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马属动物克隆技术:从实验室到产业应用
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作者 刘琦 任宏 +6 位作者 温鑫 才文道力玛 伊敏娜 赵比力格 斯琴 何千倩 格日乐其木格 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期52-59,共8页
随着我国经济的快速发展,马产业在文化、体育、生态旅游和食品领域中崭露头角。然而,马属动物的繁殖面临“三低难题”,即自然受孕率低、胚胎存活率低和幼驹成活率低,并且通常为单胎繁殖,这些独特的生物学特性严重制约了良种繁育的进程... 随着我国经济的快速发展,马产业在文化、体育、生态旅游和食品领域中崭露头角。然而,马属动物的繁殖面临“三低难题”,即自然受孕率低、胚胎存活率低和幼驹成活率低,并且通常为单胎繁殖,这些独特的生物学特性严重制约了良种繁育的进程。体细胞克隆作为一种有效的繁育技术,能够为马产业的发展带来显著提升。文章主要综述了体细胞克隆的一般流程、体细胞克隆对马属动物命运的改变、体细胞克隆现存挑战及未来展望,以期为国内马属动物体细胞克隆的发展提供理论参考。 展开更多
关键词 体细胞克隆 卵母细胞
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蒙古马两个类群肌纤维发育表型及基因表达谱比较研究
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作者 胡瀚文 图格琴 +8 位作者 任秀娟 丁文淇 宫文典 贾紫洁 史琳 马木仁 宝日格乐 芒来 白东义 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期643-656,共14页
为探究不同类群蒙古马肌肉生长差异,本研究对生长环境差异最大、距离最远的蒙古马类群(巴尔虎马、乌审马)的肌肉表型与肌肉分子层面的差异进行了比较研究。本研究的试验动物分别是3匹生长在陈巴尔虎旗的巴尔虎马和3匹生长在乌审旗的乌审... 为探究不同类群蒙古马肌肉生长差异,本研究对生长环境差异最大、距离最远的蒙古马类群(巴尔虎马、乌审马)的肌肉表型与肌肉分子层面的差异进行了比较研究。本研究的试验动物分别是3匹生长在陈巴尔虎旗的巴尔虎马和3匹生长在乌审旗的乌审马,均为在野外自由放养采食的健康种公马。每个类群的平均年龄为5岁,同一类群马匹体况相近。其中巴尔虎马宰前活重为(303.10±14.10)kg、胴体重为(148.29±15.43)kg,乌审马宰前活重为(287.90±37.5)kg、胴体重为(140.83±5.04)kg。将试验动物按类群分为2个组,每组3个重复,对所有试验动物进行屠宰并取其臀中肌,将采集的肌肉样本石蜡包埋后进行HE和免疫组化染色,对肌纤维面积以及慢肌纤维占比进行统计;同时对所采集的肌肉样本进行转录组测序,测序结果使用DESeq2软件进行差异基因的筛选,使用David在线软件对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析,最后通过qRT-PCR对测序结果进行验证。本试验通过HE染色和免疫组化染色发现,巴尔虎马臀中肌的肌纤维平均面积为(2592±180.92)μm^(2),乌审马臀中肌肌纤维面积为(1997±73.39)μm^(2),二者差异显著(P<0.05);巴尔虎马臀中肌慢肌纤维占比为(10.34±0.59)%,乌审马臀中肌中慢肌纤维占比为(8.14±0.81)%,二者差异差异不显著(P>0.05)。本研究在巴尔虎马和乌审马的臀中肌中共鉴定出1103个差异基因,其中有460个上调基因和643个下调基因在乌审马的臀中肌中表达。研究发现,MYH15、MYOZ 2、多个谷氨酸受体基因和多个GABAA型受体基因在巴尔虎马臀中肌中高表达;MYH 6和FOXO 1基因在乌审马臀中肌中高表达。对差异基因进行富集分析发现,GO分析富集到了208个条目,KEGG分析富集到了65个通路,所富集到的条目与通路主要和谷氨酸信号传导、GABA信号传导以及肌肉生长发育有关。本试验对巴尔虎马和乌审马的臀中肌进行研究,发现在二者臀中肌肌肉表型方面,巴尔虎马肌纤维面积显著大于乌审马,但慢肌纤维占比差异不显著;在分子层面二者有较为明显的差异,这些差异集中在了肌纤维类型、肌纤维面积以及肌肉中肌梭神经信号传导等方面。 展开更多
