蒙古绵羊ghrelin cDNA的克隆及序列分析 被引量：1

1

作者 吕东媛 曹贵方 +1 位作者 白春玲 旭日干 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期735-739,共5页

根据GenBank中报道的绵羊ghrelin序列设计一对特异性引物,以蒙古绵羊真胃组织中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出蒙古绵羊ghrelin的cDNA,并克隆到pTZ19载体中,经限制性内切酶谱和DNA序列测定,证实所克隆的蒙古绵羊ghrelin的cDNA... 根据GenBank中报道的绵羊ghrelin序列设计一对特异性引物,以蒙古绵羊真胃组织中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出蒙古绵羊ghrelin的cDNA,并克隆到pTZ19载体中,经限制性内切酶谱和DNA序列测定,证实所克隆的蒙古绵羊ghrelin的cDNA为ghrelin的部分序列,因为用NCBI网站上的BLAST功能将测序结果同已发表绵羊ghrelin序列进行对比,205个碱基中仅有1个碱基的差异,该差异不影响翻译后多肽的序列。该段cDNA包含由168个碱基组成的开放读码框(ORF),该ORF编码56个氨基酸残基的前原蒙古绵羊ghrelin。对蒙古绵羊ghrelin的研究将有助于进一步揭示其生理和病理功能,对反刍动物多种疾病过程的认识及防治策略具有深远意义。 展开更多

关键词 蒙古绵羊 GHRELIN CDNA 克隆 序列分析

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Wistar-Imamichi大鼠的引种、保种与扩大繁殖的研究 Ⅰ.引种动物育成期生长发育情况及4日稳定性周期出现日龄的观察

2

作者 旭日干 张锁链 薛晓先 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第Z1期4-6,共3页

着重观察了引种的Wistar—Imamichi大鼠育成期的生长发育情况及4日稳定性周期的出现日龄,并与日本动物繁殖研究所的原种作了比较。结果表明引种鼠的生长发育情况良好。雌鼠4～10周龄,雄鼠6～12周龄的每周平均增重量与原种的同期相比均... 着重观察了引种的Wistar—Imamichi大鼠育成期的生长发育情况及4日稳定性周期的出现日龄,并与日本动物繁殖研究所的原种作了比较。结果表明引种鼠的生长发育情况良好。雌鼠4～10周龄,雄鼠6～12周龄的每周平均增重量与原种的同期相比均无显著差异;雌鼠的4日稳定性周期出现於39～55日龄,其中70%(14/20)分布於40～50日龄之间。与原种相同时期的93.3%(14/15)相比无显著差异。 展开更多

关键词 引种 保种 性周期

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屠宰母牛卵巢卵母细胞体外受精与发育的研究 被引量：24

3

作者 旭日干 张锁链 +2 位作者 薛晓先 海青兰 廛洪武 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期193-198,共6页

将从屠宰母牛卵巢采得的卵母细胞用含有LH或hCG的M199培养24～26小时,然后用经钙离子载体Ionophore A23187诱导获能的牛新鲜或冷冻精子进行授精处理。授精6～7小时后再用含有乳酸钠和EDTA的M199培养至48～60小时后观察受精及受精卵的发... 将从屠宰母牛卵巢采得的卵母细胞用含有LH或hCG的M199培养24～26小时,然后用经钙离子载体Ionophore A23187诱导获能的牛新鲜或冷冻精子进行授精处理。授精6～7小时后再用含有乳酸钠和EDTA的M199培养至48～60小时后观察受精及受精卵的发育情况。结果表明,卵子的受精率及受精卵的发育率与卵母细胞成熟用培养基、授精用精子(新鲜或冷冻)以及供卵牛的品种均有关系。将用含有hCG的M199培养成熟的卵子,以获能处理过的新鲜精子授精后,其受精率和受精卵子中单精子受精并发育为2～8细胞期胚的比率在蒙古牛为91.4％(265/200)和19.6％(52/265),在黑白花奶牛为69.7％(62/89)和4.8％(3/62)。 展开更多

