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香叶基香叶基焦磷酸合成酶在肺鳞状细胞癌中的表达及临床意义
1
作者 王鑫 王晓霞 +5 位作者 李彦庆 郑永鑫 乌杰 任猛 贾向东 许天祥 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期312-324,共13页
目的·利用生物信息学和免疫组织化学法探究在肺鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)组织中香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase 1,GGPS1)的表达及其临床意义。方法·首先从UCSC Xena平... 目的·利用生物信息学和免疫组织化学法探究在肺鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)组织中香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase 1,GGPS1)的表达及其临床意义。方法·首先从UCSC Xena平台下载LUSC组织与配对正常组织的转录组数据,使用R语言进行数据标准化和差异表达分析,并利用UALCAN数据库进行验证;采用UALCAN和LinkedOmics数据库分析LUSC患者中GGPS1表达与临床病理特征关系;利用Kaplan-Meier Plotter数据库探究LUSC患者GGPS1表达对预后的影响。应用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归分析筛选基因相关系数及风险评分。通过列线图和校正曲线评价GGPS1对LUSC的诊断价值。采用STRING、GeneMANIA数据库构建GGPS1蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。运用R语言挑选与GGPS1相关差异基因,并进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。采用免疫组织化学法检测LUSC患者GGPS1表达情况,并分析其与临床病理特征和预后的相关性。结果·通过TIMER2.0数据库检索到GGPS1在多数肿瘤中表达均升高,且在LUSC中呈高表达。UCSC Xena、UALCAN数据库中GGPS1在LUSC的表达高于癌旁组织(均P<0.05)。UALCAN和LinkedOmics数据库发现GGPS1在指标分期较晚患者中的表达水平更高,且Kaplan-Meier Plotter数据库显示LUSC患者GGPS1高表达总生存期(overall survival,OS)较短(P<0.05)。基于LASSO回归评估LUSC患者有较好的风险预测效能。构建LUSC患者的个体化预测模型具有最佳预测准确度。GO、KEGG结果显示,GGPS1相关基因主要与蛋白质代谢、调节脂质和胆固醇代谢过程、尼古丁成瘾、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferatoractivated receptors,PPAR)信号通路等有关。GGPS1的代谢功能可能促进肿瘤发生。免疫组化结果提示GGPS1主要定位于细胞质中,且LUSC组织中表达高于癌旁组织(P<0.05),GGPS1高表达与LUSC患者肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期有关(均P<0.05),且GGPS1表达高的患者OS明显短于低表达者(P=0.000)。多因素Cox回归分析提示GGPS1可作为LUSC的独立预后因素。结论·相较于正常肺组织,GGPS1在LUSC中表达显著升高,尤其在肿瘤体积较大、淋巴结转移阳性及晚期的患者中表达升高更明显;且GGPS1过表达是LUSC患者预后差的独立预测因子。GGPS1有望成为新的LUSC诊治和预防的分子靶点。 展开更多
关键词 香叶基香叶基焦磷酸合成酶 肺鳞状细胞癌 生物信息学 免疫组织化学 临床意义
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肝癌类器官的研究进展
2
作者 赵丽 郭梓琪 +1 位作者 杨勇 杨宏新 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1486-1492,共7页
类器官是一种由干细胞或恶性肿瘤自我组装形成并用于临床研究的新型疾病模型,类似于体内的组织与器官,且具有部分功能的3D细胞结构。传统的肝癌模型有两种:一是通过诱导构建动物肝癌模型,即体内模型;二是在体外通过相应细胞系进行细胞... 类器官是一种由干细胞或恶性肿瘤自我组装形成并用于临床研究的新型疾病模型,类似于体内的组织与器官,且具有部分功能的3D细胞结构。传统的肝癌模型有两种:一是通过诱导构建动物肝癌模型,即体内模型;二是在体外通过相应细胞系进行细胞学实验研究。类器官集合了传统模型的优点,在肿瘤研究方面具有独特的优势。传统模型由于不能真实反映细胞微环境,常导致与临床研究结果不一致,而新型研究模型的出现,为肝癌研究提供了一个新的方向。本文对肝癌类器官的研究进展进行综述,旨在为今后肝癌研究提供全新的视角。 展开更多
关键词 肝肿瘤 类器官 细胞培养技术
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STK15、MCM5在胃癌前病变及癌变组织中的表达及相关性分析 被引量：4
3
作者 高峻 杨勇 +1 位作者 陈霖 杨宏新 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期1432-1434,共3页