关键词 巴尔虎马 乌审马 肌纤维面积 转录组
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马卵母细胞玻璃化冷冻保存研究进展
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作者 杨明颖 王娜 +5 位作者 刘源壹 李昕俞 巴音那木拉 石玉杰 芒来 杜明 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4143-4155,共13页
卵母细胞的冷冻保存技术对于人类辅助生殖技术和畜牧生产具有重要的意义,该技术有助于优良品种的遗传资源保护和生物多样性的维持。然而,由于卵母细胞具有表面积与体积比值较小、细胞膜渗透性差等特性,其在冷冻过程中极易形成冰晶造成... 卵母细胞的冷冻保存技术对于人类辅助生殖技术和畜牧生产具有重要的意义,该技术有助于优良品种的遗传资源保护和生物多样性的维持。然而,由于卵母细胞具有表面积与体积比值较小、细胞膜渗透性差等特性,其在冷冻过程中极易形成冰晶造成机械损伤、遭受氧化应激和冷冻保护剂毒性等影响,严重降低其解冻后的发育能力。与其他动物相比,马卵母细胞中丰富的脂滴含量降低了其低温耐受性,冷冻保存难度更大。尽管可以从玻璃化冷冻的未成熟卵母细胞中获得后代,但与新鲜卵母细胞相比,经玻璃化冷冻卵母细胞的发育能力还有待进一步提升。本文主要从玻璃化冷冻对马卵母细胞造成的损伤类型和影响马卵母细胞冷冻效率的因素等方面进行综述,为进一步建立和完善马卵母细胞玻璃化冷冻保存方案提供参考。 展开更多
关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻 冷冻损伤 冷冻保护剂
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马胎盘滋养层细胞研究进展
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作者 阿斯雅 斯琴 +2 位作者 伊敏娜 温鑫 格日乐其木格 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第11期5063-5073,共11页
马属动物妊娠过程中,滋养层细胞在胚胎附植、母胎界面血管重塑及母体与胎儿之间营养和气体交换等生理过程中发挥重要作用。鉴于马胚胎在子宫内迁移时间较长,笔者简述了马胚胎滋养层细胞在胚胎定位、妊娠识别及维持妊娠中的生物学意义,... 马属动物妊娠过程中,滋养层细胞在胚胎附植、母胎界面血管重塑及母体与胎儿之间营养和气体交换等生理过程中发挥重要作用。鉴于马胚胎在子宫内迁移时间较长,笔者简述了马胚胎滋养层细胞在胚胎定位、妊娠识别及维持妊娠中的生物学意义,并通过阐述类固醇激素、生长因子及免疫细胞因子等因素对滋养层细胞的调控机制,以期揭示其对滋养层细胞生物学活性的影响。目前,有关马滋养层细胞的研究仍不完善,未来可考虑利用单细胞测序、类器官培养等新技术来揭示其发育调控模式。同时,结合多组学分析,筛选出可用于早期妊娠诊断的生物标志物,以提高马胚胎的存活率和繁殖效率。此外,根据马属动物的生殖特性,使用针对性的营养调控策略和免疫干预方法,可为改善马繁殖性能提供新思路。 展开更多
关键词 滋养层细胞 早期妊娠 胎盘形成 调控机制
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家马不同毛色遗传特性研究综述 被引量:2
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作者 安塔娜 韩海格 +3 位作者 陶克涛 宝音德力格尔 李文博 芒来 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3297-3308,共12页
家马的毛色是识别马匹和进行品种登记的主要内容及依据。古DNA研究表明,最先出现的家马毛色是骝色,在后续的演化过程中出现黑色和栗色,这3种毛色统称为基础毛色。与其他哺乳动物一样,家马的色素细胞通过真黑素和棕黑素的不同组合产生不... 家马的毛色是识别马匹和进行品种登记的主要内容及依据。古DNA研究表明,最先出现的家马毛色是骝色,在后续的演化过程中出现黑色和栗色,这3种毛色统称为基础毛色。与其他哺乳动物一样,家马的色素细胞通过真黑素和棕黑素的不同组合产生不同毛色。本文系统地总结了家马的13种不同毛色分类,综述了近三十年内关于家马不同毛色形成的候选基因研究进展,为深入解析家马不同毛色形成遗传机理、减少相关遗传疾病的发生以及后续的系谱登记和选种选育工作提供理论参考和依据。 展开更多
