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miR-127-3p靶向MAPK4对肝癌HepG2细胞株生物学特性的影响 被引量:9
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作者 张玉蓉 贾俊枝 +1 位作者 徐国明 郭红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1330-1337,共8页
目的:探究miR-127-3p与MAPK4的靶向关系及其对肝癌HepG2细胞生长转移能力的影响。方法:生物信息预测miR-127-3p与MAPK4间靶向关系,荧光素酶实验验证,qRT-PCR检测两者在肝细胞中的基因表达。miR-127-3p mimic及pcDNA-MAPK4(pc-MAPK4)分... 目的:探究miR-127-3p与MAPK4的靶向关系及其对肝癌HepG2细胞生长转移能力的影响。方法:生物信息预测miR-127-3p与MAPK4间靶向关系,荧光素酶实验验证,qRT-PCR检测两者在肝细胞中的基因表达。miR-127-3p mimic及pcDNA-MAPK4(pc-MAPK4)分别或同时转染HepG2细胞,qRT-PCR检测miR-127-3p表达,BrdU及Hoechst检测细胞增殖及凋亡,Transwell及划痕实验检测侵袭及迁移,Western blot(WB)检测Ki67、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、MMP-9、VEGF、MAPK4、MAPKAPK5、HSPB1表达。miR-127-3p mimic转染HepG2细胞后,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录肿瘤体积,免疫组化及Tunel检测其增殖凋亡水平,WB检测MMP-9及MAPKAPK5表达。结果:与HL-7702比较,HepG2中miR-127-3p表达下调而MAPK4上调。HepG2中,miR-127-3p mimic上调miR-127-3p并下调MAPK4表达及MAPK4 wt荧光素酶活性,pc-MAPK4上调MAPK4并减弱miR-127-3p mimic的作用;miR-127-3p mimic减少BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,增加凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,pc-MAPK4增加BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,减少凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,减弱miR-127-3p mimic的抑增殖促凋亡作用;miR-127-3p mimic减少侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达,pc-MAPK4增加侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达并减弱miR-127-3p mimic的抗侵袭迁移作用;miR-127-3p mimic降低MAPKAPK5及HSPB1磷酸化比值,pc-MAPK4升高其比值并减弱miR-127-3p mimic的影响。miR-127-3p mimic减小HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤体积,减少组织中Ki67阳性细胞、MMP-9表达及MAPKAPK5磷酸化比值并增加凋亡细胞。结论:miR-127-3p靶向MAPK4可抑制肝癌HepG2细胞生长及转移。 展开更多
关键词 miR-127-3p MAPK4 肝癌HEPG2细胞 生长转移
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蒲公英提取物对吸入性肺损伤新生大鼠的保护作用 被引量:5
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作者 张建锋 时艳华 +3 位作者 王献红 李建华 张洪杰 张玉蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期2991-2995,共5页
目的:研究蒲公英提取物对吸入性肺损伤新生大鼠的保护作用。方法:采用随机数字表法将大鼠随机分为4组:空白对照组(Control)、模型组(Model)、地塞米松组(DEX)和蒲公英提取物组(Dandelion)进行后续实验;苏木素-伊红和Masson染色检测肺组... 目的:研究蒲公英提取物对吸入性肺损伤新生大鼠的保护作用。方法:采用随机数字表法将大鼠随机分为4组:空白对照组(Control)、模型组(Model)、地塞米松组(DEX)和蒲公英提取物组(Dandelion)进行后续实验;苏木素-伊红和Masson染色检测肺组织病理损伤情况;计算肺湿干重比值;血气分析仪测定PaO2;ELISA试剂盒检测血清和肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-1β、IL-8和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平;髓过氧化物酶测试盒检测血清和肺MPO活力;丙二醛测定试剂盒检测肺MDA活力。结果:蒲公英提取物具有减轻肺组织病理损伤程度,升高PaO2水平,降低肺的W/D比值,降低炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、MCP-1的表达,降低大鼠血清MPO活性及肺MPO、MDA活性的作用。结论:本研究表明蒲公英提取物对吸入性肺损伤新生大鼠具有保护作用。 展开更多
关键词 蒲公英提取物 胎粪吸入综合征 炎症因子 髓过氧化物酶
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