关键词 母牛 卵母细胞 体处受精 发育率

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蔗糖、牛血清白蛋白和锌离子对白绒山羊精液冷冻效果的影响 被引量：15

4

作者 牧人 张锁链 +3 位作者 王建国 阎文龙 徐振军 旭日干 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期120-125,共6页

在传统的甘油—卵黄—柠檬酸盐稀释液的基础上，Ｂ液内分别添加了３种浓度的蔗糖、牛血清白蛋白（ＢＳＡ）、锌离子进行分析比较。结果表明，添加蔗糖的保护液较传统的保护液能更有效地冻存精液，１００ｍＭ组精子活力显著提高（Ｐ＜０... 在传统的甘油—卵黄—柠檬酸盐稀释液的基础上，Ｂ液内分别添加了３种浓度的蔗糖、牛血清白蛋白（ＢＳＡ）、锌离子进行分析比较。结果表明，添加蔗糖的保护液较传统的保护液能更有效地冻存精液，１００ｍＭ组精子活力显著提高（Ｐ＜０．０５）。ＢＳＡ和锌离子对精液冻存无显著影响（Ｐ＞０．０５），但都具有一定的保护作用。改良稀释液的精子活力比传统稀释液的提高３２．７％（Ｐ＜０．０１）。细管精液的冻存效果显著高于颗粒精液（Ｐ＜０．０５）。用最佳组合的细管精液对１２５只母羊进行人工授精，情期受胎率为６３．１％。 展开更多

关键词 山羊 蔗糖 牛血清白蛋白 锌离子 冷冻精液

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脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化 被引量：23

5

作者 李扬 吴凯峰 +2 位作者 郭旭东 郭继彤 旭日干 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期653-655,共3页

通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(... 通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加,延长细胞暴露时间反而使转染效率下降,转染细胞数适当才能得到较高的转化率。 展开更多

关键词 脂质体介导 外源基因体外转染 牛胎儿成纤维细胞 优化 绿色荧光蛋白 转染条件

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牛卵母细胞皮层颗粒荧光染色法质成熟鉴定 被引量：21

6

作者 李荣凤 薛晓先 +1 位作者 刘哲 旭日干 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期203-210,共8页

以皮层颗粒 (CG)单层分布于质膜下做为卵母细胞质成熟的指标 ,利用CG荧光染色法 ,研究了不同类型牛卵母细胞的质成熟情况。结果表明 :(1)采自直径大于 5mm、2～ 5mm和小于 2mm卵泡的卵母细胞 ,成熟培养前的质成熟率分别为 4 2 %、1 8%... 以皮层颗粒 (CG)单层分布于质膜下做为卵母细胞质成熟的指标 ,利用CG荧光染色法 ,研究了不同类型牛卵母细胞的质成熟情况。结果表明 :(1)采自直径大于 5mm、2～ 5mm和小于 2mm卵泡的卵母细胞 ,成熟培养前的质成熟率分别为 4 2 %、1 8%和 0 ,三者间无显著差异。但所有的大卵泡卵以及 95 2 %的中卵泡卵 ,CG已分布于皮层 ,而小卵泡卵中则有 51 7%的卵子 ,CG尚未迁移至皮质区 ,仍以簇的形式分布于细胞质的中间。经 2 4h成熟培养后 ,三类卵子的质成熟率分别达到 54 5%、2 8 6 %、和 7 1% ,三者间存在显著差异 (P <0 0 5)。小卵泡卵内的CG趋向于聚集成更大的簇 ,并向皮质区迁移。 (2 )根据卵丘细胞情况而分的四类卵母细胞 :A(带有 5层以上致密卵丘细胞 )、B(带有 3～ 5层致密卵丘细胞 )、C(裸卵或半裸卵 )和D(卵丘细胞已扩散成蜘蛛网状 ) ,成熟培养前的质成熟率分别为 4 3%、0、0和 2 8 0 % ,第四者显著高于前三者 (P <0 0 1)。成熟培养后 ,A、B类卵子的质成熟率 (2 3 1%和 10 8% )显著低于D类卵子 (88 2 % ) (P <0 0 1)。裸卵表现为完全缺乏CG或形态异常。 (3)采卵结果表明 ,大、中、小卵泡卵中 ,A类卵子所占的比例依次减少 (97 7%、56 3%和 18 4 % ) ,B类卵子依次增多 (2 3%、36 6 %和 52 0 % )。 展开更多

