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应用RNAi干扰eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中FGF5基因的表达
1
作者
宝明涛
郭旭东
旭日干
《四川动物》
CSCD
北大核心
2008年第5期785-787,共3页
在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316~335bp区域、第499~518bp区域和第766~785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿...
在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316~335bp区域、第499~518bp区域和第766~785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中,搜集转染后的细胞提取总RNA,并反转录成cDNA。用SYBRGREENⅠ荧光定量PCR方法对转染了不同干扰载体的细胞cDNA进行检测,结果干扰载体对eGFP转基因小鼠成纤维细胞中的FGF5表达有较强的抑制作用。
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关键词
RNAI
SHRNA
SYBR
GREEN
Ⅰ荧光定量PCR
FGF5
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题名
应用RNAi干扰eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中FGF5基因的表达
1
作者
宝明涛
郭旭东
旭日干
机构
内蒙古大学实验动物研究中心教育部重点实验室
出处
《四川动物》
CSCD
北大核心
2008年第5期785-787,共3页
基金
国家863计划项目(2002AA242061)
内蒙古自然科学基金(200607010405)
内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ06055)资助
文摘
在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316~335bp区域、第499~518bp区域和第766~785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中,搜集转染后的细胞提取总RNA,并反转录成cDNA。用SYBRGREENⅠ荧光定量PCR方法对转染了不同干扰载体的细胞cDNA进行检测,结果干扰载体对eGFP转基因小鼠成纤维细胞中的FGF5表达有较强的抑制作用。
关键词
RNAI
SHRNA
SYBR
GREEN
Ⅰ荧光定量PCR
FGF5
Keywords
RNAi
shRNA
SYBR GREEN Ⅰ Real Time PCR
FGF5
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
应用RNAi干扰eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中FGF5基因的表达
宝明涛
郭旭东
旭日干
《四川动物》
CSCD
北大核心
2008
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