期刊文献+
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
内蒙古绒山羊原始生殖细胞(PGCs)的培养与鉴定 被引量:1
1
作者 刘羿羿 赵丽霞 +2 位作者 李燕 白俊 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期92-96,共5页
本试验从内蒙古白绒山羊胎儿的生殖嵴中分离出原始生殖细胞体外培养并进行了鉴定。为建立内蒙古绒山羊原始生殖细胞(pri mordial germcells,PGCs)的培养体系,试验对比了A、B、C3组不同的培养条件对内蒙古绒山羊原始生殖细胞传代数的影响... 本试验从内蒙古白绒山羊胎儿的生殖嵴中分离出原始生殖细胞体外培养并进行了鉴定。为建立内蒙古绒山羊原始生殖细胞(pri mordial germcells,PGCs)的培养体系,试验对比了A、B、C3组不同的培养条件对内蒙古绒山羊原始生殖细胞传代数的影响。RT-PCR鉴定结果表明,β-actin、hTERT、GAPDH、Nanog、Oct3/4为阳性、AKP染色为阳性;免疫荧光检测胚胎干细胞特异标志物Oct3/4、SSEA-3、SSEA-4呈阳性。未添加任何因子的A培养体系仅能传1代,添加LIF及Insulin的B培养体系可以传至4代,添加LIF、Insulin及优质胎牛血清的C组培养体系可以传至9代。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 Oct3/4 免疫荧光 NANOG
在线阅读 下载PDF
内蒙古绒山羊皮肤毛囊差异表达序列标签的筛选及分析
2
作者 苏立宁 李华 +1 位作者 刘东军 旭日干 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1499-1503,共5页
旨在筛选和分析内蒙古绒山羊与毛和绒生长相关的差异基因,本研究采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)研究内蒙古绒山羊胎儿期不同日龄皮肤中控制初级毛囊和次级毛囊不同分化的差异表达序列标签。结果,共筛选了15条差异表达序列标签(dbEST登... 旨在筛选和分析内蒙古绒山羊与毛和绒生长相关的差异基因,本研究采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)研究内蒙古绒山羊胎儿期不同日龄皮肤中控制初级毛囊和次级毛囊不同分化的差异表达序列标签。结果,共筛选了15条差异表达序列标签(dbEST登录号JK711022-JK711036),其中3条ESTs与毛囊发育有关,5条ES-Ts与次级毛囊和皮脂腺的发育有关。生物信息分析显示,JK711036与甲状腺激素受体相互作用蛋白12(TRIP12)基因有关,其他ESTs功能未知。结果表明,胎儿期初级毛囊和次级毛囊在多种代谢途径上都存在差异表达的基因,这将为进一步研究山羊毛和绒的形成分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 绒山羊 毛囊 DDRT-PCR 表达序列标签
在线阅读 下载PDF
同期发情及内窥镜输精技术在肉羊生产中的推广应用 被引量:1
3
作者 焦泽华 王建国 +2 位作者 王小卫 莫德日乐吐 于险峰 《中国草食动物科学》 CAS 2012年第S1期278-280,共3页
为促进同期发情及腹腔内窥镜输精技术在肉羊产业中的推广应用,达到一年两产或两年三产的目的,进而改变肉羊产业的生产方式及经济结构,在繁殖及非繁殖季节对内蒙古地区本地杂交羊进行同期发情及腹腔内窥镜输精处理。繁殖季节与非繁殖季... 为促进同期发情及腹腔内窥镜输精技术在肉羊产业中的推广应用,达到一年两产或两年三产的目的,进而改变肉羊产业的生产方式及经济结构,在繁殖及非繁殖季节对内蒙古地区本地杂交羊进行同期发情及腹腔内窥镜输精处理。繁殖季节与非繁殖季节的发情率均为93%以上,差异不显著(P>0.05)。部分具有小尾寒羊血统的杂交羊同期发情处理后的第6天手术检查黄体,统计排卵率2.45个,只和1.68个,只。但是腹腔内窥镜输精的受胎率显著高于人工授精的受胎率。 展开更多
关键词 同期发情 内窥镜输精 推广应用
在线阅读 下载PDF
IGF-1毛囊特异表达载体的构建以及转染绒山羊胎儿成纤维细胞的研究 被引量:13
4
作者 郭旭东 尹俊 +3 位作者 杨东山 毛舒燕 宝明涛 旭日干 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1460-1467,共8页