关键词 皮层颗粒 牛卵母细胞 质成熟 荧光染色法

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通过体外受精技术缩短绒山羊育种周期的研究 被引量：5

7

作者 张锁链 刘东军 +4 位作者 王建国 廛洪武 何牧人 闫文龙 旭日干 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第2期95-98,共4页

本研究以羔羊卵巢母细胞为材料,把体外受精技术应用到绒山羊育种工作中,观察了羔羊体外受精卵的体外发育及移植产羔的效果,以便探讨通过体外受精技术缩短绒山羊育种周期的技术途径。对406 枚羔羊体外受精卵用M199 + hcG、M199 + LH 和M1... 本研究以羔羊卵巢母细胞为材料,把体外受精技术应用到绒山羊育种工作中,观察了羔羊体外受精卵的体外发育及移植产羔的效果,以便探讨通过体外受精技术缩短绒山羊育种周期的技术途径。对406 枚羔羊体外受精卵用M199 + hcG、M199 + LH 和M199 + hcG+ EGF三种培养基进行体外发育培养。结果是,2～4 细胞期胚的发育率平均分别为40-0 % 、43-6 % 和49-6 % ;桑椹胚和囊胚的发育率平均分别为17-5 % 、15-8 % 和18-8 % 。将49 枚F1 代羔羊2～8 细胞期胚移植给31 只受体母羊,结果有11 只妊娠(35-5 % ) 并产羔12 只(F2 代) ;将24 枚F2 代羔羊2～4 细胞期胚移植给15 只受体母羊,结果有2 只妊娠(13-3 % ) 并产F3 代羔羊2 只。 展开更多

关键词 羔羊 育种周期 绒山羊 体外受精卵 细胞期 母羊 体外发育 移植 受体 EGF

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不同超数排卵方法所获羔山羊卵母细胞体外成熟率及体外受精率的比较 被引量：10

8

作者 刘东军 张锁链 +4 位作者 王建国 何牧仁 阎文龙 张润武 旭日干 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 1996年第5期422-427,共6页

本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋Ｌ... 本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋ＬＨ（肌肉注射）三种方法进行超排处理，平均分别回收１６．０、２０．３和１５．０枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行２０～２４ｈ的成熟培养后，其成熟率分别为４５．５％，４４．４％和７６．５％。成熟卵母细胞经体外受精，体外发育培养后其２～４细胞胚胎的发生率分别为５．６％ａ、６．７％和３１．７％ｂ（ｂ，ｖｓ，ａ，Ｐ＜０．０５）。将９枚２～４细胞期胚胎移植给６只受体母羊，结果有２只妊娠并产羔２只。 展开更多

关键词 超数排卵 体外成熟 体外受精 胚胎移植 山羊

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屠宰绵羊卵巢卵母细胞的体外培养 被引量：9

9

作者 旭日干 薛晓先 (?)洪武 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期13-17,共5页

为了使屠宰绵羊卵巢卵母细胞能够用于体外受精,本文着重探索了使卵巢卵母细胞体外培养成熟的方法和条件。实验结果表明,以TCM-199加10％FCS作为基本培养基,培养24～25小时,可以使绵羊卵巢卵母细胞培养成熟,其成熟率可达55.5％(435/784)... 为了使屠宰绵羊卵巢卵母细胞能够用于体外受精,本文着重探索了使卵巢卵母细胞体外培养成熟的方法和条件。实验结果表明,以TCM-199加10％FCS作为基本培养基,培养24～25小时,可以使绵羊卵巢卵母细胞培养成熟,其成熟率可达55.5％(435/784)。如果在培养液内添加hCG(0.02mg/ml)或LH(0.01mg/ml),并且尽可能保持卵丘细胞的完整,则可以使成熟率提高到76.9％(140/182)～82.9％(112/135)。 展开更多