关键词 家马 毛色多样性 候选基因 黑色素
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剪接因子hnRNPF对蒙古马精子生成的影响
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作者 翁雅娟 李蓓 +5 位作者 芒来 薛嘉宁 特日格乐 宋代玲 王国庆 蔺雅楠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期598-606,共9页
旨在探究可变剪接因子核不均一核糖核蛋白F(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F,hnRNPF)对蒙古马精子生成的影响。本研究提取并培养3岁性成熟蒙古马睾丸支持细胞;构建hnRNPF过表达慢病毒载体,将载体转染至蒙古马睾丸支持细胞中... 旨在探究可变剪接因子核不均一核糖核蛋白F(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F,hnRNPF)对蒙古马精子生成的影响。本研究提取并培养3岁性成熟蒙古马睾丸支持细胞;构建hnRNPF过表达慢病毒载体,将载体转染至蒙古马睾丸支持细胞中;每组3个重复,分别在转染0、24、48、72 h时利用CCK-8检测转染后细胞增殖情况并确定最佳转染时间;提取转染后与未转染的蒙古马睾丸支持细胞RNA,设计已知与精子生成相关基因的引物进行qRT-PCR试验,检测精子生成相关基因在两种细胞中的表达情况。琼脂糖凝胶电泳结果显示,hnRNPF慢病毒过表达载体构建成功;CCK-8检测发现,细胞经过表达慢病毒载体转染72 h后活性最高,并且转染后细胞活性要高于未转染细胞活性,说明hnRNPF过表达会促进蒙古马睾丸支持细胞的增殖;qRT-PCR结果显示,精子生成相关基因(PKMYT1、CDC25C、YWHAZ、BUB1、BTRC、CCNE1、CALM1、PLK1、REC8、MAPK3、ADCY7)在两种细胞中的表达量差异显著,均在转染hnRNPF过表达载体细胞中含量较高。本试验结果表明,剪接因子hnRNPF可能对于蒙古马精子生成具有直接或间接的促进作用,为提高蒙古马精子数量和精液品质提供了新的思路。 展开更多
关键词 蒙古马 hnRNPF 精子生成 可变剪接
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草原纯血马新品种培育概述
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作者 丁文淇 宫文典 +3 位作者 图格琴 史晓渊 李政 白东义 《中国畜禽种业》 2025年第6期45-51,3,共8页
该文主要介绍草原纯血马的培育进程,并对每一代的体尺、体重数据进行了系统的测定。结果显示,新培育的草原纯血马不仅在体格方面显著提升,速度、耐力、爆发力等方面也能得到改良,可使草原纯血马在马术竞技、赛马运动和现代马产业中展现... 该文主要介绍草原纯血马的培育进程,并对每一代的体尺、体重数据进行了系统的测定。结果显示,新培育的草原纯血马不仅在体格方面显著提升,速度、耐力、爆发力等方面也能得到改良,可使草原纯血马在马术竞技、赛马运动和现代马产业中展现出较强的竞争力。进一步的遗传分析表明,草原纯血马继承了父本和母本的优良基因,并通过科学的育种策略成功稳定了体型、速度、抗严寒等优良性状。草原纯血马具有巨大的市场潜力,预计在未来的国内马术赛事和马匹育种领域将占据重要位置,为我国马产业带来新的发展机遇。 展开更多
关键词 草原纯血马 杂交 选育进展
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马脐静脉内皮细胞分离培养及其功能验证
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作者 赵比力格 温鑫 +7 位作者 伊敏娜 才文道力玛 神英超 斯琴 照伦其其格 任宏 芒来 格日乐其木格 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2953-2962,共10页