本研究旨在构建绵羊胰岛素样生长因子l(IGF-1)毛囊特异表达载体pCDsR-KI,并转染绒山羊胎儿成纤维细胞,最终获得稳定表达红色荧光并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过RT-PCR方法获得IGF-1 cDNA,其与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光... 本研究旨在构建绵羊胰岛素样生长因子l(IGF-1)毛囊特异表达载体pCDsR-KI,并转染绒山羊胎儿成纤维细胞,最终获得稳定表达红色荧光并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过RT-PCR方法获得IGF-1 cDNA,其与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成IGF-1毛囊特异表达载体pCDsR-KI(大小7.4 kb)。以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以lipofectamineTM2000介导转染所培养的第2代成纤维细胞,在DMEM/F12+10%FBS、37℃、5%CO2中培养,并添加G418筛选,获得了表达红色荧光蛋白的细胞克隆。经PCR法鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中。通过分析转基因体细胞的生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数趋于正常。为下一步通过体细胞核移植技术获得转基因克隆绒山羊准备了核供体细胞。 展开更多
关键词 绒山羊 胰岛素样生长因子l 红色荧光蛋白 毛囊细胞 胎儿成纤维细胞
在线阅读 下载PDF
脱氧胆酸处理对大鼠肌肉卫星细胞的影响 被引量:1
5
作者 焦泽华 段彪 +2 位作者 白春玲 魏著英 李光鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期39-42,共4页
肌肉卫星细胞是组织特异性干细胞,负责骨骼肌的生长和再生。尽管卫星细胞的发现已有50多年的历史,但肌肉卫星细胞的维持培养仍是一个难以解决的问题。本研究使用脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)处理肌肉卫星细胞,结果发现,50μmol/L脱... 肌肉卫星细胞是组织特异性干细胞,负责骨骼肌的生长和再生。尽管卫星细胞的发现已有50多年的历史,但肌肉卫星细胞的维持培养仍是一个难以解决的问题。本研究使用脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)处理肌肉卫星细胞,结果发现,50μmol/L脱氧胆酸能显著促进肌肉卫星细胞的增殖。Western blotting检测发现50μmol/L DCA能促进细胞内β-catenin表达水平的持续增加。处理6 d后的细胞仍然保持着肌肉卫星细胞的成肌能力。 展开更多
关键词 脱氧胆酸(DCA) 大鼠 卫星细胞
在线阅读 下载PDF
山羊胚胎体外培养条件的优化 被引量:1
6
作者 刘羿羿 赵高平 +4 位作者 李燕 白俊 王申元 巴特尔 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期146-149,共4页
为优化山羊胚胎体外培养条件,本试验比较了含有3种不同来源血清(优质胎牛血清、发情山羊血清、前列腺素(PG)处理后发情山羊血清)的M199对卵母细胞成熟效果的影响,成熟率分别为65.95%、49.2%、76.47%,差异极显著(P<0.01);本试验还分... 为优化山羊胚胎体外培养条件,本试验比较了含有3种不同来源血清(优质胎牛血清、发情山羊血清、前列腺素(PG)处理后发情山羊血清)的M199对卵母细胞成熟效果的影响,成熟率分别为65.95%、49.2%、76.47%,差异极显著(P<0.01);本试验还分别采用了SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞共培养,以及改进的DMEM/F12发育体系培养受精卵,结果发现,SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞的发育培养系统得到的囊胚率为29.62%、24.73%,差异不显著(P>0.05),改进的DMEM/F12发育液囊胚率最高为48.42%,差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 发情山羊血清 囊胚率 输卵管上皮细胞
在线阅读 下载PDF
小鼠超高硫角蛋白基因启动子的分子克隆及序列分析 被引量:1
7
作者 郭旭东 侯冬霞 +1 位作者 毛舒燕 旭日干 《科技通报》 2007年第4期479-482,486,共5页