关键词 卵巢卵母细胞 体外培养 成熟率

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白绒山羊的超数排卵及胚胎移植 被引量：7

10

作者 张锁链 刘东军 +4 位作者 王建国 廛洪武 海青兰 斯琴 旭日干 《草食家畜》 1992年第S1期62-65,共4页

本文以PMSG(两种不同剂量)、PMSG-hCG和FSH-LH(两种不同剂量组合)共五种不同处理方法对46只白绒山羊进行超排处理。结果共排卵638枚(平均每只羊13.9枚),回收352枚(平均每只7.7枚)。其中用FSH-LH处理的两个组即连续3天,每天早晚两次,每... 本文以PMSG(两种不同剂量)、PMSG-hCG和FSH-LH(两种不同剂量组合)共五种不同处理方法对46只白绒山羊进行超排处理。结果共排卵638枚(平均每只羊13.9枚),回收352枚(平均每只7.7枚)。其中用FSH-LH处理的两个组即连续3天,每天早晚两次,每次注射30国际单位FSH的方法Ⅰ和连续4天分别注射40、70、30、20国际单位FSH的方法Ⅱ效果最好,每只羊的平均排卵数和胚胎回收率分别为16.8,61.7%和18.1,67.7%。将146枚胚胎移植给90只受体羊,结果有69只妊娠,妊娠率为76.7%。其中将2-8细胞胚移植到受体羊输卵管的处理组效果最好,妊娠率达75.0％—100％。 展开更多

关键词 白绒山羊 超数排卵 胚胎移植

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山羊超数排卵及鲜胚移植研究 被引量：2

11

作者 闫文龙 张锁链 王建国 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第12期53-55,共3页

采用FSH(促卵泡素 )结合LH(促黄体素 ) ,以 2种组合分别对 1 9只和 1 4只两组供体山羊进行超排处理 ,得到 541枚的排卵结果 ,共回收胚胎 41 1枚 ,受精卵数为 32 0枚。 2种处理方法分别平均取得了 1 8.4枚和 1 3 .6枚的排卵结果 (p <0... 采用FSH(促卵泡素 )结合LH(促黄体素 ) ,以 2种组合分别对 1 9只和 1 4只两组供体山羊进行超排处理 ,得到 541枚的排卵结果 ,共回收胚胎 41 1枚 ,受精卵数为 32 0枚。 2种处理方法分别平均取得了 1 8.4枚和 1 3 .6枚的排卵结果 (p <0 .0 5)。将 32 0枚受精卵中的 1 92枚2 ,4和 8细胞胚胎通过手术法分别移植到 96只受体山羊输卵管内 ,每只受体移植 2枚胚胎 ,3种胚龄的胚胎移植后的妊娠率分别为 68.4% ,74.1 %和 84.0 % (p >0 .0 5)。 展开更多

关键词 山羊 超数排卵 鲜胚移植 妊娠率

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DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR对AID基因修饰的牛胎儿成纤维细胞的作用 被引量：1

12

作者 奥旭东 萨如拉 +2 位作者 王杰 王会敏 于海泉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期103-112,共10页

