行序列分析。结果:该病人外周血T细胞表达18个TCR Vα和12个TCR Vβ亚家族,其中Vα13、Vα18、Vβ1和Vβ21亚家族呈寡克隆性。CDR3序列分析获得3个TCR克隆基因序列,分别为Vα13NJα49、Vα18NJα50和Vβ21NDβNJβ2.7。结论:获得1例CML病人外周血克隆性增殖αβ+T细胞的3个TCR基因CDR3序列,提示病人可能存在与CML细胞抗原相关的Vα13/Vβ21或Vα18/Vβ21T细胞克隆。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 T细胞受体 基因扫描 CDR3 克隆性
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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究 被引量:6
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作者 陈少华 查显丰 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1594-1597,共4页
近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 血液肿瘤 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子 靶向治疗
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淋巴细胞白血病患者CD3基因表达模式的变化 被引量:3
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作者 沈琦 陈少华 +3 位作者 杨力建 李萡 闫小娟 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期131-135,共5页
目的:了解T细胞受体信号传导分子CD3γδεζ基因在T和B细胞白血病病人中的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测32例淋巴细胞肿瘤病人:急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)12例、慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)9例、急... 目的:了解T细胞受体信号传导分子CD3γδεζ基因在T和B细胞白血病病人中的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测32例淋巴细胞肿瘤病人:急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)12例、慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)9例、急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)11例及10例健康人外周血单个核细胞中CD3各亚单位表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算CD3分子γ、δ、ε和ζ链表达水平。结果:B-ALL病人的CD3分子γ、δ和ε链表达中位数水平分别为4.29%,0.67%,17.8%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ链表达水平为0.99%,与健康对照组相比,显著降低(P=0.02)。B-CLL病人的CD3δ、ε基因的表达分别为0.52%,6.72%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ、ζ基因(2.72%,0.77%)则比健康人明显下降(P<0.05)。在T-ALL病人中,CD3分子γ、δ和ε的表达(32.99%,12.9%,61.56%)与健康对照组相比,均明显上升(P<0.05),而CD3ζ的表达量为4.17%,与健康人无显著性差异(P=0.44)。B-ALL、B-CLL病人和健康对照组的CD3分子各链的表达模式依次为CD3ε,CD3γ,CD3ζ,CD3δ,而T-ALL病人的表达模式顺序为CD3ε,CD3γ,CD3δ,CD3ζ。结论:在B细胞白血病中CD3各基因的表达水平多为降低,其变化可能与机体T细胞免疫缺陷相关。而在T细胞白血病中CD3各基因表达水平增加可能是白血病性T细胞一个特点。 展开更多
关键词 CD3链基因 基因表达 实时定量PCR 淋巴细胞白血病 免疫缺陷
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中国恒河猴Mamu-B*1703/EGFP在K562和B16细胞中的表达及分布 被引量:3
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作者 欧阳东云 徐丽慧 +2 位作者 高琦 郭贺 何贤辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期874-878,共5页
目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562... 目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562和B16细胞,细胞收集后以W6/32单克隆抗体或抗Mamu-B*1703抗血清及PE标记二抗染色,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析Mamu-B*1703复合体在细胞内和细胞表面的表达。结果在K562和B16细胞的细胞质内均可观察到与Mamu-B*1703重链基因融合表达的绿色荧光蛋白激发后的绿色荧光,即2种细胞均可表达外源Mamu-B*1703重链分子;但通过藻红蛋白标记的抗MHCⅠ类分子复合体抗体染色显示,Mamu-B*1703复合体仅表达于K562细胞表面,而不表达于B16细胞表面。结论Mamu-B*1703重链可与人K562细胞而不能与小鼠B16细胞内的βm轻链结合组装成复合体,表达于细胞表面,提示研究恒河猴的MHCⅠ分子表达应利用人类的细胞株。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体Ⅰ类分子 Mamu-B*1703 中国恒河猴 转染
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ITP中T细胞活化信号分子c-Cbl和Cbl-b的表达变化 被引量:3
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作者 钟隽 陈少华 +5 位作者 郁志 陆帅 谭家雄 杨力建 李萡 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期472-475,共4页
目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健... 目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健康成人作为对照.结果:ITP组Cbl-b的表达水平(中位数为0.091%)与健康成人组Cbl-b的表达水平(中位数为0.366%)相比,明显降低(P<0.001);而c-Cbl基因在ITP组中的表达水平(中位数为0.372%)与健康成人组的表达水平(中位数为0.298%)相比没有统计学差异,但c-Cbl基因在ITP女性患者样本中的表达水平(中位数为0.236%)明显低于男性患者样本c-Cbl的表达水平(中位数为0.479%)(P=0.039).结论:ITP患者外周血中Cbl-b表达下调,可能是其T细胞免疫异常活化的原因之一. 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 CBL-B C-CBL 基因表达
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疏肝健脾方药对NASH大鼠Kupffer细胞NF-κB p65和IKKβ mRNA及蛋白表达的影响 被引量:9
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作者 韩莉 杨钦河 +10 位作者 杨雪松 胡巢凤 张玉佩 冯高飞 王文晶 何秀敏 王彦平 程少冰 金玲 闫海震 黄进 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期641-646,共6页
目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB)p65和IκB激酶β(IKKβ)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(... 目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠Kupffer细胞核因子κB(NF-κB)p65和IκB激酶β(IKKβ)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的高、低剂量进行干预,16周后分离Kupffer细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别对Kupffer细胞进行活性和纯度鉴定;实时定量PCR法检测Kupffer细胞IKKβ和NF-κB p65 mRNA的表达水平;Western blotting法检测Kupffer细胞IKKβ、p-IKKβ和NF-κB p65蛋白水平。结果:每只大鼠获得纯化的Kupffer细胞(1.5~2.0)×107,Typan blue染色显示这些细胞活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上;与正常组比较,模型组Kupffer细胞IKKβmR-NA及蛋白的表达水平均明显升高(P<0 01);与模型组比较,高剂量综合方、健脾方和疏肝方组IKKβmRNA的表达水平下调明显(P<0.01或P<0.05);IKKβ及磷酸化蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P<0.01或P<0.05);与正常组比较,模型组Kupffer细胞NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01),与模型组比较,NF-κB p65 mRNA的表达水平以综合方组及高剂量健脾方组下调明显(P<0.05),NF-κBp65蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著(P<0.01)。结论:Kupffer细胞IKKβ、NF-κB p65 mRNA及IKKβ、p-IKKβ、NF-κB p65蛋白的高表达可能参与NASH的发病,抑制这些信号分子的表达可能是疏肝健脾方药抗NASH的重要机制之一。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝炎 疏肝健脾方药 KUPFFER细胞 核因子ΚB IκB激酶β
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