根据小鼠超高硫角蛋白(UHS)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以小鼠全血提取的总DNA为模板,PCR扩增出688bp的特异性片段,连接到pMD19T载体中获得该片段克隆p19TU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS... 根据小鼠超高硫角蛋白(UHS)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以小鼠全血提取的总DNA为模板,PCR扩增出688bp的特异性片段,连接到pMD19T载体中获得该片段克隆p19TU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS基因5'端的调控区序列。序列分析结果也表明该克隆片段与原基因调控序列相比具有很高的一致性。研究结果为今后制备转基因克隆动物、在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠超高硫角蛋白基因 调控区 PCR 序列分析
在线阅读 下载PDF
牛体外受精胚胎早期发育过程中基因差异表达的研究 被引量:1
8
作者 陈苏仁 张鑫 +2 位作者 栗雪冰 仓明 刘东军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期816-822,共7页
本研究旨在筛选牛体外受精胚胎早期发育差异表达基因,并进行差异表达分析。选取牛卵母细胞、体外受精8细胞期和囊胚期胚胎为试验材料,进行mRNA差异表达研究。初步克隆出4个牛卵母细胞和早期胚胎发育不同阶段差异表达的基因,同源性分析显... 本研究旨在筛选牛体外受精胚胎早期发育差异表达基因,并进行差异表达分析。选取牛卵母细胞、体外受精8细胞期和囊胚期胚胎为试验材料,进行mRNA差异表达研究。初步克隆出4个牛卵母细胞和早期胚胎发育不同阶段差异表达的基因,同源性分析显示,它们分别与高移动样蛋白盒结构域4基因(HMGXB4)、热休克蛋白40亚家族C成员8基因(Dnajc8)、突触膜胞吐调节2基因(RI MS2)和核糖体蛋白L31基因(RPL31)高度同源。RT-PCR检测验证,HMGXB4、Dnajc8、RI MS2和RPL31在牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中mRNA表达量存在时间性差异,可能与其参与不同的生理活动有关。 展开更多
关键词 早期胚胎 MRNA差异显示 基因表达
在线阅读 下载PDF
绵羊Gfrα1基因的部分cDNA克隆与抗原表位多肽的原核表达
9
作者 刘燕 罗奋华 +3 位作者 包佳婧 刘林洪 单飞彪 吴应积 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1377-1384,共8页
旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列,深入研究绵羊精原干细胞(SSCs)。本研究通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段。结果,克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312bp,包括1 311bp的开放阅读框(OR... 旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列,深入研究绵羊精原干细胞(SSCs)。本研究通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段。结果,克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312bp,包括1 311bp的开放阅读框(ORF),编码437个氨基酸,与牛、人、黑猩猩、大鼠和小鼠相应核苷酸序列的同源性分别为98.5%、91.3%、91.0%、88.9%和88.0%。根据获得的cDNA序列,预测已知片段的抗原表位区,并将抗原表位区序列插入pET-44a(+)载体,经转化得到重组菌,经IPTG诱导表达,并通过亲和柱层析,纯化制备GFRα1抗原表位多肽。Western blot检测发现,经诱导表达的GFRα1抗原表位多肽约为18.2ku,与预测的大小一致。绵羊Gfrα1基因的克隆和表达研究,为进一步制作该基因的多克隆抗体奠定基础,为绵羊SSCs的分子水平鉴定及功能分析提供了研究条件。 展开更多
关键词 绵羊 Gfral基因 克隆 序列分析 原核表达
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部