【目的】建立一种简便且高效的体外马脐静脉内皮细胞(equine umbilical vein endothelial cells,eUVECs)分离和培养方法,并提供一个可靠的细胞模型,用于研究马的血管生成功能。【方法】在无菌条件下,从马脐带中分离静脉,并用PBS液彻底... 【目的】建立一种简便且高效的体外马脐静脉内皮细胞(equine umbilical vein endothelial cells,eUVECs)分离和培养方法,并提供一个可靠的细胞模型,用于研究马的血管生成功能。【方法】在无菌条件下,从马脐带中分离静脉,并用PBS液彻底冲洗。使用0.2%Ⅰ型胶原酶对脐静脉进行消化25~30 min后,收集分离的eUVECs进行培养。每12 h使用倒置显微镜观察eUVECs的生长状况。使用CCK-8法测定第1代(P1)和P3代eUVECs在7 d内的D450 nm值,并绘制生长曲线。通过免疫荧光染色方法鉴定内皮细胞标记物CD31和CD34的表达情况。使用间充质干细胞成脂和成骨分化诱导试剂诱导eUVECs,以验证其是否具有分化特性。确定内皮细胞后,添加梯度上升浓度(5、10、15、20、25 ng/mL)的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激eUVECs,使用CCK-8法检测细胞活性,观察细胞形态变化。使用Matrigel法培养eUVECs,用ImageJ软件分析数据,并统计新生血管的4个指标:成管交叉点、成管长度、成管数和成管面积。寻找体外血管生成能力的最佳TNF-α刺激浓度。【结果】使用0.2%Ⅰ型胶原酶消化法分离的eUVECs 4~5 d内的汇合度达到90%。在倒置显微镜下观察,这些细胞生长良好并呈铺路石状排列。通过免疫荧光染色确认了CD31和CD34在eUVECs中的阳性表达;并且eUVECs表现出薄弱的成脂和成骨分化能力。在Matrigel法培养条件下,20 ng/mL TNF-α处理组的成管交叉点数、成管长度、成管数和成管面积等血管形成能力指标最高,且极显著高于对照组(P<0.01)。然而,在常规培养条件下,随着TNF-α浓度增加到15 ng/mL,eUVECs的增殖受到显著抑制甚至开始导致细胞的凋亡。【结论】Ⅰ型胶原酶脐带注满消化法能够成功分离培养出原代eUVECs,20 ng/mL TNF-α显著增强eUVECs体外血管生成能力,eUVECs可以作为体外研究血管生成的细胞模型。 展开更多
关键词 脐静脉内皮细胞 Ⅰ型胶原酶消化法 培养鉴定 TNF-α 血管新生
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家畜卵巢生理解析与结构功能探究
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作者 何千倩 刘琦 +4 位作者 刘源壹 王娜 温鑫 韩宝祥 格日乐其木格 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4575-4591,共17页
卵巢作为雌性家畜生殖系统的核心组成部分,其结构、功能及其在生殖过程中的作用至关重要。文章系统综述了马、驴、牛、羊、猪等不同家畜卵巢的基本结构与功能特性,涵盖卵巢的位置分布、形态特征、皮质髓质结构以及独特的排卵窝特性等方... 卵巢作为雌性家畜生殖系统的核心组成部分,其结构、功能及其在生殖过程中的作用至关重要。文章系统综述了马、驴、牛、羊、猪等不同家畜卵巢的基本结构与功能特性,涵盖卵巢的位置分布、形态特征、皮质髓质结构以及独特的排卵窝特性等方面;深入剖析了卵巢特性对家畜发情周期、排卵特性以及繁殖性能的影响机制;详细介绍了CRISPR/Cas9基因编辑技术、孤雌激活技术以及高通量测序与生物信息学等新技术在家畜卵巢研究领域中的最新应用进展;同时,还展望了未来家畜卵巢研究的发展方向,重点聚焦于利用基因编辑技术优化家畜繁殖性能,以及借助大数据和人工智能技术提升繁殖效率等方面的潜力,旨在为深入理解家畜繁殖生物学机制、优化繁殖策略以及提高繁殖效率提供一定的科学依据,并为家畜繁殖技术的持续改进与创新提供有力支持。 展开更多
关键词 家畜 卵巢 繁殖 形态 发情周期 排卵
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