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白绒山羊PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对肌内脂肪细胞增殖分化的影响
被引量:
10
1
作者
杜琛
李金泉
陈秀娟
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期671-678,共8页
本研究以绒山羊肌内脂肪细胞为试验材料,通过靶向阻断过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ基因,建立稳定干扰的肌内脂肪细胞株,探讨绒山羊PPARγ基因在肌内脂肪细胞增殖和分化过程中的功能。采用慢病毒质粒包装系统构建特异靶向白绒山羊P...
本研究以绒山羊肌内脂肪细胞为试验材料,通过靶向阻断过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ基因,建立稳定干扰的肌内脂肪细胞株,探讨绒山羊PPARγ基因在肌内脂肪细胞增殖和分化过程中的功能。采用慢病毒质粒包装系统构建特异靶向白绒山羊PPARγ基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARγ基因稳定沉默的肌内脂肪细胞株。利用实时定量和Western blot方法检测PPARγ基因在干扰组和对照组不同时间点的表达情况,并通过MTT和油红O染色法研究绒山羊PPARγ基因对肌内脂肪细胞增殖和分化的影响。经测序证实合成的含PPARγ-shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确,对肌内脂肪细胞的感染效率为80%以上,荧光定量和Western blot检测慢病毒介导的shRNA可以有效降低PPARγ的表达,其mRNA和蛋白水平作用的时间相隔24h。沉默PPARγ基因后,脂肪细胞内甘油三脂的浓度明显低于对照组,相反MTT检测干扰组中细胞增殖能力高于对照组。本研究构建了绒山羊shRNA-PPARγ慢病毒干扰载体,成功转染至肌内脂肪细胞后可明显抑制脂肪细胞的分化,而促进肌内脂肪细胞的增殖,为进一步研究PPARγ基因在绒山羊脂肪细胞代谢通路中的作用及脂肪沉积机制奠定基础。
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关键词
肌内脂肪细胞
RNA干扰
PPARΓ
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职称材料
绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析
被引量:
6
2
作者
杜琛
李金泉
陈秀娟
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第2期285-295,共11页
试验旨在研究脂肪沉积关键基因在内蒙古白绒山羊的表达规律,以期深入分析绒山羊肌内脂肪沉积特征。利用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ、FTO、Lipin、LPL、HSL、A-FABP和Perilipin 7个基因在绒山羊10个不同肌肉组织及肌内前体脂肪细胞...
试验旨在研究脂肪沉积关键基因在内蒙古白绒山羊的表达规律,以期深入分析绒山羊肌内脂肪沉积特征。利用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ、FTO、Lipin、LPL、HSL、A-FABP和Perilipin 7个基因在绒山羊10个不同肌肉组织及肌内前体脂肪细胞分化的3个时期(早期(D3)、中期(D7)、末期(D11))、诱导分化关键时间点(24、48、72和96h)的变化,分别从组织和细胞角度对其进行分析,并研究其与肌内脂肪含量的关系。结果表明,FTO基因的表达水平高于其他基因;Lipin基因的表达量最低;LPL和HSL是脂肪合成和分解的关键酶类,其表达趋势大致相同,仅仅在腰大肌和斜方肌这两个部位的表达模式相反。A-FABP和Perilipin基因表达模式也较为特殊,整体表达量较低,前者仅仅在胸下矩肌中有较高表达,后者在股二头肌中有较高表达。从细胞水平分析发现Lipin、PPARγ、A-FABP和Perilipin的表达模式相似,随着前体脂肪细胞培养日龄的增加和甘油三酯的积聚,其表达量逐渐升高;Lipin基因在各个时间点的表达丰度极低;HSL基因的表达量随分化程度的升高而逐渐降低;Perilipin基因仅仅在诱导分化的后期有较高表达。相关性统计分析发现,PPARγ基因mRNA与肌内脂肪多呈负相关;而其他成脂基因HSL、LPL、FTO、Lipin、Perilipin、A-FABP mRNA与肌内脂肪含量多呈正相关。因此,脂肪沉积关键基因的表达具有特异性,总体上看基因表达量为FTO>PPARγ>LPL>HSL>A-FABP>Perilipin>Lipin,该结果为进一步研究脂肪沉积机制及优化山羊肉品质奠定基础。
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关键词
绒山羊
肌内脂肪细胞
肌内脂肪含量
基因
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职称材料
肉碱的生物合成、转运及其在畜牧业中的应用
被引量:
1
3
作者
王静
杜琛
+2 位作者
张燕军
李金泉
张文广
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第6期1471-1479,共9页
肉碱是1905年在肌肉中发现的一种必需代谢产物,它的主要生理功能是将细胞液中的长链脂肪酸转运到线粒体中参与脂肪酸β-氧化为机体提供能量。近年来,肉碱作为一种改善畜禽生产和繁殖性能的必需营养物质,在畜牧生产中的应用越来越广泛。...
