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应用RNAi干扰eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中FGF5基因的表达
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作者 宝明涛 郭旭东 旭日干 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第5期785-787,共3页
在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316~335bp区域、第499~518bp区域和第766~785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿... 在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316~335bp区域、第499~518bp区域和第766~785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中,搜集转染后的细胞提取总RNA,并反转录成cDNA。用SYBRGREENⅠ荧光定量PCR方法对转染了不同干扰载体的细胞cDNA进行检测,结果干扰载体对eGFP转基因小鼠成纤维细胞中的FGF5表达有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 RNAI SHRNA SYBR GREEN Ⅰ荧光定量PCR FGF5
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