目的:研究中心体扩增激酶STK15和微小染色体维持蛋白5(MCM5)在胃癌组织、癌旁正常胃组织及不典型增生胃组织中的表达水平,旨在探讨二者在胃癌发生中的作用及相关机制。方法:采用Real-time荧光定量PCR技术对胃组织中STK15和MCM5的mRNA表... 目的:研究中心体扩增激酶STK15和微小染色体维持蛋白5(MCM5)在胃癌组织、癌旁正常胃组织及不典型增生胃组织中的表达水平,旨在探讨二者在胃癌发生中的作用及相关机制。方法:采用Real-time荧光定量PCR技术对胃组织中STK15和MCM5的mRNA表达水平进行检测。采用SPSS统计软件对二者表达进行方差分析、pearson检验对二者表达的关联性进行分析。结果:STK15在胃癌组织的表达量为1.326±0.072,在癌旁正常胃组织为0.655±0.053,不典型增生胃组织为0.703±0.072,除癌旁正常组织与不典型增生组织中表达无差异(P>0.05)外,其余各组两两比较差异均有显著性(P<0.01)。MCM5在胃癌组织的表达量为0.864±0.038,正常组织为0.553±0.048,不典型增生组织为0.796±0.055,各组两两比较差异均存在显著性(P<0.01)。在胃组织中STK15和MCM5表达呈正相关(r=0.744,P<0.01)。结论:中心体扩增和微小染色体的维持是细胞癌变过程的重要事件,MCM5能很好反映细胞的增殖状态,中心体的异常扩增是细胞恶性克隆的关键环节,二者联合检测有助于胃癌的早期诊断和评估侵袭能力。 展开更多
关键词 胃肿瘤 STK15 MCM5
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Aurora激酶抑制剂VX-680对未分化甲状腺癌细胞增殖的影响 被引量：4
4
作者 何源哈达 陈霖 +1 位作者 杨勇 杨宏新 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第17期2791-2794,共4页
目的:研究Aurora-A激酶抑制剂VX-680对未分化甲状腺癌8305C细胞增殖的影响,并探讨其相关机制。方法:采用MTT法检测VX-680对8305C细胞增殖活性的影响;利用免疫荧光化学方法检测甲状腺癌细胞在药物作用下Aurora-A、Bax和Bcl-2的表达变化... 目的:研究Aurora-A激酶抑制剂VX-680对未分化甲状腺癌8305C细胞增殖的影响,并探讨其相关机制。方法:采用MTT法检测VX-680对8305C细胞增殖活性的影响;利用免疫荧光化学方法检测甲状腺癌细胞在药物作用下Aurora-A、Bax和Bcl-2的表达变化。结果:随药物浓度增加甲状腺癌细胞生长受到明显抑制(P<0.05);随作用时间延长,药物的抑制作用也增强(P<0.05)。48 h细胞免疫荧光结果显示400 nmo L浓度处理的8305C细胞,Aurora-A激酶和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),Bax蛋白量变化不明显(P>0.05)。结论:VX-680通过抑制Aurora-A表达,抑制细胞有丝分裂,同时通过抑制Bcl-2表达,导致Bcl-2/Bax比例失衡,诱发细胞凋亡。VX-680是未分化甲状腺癌的一种非常有潜力的靶向抑制剂。 展开更多
关键词 甲状腺癌 VX-680 Aurora—A BCL-2 BAX
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兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体的制备及鉴定 被引量：3
5
作者 杨宏新 杨勇 曹贵方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期362-367,共6页
目的制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体。方法构建pET-22b-SAS1B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达。用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SA... 目的制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体。方法构建pET-22b-SAS1B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达。用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SAS1B多克隆抗体。ELISA检测SAS1B抗体效价,Western blot和免疫组织化学法鉴定SAS1B抗体特异性。结果在构建pET-22b-SAS1B-His原核表达载体的基础上,在BL21(DE3)细胞成功诱导表达SAS1B重组蛋白。制备的兔抗人SAS1B多克隆抗体效价为1∶51200。SAS1B多克隆抗体能与SAS1B重组蛋白特异结合且能识别乳腺癌组织中的SAS1B蛋白。结论成功制备具有较好特异性的兔抗人SAS1B多克隆抗体。 展开更多
关键词 精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B) 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
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Aurora-A与survivin在甲状腺癌中的表达及意义 被引量：4
6
作者 杨勇 杨宏新 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第23期4241-4243,共3页