以转AID基因细胞和AID基因敲减细胞为研究对象,旨在探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对其细胞形态、细胞周期、相关基因表达及其基因启动子区甲基化状态变化的影响。此外,还分析了整体基因组去甲基化和... 以转AID基因细胞和AID基因敲减细胞为研究对象,旨在探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对其细胞形态、细胞周期、相关基因表达及其基因启动子区甲基化状态变化的影响。此外,还分析了整体基因组去甲基化和位点特异性去甲基化之间存在的差别,探讨提高体细胞重编程效率的方法及其作用机制。通过Real-time PCR、BSP(Bisulfite Sequencing PCR)、Western blotting和流式细胞术等技术分析了5-Aza-CdR对转AID基因细胞和AID基因敲减细胞的影响。结果表明,5-Aza-CdR对转AID基因细胞的影响存在明显的剂量效应,浓度为4μmol/L时,具有明显的细胞毒性,大量细胞死亡(P<0.05)。当使用处理浓度为1-3μmol/L时,细胞形态发生改变,细胞增殖被抑制。核型分析显示,3μmol/L浓度组处理就可以导致转AID基因细胞出现异常核型。使用1μmol/L浓度处理细胞,明显增加了表达报告基因细胞的数量,细胞AID和SOX2的表达量都有所提高,并且SOX2基因启动子区的DNA甲基化水平也有所下降。5-Aza-CdR处理AID基因敲减细胞后,OCT4和SOX2的表达量较对照组明显升高,而NANOG却没有发生变化。结果显示,5-Aza-CdR处理转AID基因细胞可改变细胞形态、细胞周期和报告基因的表达,5-Aza-CdR处理后基因组整体去甲基化和AID基因的位点特异性去甲基化协同作用于体细胞重编程。 展开更多

关键词 5-AZA-CDR AID基因 DNA去甲基化 体细胞核移植

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牛早期胚胎发育中AID基因的表达及其调节区DNA甲基化的动态变化 被引量：1

13

作者 奥旭东 萨如拉 +2 位作者 王杰 王会敏 于海泉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期242-249,共8页

以具有DNA主动去甲基化作用的活化诱导胞苷脱氨酶(Activation-induced cytidine deaminase,AID,亦称为AICDA)基因为研究对象,检测其在牛卵母细胞及体外受精胚胎发育不同阶段的表达变化及其调节方式,揭示细胞重编程分子机制。应用Real-ti... 以具有DNA主动去甲基化作用的活化诱导胞苷脱氨酶(Activation-induced cytidine deaminase,AID,亦称为AICDA)基因为研究对象,检测其在牛卵母细胞及体外受精胚胎发育不同阶段的表达变化及其调节方式,揭示细胞重编程分子机制。应用Real-time PCR、BSP(Bisulfite Sequencing PCR)和免疫荧光化学等方法分析DNA甲基化对牛早期胚胎发育中AID基因表达的影响。结果显示,AID基因在牛早期胚胎发育中受DNA甲基化的调控,AID基因的T-DMR(tissue-dependent and differentially methylated region)位于其转录起始位点-88 bp--431 bp。在牛卵母细胞成熟过程中,T-DMR第2和第3号Cp G位点的DNA甲基化明显去除,而其他位点都未发生变化。卵母细胞在成熟过程中AID基因的积累与DNA甲基化状态变化相关。在牛体外受精胚发育早期的各阶段,尽管AID基因的表达不同,但AID基因T-DMR除第2和第3号CpG位点一直都维持去甲基化状态外,其他位点始终维持甲基化状态。推测其表达的变化可能是胚胎基因组激活有关。以上研究表明,AID基因T-DMR的低甲基化与其表达存在一定的相关性。通过免疫荧光检测发现,从卵母细胞成熟期到桑椹胚期,AID蛋白都是均匀分布于细胞核和细胞质中。而囊胚时期大量AID蛋白集中于内细胞团,这可能对于内细胞团多能性的维持起重要作用。综上所述,牛卵母细胞成熟中积累的AID作用于受精过程,其启动子区的DNA去甲基化与AID基因的表达有关,胚胎基因组激活后AID基因的表达可能与胚胎发育有关。 展开更多

关键词 AID基因 牛体外受精胚胎 DNA甲基化

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位点特异整合酶φC31的作用机制及应用 被引量：1

14

作者 上官陶 朱其军 +3 位作者 孙涛 李光鹏 仲跻峰 何洪彬 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第6期47-51,共5页

