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细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应
被引量:
8
1
作者
李春杰
赵建
+12 位作者
张世勇
潘微彤
蒲韵竹
贾启燕
查晓丹
尚艳楠
黄春倩
刘艳琴
钟玉绪
李前
丁日高
付爱玲
赵宝全
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期870-877,共8页
目的:建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯( PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,...
目的:建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯( PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞,通过荧光筛选,遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg ( CYP3A65-EGFP);利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光在肝和消化道表达;该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后,铜0.1和0.2μmol·L^-1、镉0.35和0.7μmol·L^-1组、锌1.5和3μmol·L^-1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01);铜0.9μmol·L^-1组、镉2.7和5.4μmol·L^-1组及锌24μmol·L^-1组荧光相对表达量显著减弱( P<0.01);染毒168 h 后,铜0.1和0.2μmol·L^-1组、镉0.35和0.7μmol·L^-1组、锌1.5和3μmol·L^-1组及PCB1262~32μmol·L^-1浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01),铜0.9μmol·L^-1组、镉2.7和5.4μmol·L^-1组、锌12和24μmol·L^-1组荧光相对表达量减弱( P<0.05),随着浓度增加荧光减弱,呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。
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关键词
细胞色素P450
CYP3A65
斑马鱼
转基因
铜
镉
锌
多氯联苯化合物
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职称材料
题名
细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应
被引量:
8
1
作者
李春杰
赵建
张世勇
潘微彤
蒲韵竹
贾启燕
查晓丹
尚艳楠
黄春倩
刘艳琴
钟玉绪
李前
丁日高
付爱玲
赵宝全
机构
西南大学药学院
军事医学
科
学院毒物药物研究所毒理学与抗毒药物研究国家重点实验室
内蒙古通辽市科尔沁区第一人民医院骨一科
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期870-877,共8页
基金
全军医学科技"十二五"科研项目重点课题(BWS11R021)
国家科技重大专项(2013ZX09402103)~~
文摘
目的:建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯( PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞,通过荧光筛选,遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg ( CYP3A65-EGFP);利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光在肝和消化道表达;该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后,铜0.1和0.2μmol·L^-1、镉0.35和0.7μmol·L^-1组、锌1.5和3μmol·L^-1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01);铜0.9μmol·L^-1组、镉2.7和5.4μmol·L^-1组及锌24μmol·L^-1组荧光相对表达量显著减弱( P<0.01);染毒168 h 后,铜0.1和0.2μmol·L^-1组、镉0.35和0.7μmol·L^-1组、锌1.5和3μmol·L^-1组及PCB1262~32μmol·L^-1浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01),铜0.9μmol·L^-1组、镉2.7和5.4μmol·L^-1组、锌12和24μmol·L^-1组荧光相对表达量减弱( P<0.05),随着浓度增加荧光减弱,呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。
关键词
细胞色素P450
CYP3A65
斑马鱼
转基因
铜
镉
锌
多氯联苯化合物
Keywords
cytochrome P-450 CYP3A65
zebrafish,transgenic
copper
cadmium
zinc
polychlorinated biphenyls
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应
李春杰
赵建
张世勇
潘微彤
蒲韵竹
贾启燕
查晓丹
尚艳楠
黄春倩
刘艳琴
钟玉绪
李前
丁日高
付爱玲
赵宝全
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
8
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