目的:检测甲状腺癌组织中Aurora-A和survivin的表达,探讨Aurora-A和survivin在甲状腺癌发生中的作用及相关机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测42例甲状腺癌,23例甲状腺瘤和12例癌旁正常甲状腺中Aurora-A和survivin蛋白的表达情况。结... 目的:检测甲状腺癌组织中Aurora-A和survivin的表达,探讨Aurora-A和survivin在甲状腺癌发生中的作用及相关机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测42例甲状腺癌,23例甲状腺瘤和12例癌旁正常甲状腺中Aurora-A和survivin蛋白的表达情况。结果:Aurora-A和survivin在癌旁正常甲状腺中未见表达,在甲状腺癌中表达率分别为66.7%和78.6%,在甲状腺瘤中表达率为17.4%和39.1%,Aurora-A和survivin在甲状腺癌与甲状腺瘤中表达差异有显著性(χ2=14.984,P=0.001;χ2=11.049,P=0.004);甲状腺癌中Aurora-A和survivin的表达具有相关性(r=0.499,P=0.001)。结论:Aurora-A和survivin的异常表达与甲状腺癌发生密切相关。Aurora-A可能通过扩增中心体,survivin可能通过抑制癌细胞凋亡共同参与细胞癌变,survivin直接激活Aurora-A激酶活性尚需进一步证实。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 SURVIVIN AURORA-A
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急性呼吸窘迫综合征患者香叶基香叶基焦磷酸合成酶的表达及其临床意义 被引量：2
7
作者 王晓霞 许天祥 +3 位作者 吕镗烽 胥武剑 刘建波 宋勇 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期639-645,共7页
目的·通过检测急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者外周血单个核细胞中香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPS)的表达情况,研究GGPPS在ARDS诊治中的临床意义。方法&#... 目的·通过检测急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者外周血单个核细胞中香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPS)的表达情况,研究GGPPS在ARDS诊治中的临床意义。方法·通过定量反转录聚合酶链反应检测ARDS患者(ARDS组)和正常人群(对照组)外周血单个核细胞中GGPPS mRNA水平,采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测ARDS组和对照组外周血单个核细胞中GGPPS蛋白表达水平。同时比较ARDS存活组和死亡组GGPPS的表达差异,并采用Spearman相关分析明确GGPPS表达与ARDS患者临床指标的相关性。结果·ARDS组外周血单个核细胞中GGPPS mRNA水平明显高于对照组(P=0.000),并且随ARDS病情加重逐渐升高(P<0.05)。ARDS组外周血单个核细胞中GGPPS蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),并且随病情加重逐渐升高(P<0.05)。ARDS死亡组外周血单个核细胞中GGPPS mRNA水平及蛋白表达水平高于ARDS存活组(P<0.05)。ARDS患者外周血单个核细胞中GGPPS mRNA高表达与高的急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHE Ⅱ)(r=0.862,P=0.000)、高序贯器官功能衰竭估计(SOFA)评分(r=0.719,P=0.023)、低氧合指数(r=-0.821,P=0.000)、高C反应蛋白(r=0.758,P=0.024)及高白细胞计数(r=0.761,P=0.015)相关。结论·ARDS患者外周血单个核细胞中GGPPS表达水平升高,且其表达水平与ARDS病情严重程度及预后相关,GGPPS有望成为ARDS病情严重程度评估的生物标志物。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 香叶基香叶基焦磷酸合成酶 预后 生物标志物
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不同乳腺癌细胞冻融抗原负载树突细胞的抑瘤功能研究
8
作者 曹天泽 高维实 +2 位作者 郭慧军 马虎林 施晓辉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1339-1341,共3页
目的探讨不同乳腺癌细胞冻融抗原负载树突细胞(DC)的抑瘤功能。方法选取我院肿瘤外科乳腺癌手术患者纯化培养的乳腺癌细胞(A组)、乳腺癌组织(B组),购自北京协和医科大学的乳腺癌细胞株SKBR-3(C组)。分别制备冻融抗原,负载自体DC获得DC疫... 目的探讨不同乳腺癌细胞冻融抗原负载树突细胞(DC)的抑瘤功能。方法选取我院肿瘤外科乳腺癌手术患者纯化培养的乳腺癌细胞(A组)、乳腺癌组织(B组),购自北京协和医科大学的乳腺癌细胞株SKBR-3(C组)。分别制备冻融抗原,负载自体DC获得DC疫苗,以流式细胞仪和T淋巴细胞增殖实验检测DC表型及功能。结果诱导7 d后,3组DC的CD80、CD83、CD86和HLA-DR比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中A组和C组较B组均升高,差异有统计学意义(P<0.05);A组与C组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A组CPM值(13 047±215),B组(4 964±148),C组(5 082±176),3组比较差异有统计学意义(F=5 200.7159,P=0.0000);其中A组较B组和C组均升高,差异有统计学意义(q值分别为125.8166和123.9803,P<0.01);B组与C组比较,差异无统计学意义(q=1.8363,P>0.05)。结论纯化的自体肿瘤细胞冻融抗原体外致敏DC,可介导显著的T细胞免疫反应,从而起到抑瘤功能。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 树突细胞 疫苗
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