链霉菌噬菌体φC31整合酶是一种位点特异整合酶(Site-specific recombinase,SSR),其能够精确并单向的促进attP位点与attB位点的重组,是继Cre/Loxp、FLP之后又一个倍受关注的位点特异整合酶,该整合酶已经成为基因治疗、转基因研究等领域... 链霉菌噬菌体φC31整合酶是一种位点特异整合酶(Site-specific recombinase,SSR),其能够精确并单向的促进attP位点与attB位点的重组,是继Cre/Loxp、FLP之后又一个倍受关注的位点特异整合酶,该整合酶已经成为基因治疗、转基因研究等领域的常用技术手段。现对φC31位点特异性整合酶的作用机制、整合位点及其在转基因和基因治疗中的应用进行了综述,并对其发展前景进行了展望。 展开更多

关键词 ΦC31整合酶 位点特异性整合 转基因 基因治疗

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Wistar-Imamichi大鼠的引种、保种与扩大繁殖的研究 Ⅱ.引入种鼠一年来的繁殖情况观察 被引量：1

15

作者 旭日干 张锁链 薛晓先 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第Z1期7-10,共4页

本文对引入的良种实验动物W—Ⅰ大鼠一年来的繁殖情况进行了系统观察,结果表明:引入种鼠由25只增殖为3336只,已形成了具有一定规模的基础群,并在受胎率、分娩率、平均产仔数以及仔鼠性比和离乳仔数的平均体重等重要繁殖指标方面的均与... 本文对引入的良种实验动物W—Ⅰ大鼠一年来的繁殖情况进行了系统观察,结果表明:引入种鼠由25只增殖为3336只,已形成了具有一定规模的基础群,并在受胎率、分娩率、平均产仔数以及仔鼠性比和离乳仔数的平均体重等重要繁殖指标方面的均与原种资料保持一致。引入后的W—Ⅰ大鼠,在扩大繁殖的现阶段基本保持原种的繁殖力强,产仔数多的生殖生物学特性。 展开更多

关键词 受胎率 平均产仔数 离乳率

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昆明小鼠体外受精胚冷冻保存的研究 被引量：1

16

作者 刘东军 旭日干 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第Z1期35-40,共6页

在PBS+20%FCS+0.5mol/L蔗糖中加2.0和3.0mol/L甘油组的胚胎发育率分别为51.4%和44.4%,冷冻效果明显好于其它浓度甘油;在PBS+20%FCS十2.0mol/L甘油中,加0.5mol/L蔗糖组的胚胎发育率为47.7%,冷冻效果好于其它浓度蔗糖;慢速降温冷冻组的胚... 在PBS+20%FCS+0.5mol/L蔗糖中加2.0和3.0mol/L甘油组的胚胎发育率分别为51.4%和44.4%,冷冻效果明显好于其它浓度甘油;在PBS+20%FCS十2.0mol/L甘油中,加0.5mol/L蔗糖组的胚胎发育率为47.7%,冷冻效果好于其它浓度蔗糖;慢速降温冷冻组的胚胎发育率为48.8%,效果明显好于快速冷冻法;在各期胚胎冷冻后的发育率中,2细胞胚最低,桑椹胚的存活率明显高于4细胞胚和早期囊胚;冷冻保存后体外受精胚的发育率显著低于体内受精胚:112枚经冷冻保存的体外受精胚移植给受体鼠,2/9妊娠。 展开更多

关键词 昆明小鼠 体外受精 冷冻保存 胚胎移植

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应用RNAi干扰eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中FGF5基因的表达

17

作者 宝明涛 郭旭东 旭日干 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第5期785-787,共3页

在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316～335bp区域、第499～518bp区域和第766～785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿... 在小鼠FGF5基因干扰的研究中,针对小鼠FGF5mRNA的第316～335bp区域、第499～518bp区域和第766～785bp区域分别设计了发夹式RNA干扰片段,并将干扰片段连接到带有H1启动子的红色荧光表达载体上,将载体以脂质体法转染到eGFP转基因小鼠胎儿成纤维细胞中,搜集转染后的细胞提取总RNA,并反转录成cDNA。用SYBRGREENⅠ荧光定量PCR方法对转染了不同干扰载体的细胞cDNA进行检测,结果干扰载体对eGFP转基因小鼠成纤维细胞中的FGF5表达有较强的抑制作用。 展开更多

关键词 RNAI SHRNA SYBR GREEN Ⅰ荧光定量PCR FGF5

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microRNA-483和microRNA-486在克隆和转fat-1基因牛组织中的表达

18

作者 吕洋 王煜 +2 位作者 孙佳佳 弓春玲 李光鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期105-108,共4页

利用荧光定量PCR比较正常受精牛、克隆牛和转基因牛的心、肝、脾、肺、肾、胎盘、子叶、子宫内膜中miR-483和miR-486的表达水平。结果显示,miR-483和miR-486在正常受精牛、克隆牛和转fat-1基因牛的组织中均有表达,其中在心脏中表达量显... 利用荧光定量PCR比较正常受精牛、克隆牛和转基因牛的心、肝、脾、肺、肾、胎盘、子叶、子宫内膜中miR-483和miR-486的表达水平。结果显示,miR-483和miR-486在正常受精牛、克隆牛和转fat-1基因牛的组织中均有表达,其中在心脏中表达量显著高于其他组织。而转fat-1基因牛心脏中miR-483和miR-486表达量均低于正常牛。miR-483和miR-486在不同组织中表达量存在一定差异,在心脏中呈现高表达,提示miR-483和miR-486表达降低可能与心肌肥大、心肌梗死等病理生理过程有关。 展开更多

关键词 miR-483 miR-486 转基因牛 心脏

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日本大耳白兔跛行的诊断与防治

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作者 王建国 张锁链 旭日干 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第2期60-61,共2页

跛行是动物四肢机能碍障的综合症状。引起跛行的原因很多,如物理因素、化学因素和生物学因素等,其诊断比较困难,必须注意鉴别。本中心饲养的日本大耳白兔于1988年9月至1989年3月,新生幼兔出产箱后1～2周,不断有跛行症状发生,发病率为36... 跛行是动物四肢机能碍障的综合症状。引起跛行的原因很多,如物理因素、化学因素和生物学因素等,其诊断比较困难,必须注意鉴别。本中心饲养的日本大耳白兔于1988年9月至1989年3月,新生幼兔出产箱后1～2周,不断有跛行症状发生,发病率为36.7%。病理变化为四肢骨骼扭曲变形,前肢肘关节、后肢膝关节和附关节变形变大,活动不灵。另外。 展开更多

关键词 日本大耳白兔 跛行症 幼兔 四肢骨骼 综合症状 关节变形 生物学因素 常规饲料 临床症状 物理因素

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小鼠嵌合体制作技术的研究

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作者 张锁链 旭日干 斯琴 《中国比较医学杂志》 CAS 1991年第1期63-63,共1页

本文着重探索了能够使同品系或不同品系小鼠间8细胞胚胎聚合为一体并发育为桑椹胚、囊胚的有效方法和培养条件。方法是将采自昆明白和C₅₇品系小鼠的8细胞胚胎,在含有0.5%链霉蛋白酶的PBS溶液中进行去透明带处理... 本文着重探索了能够使同品系或不同品系小鼠间8细胞胚胎聚合为一体并发育为桑椹胚、囊胚的有效方法和培养条件。方法是将采自昆明白和C₅₇品系小鼠的8细胞胚胎,在含有0.5%链霉蛋白酶的PBS溶液中进行去透明带处理后,用植物血球凝集素P（PHAP）为接合剂,以1+1的组合在V型塑料多孔板的孔底达到聚合。聚合胚培养于液体石蜡油覆盖下的培养液微小滴中,在37℃、5%CO₂的培养箱内培养20～24h,以桑椹胚或囊胚的发育率为指标,比较三种不同的培养基即PBS+FCS。BWW和BMOC-Ⅲ对嵌合胚发育的影响。其结果是,在昆明白←→C₅₇聚合胚中分别有88.1%（59/67）,95.0%（115/121）和94.8%（73/77）,在昆明白←→昆明白中分别有93.3%（28/30）,87.7%（121/138）和86. 展开更多

关键词 嵌合体 透明带 液体石蜡油 植物血球凝集素 桑椹胚 发育率 链霉蛋白酶 胚泡期 培养箱 多孔板

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