肉碱是1905年在肌肉中发现的一种必需代谢产物,它的主要生理功能是将细胞液中的长链脂肪酸转运到线粒体中参与脂肪酸β-氧化为机体提供能量。近年来,肉碱作为一种改善畜禽生产和繁殖性能的必需营养物质,在畜牧生产中的应用越来越广泛。作者综述了肉碱的生物合成、转运及其在畜牧业中的应用,以期为肉碱相关研究提供理论依据和思路。
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关键词
肉碱
生物合成
转运
应用
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职称材料
基于RNA-Seq识别山羊肉品质候选基因
被引量:
14
4
作者
孟宪然
杜琛
+4 位作者
王静
付绍印
郑竹清
张文广
李金泉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1300-1307,共8页
通过研究不同年龄和不同性别绒山羊背最长肌之间的差异表达基因,筛选影响绒山羊肉品质的候选基因。本研究基于RNA-Seq技术对4个绒山羊背最长肌的转录组进行高通量测序,在测序评估的基础上,对差异表达基因进行筛选、功能注释和富集分析...
通过研究不同年龄和不同性别绒山羊背最长肌之间的差异表达基因,筛选影响绒山羊肉品质的候选基因。本研究基于RNA-Seq技术对4个绒山羊背最长肌的转录组进行高通量测序,在测序评估的基础上,对差异表达基因进行筛选、功能注释和富集分析。本研究通过CLC Genomics Workbench 6.0软件共找到263个候选基因,其中包含123个高表达有利基因和140个高表达有害基因。GO功能注释结果显示,高表达有利基因主要与骨骼肌的生长发育、细胞器的形成和蛋白结合功能有关;高表达有害基因主要与脂质代谢、细胞骨架以及结合功能有关。利用KEGG数据库作为参考,这些基因主要参与糖酵解/糖异生、丝裂原活化蛋白激酶、凝血-补体级联反应和色氨酸代谢等通路中。结合其他家畜基因组学研究,ADIPOQ、PDK4和CD36可能作为参与肉品质重要的候选基因。该结果为绒山羊肉品质的改善以及候选基因的研究提供了理论依据。
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关键词
绒山羊
背最长肌
肉品质
RNA-SEQ
候选基因
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职称材料
题名
白绒山羊PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对肌内脂肪细胞增殖分化的影响
被引量:
10
1
作者
杜琛
李金泉
陈秀娟
机构
内蒙古
医科
大学
附属
医院
内蒙古
农业
大学
动物科学学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期671-678,共8页
基金
国家自然科学基金(30960246)
内蒙古自然科学基金(2010Zd11)
+1 种基金
国家科技支撑项目(2011BAD28B05)
国家绒毛用羊现代农业产业技术体系(CARS-40-05)
文摘
本研究以绒山羊肌内脂肪细胞为试验材料,通过靶向阻断过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ基因,建立稳定干扰的肌内脂肪细胞株,探讨绒山羊PPARγ基因在肌内脂肪细胞增殖和分化过程中的功能。采用慢病毒质粒包装系统构建特异靶向白绒山羊PPARγ基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARγ基因稳定沉默的肌内脂肪细胞株。利用实时定量和Western blot方法检测PPARγ基因在干扰组和对照组不同时间点的表达情况,并通过MTT和油红O染色法研究绒山羊PPARγ基因对肌内脂肪细胞增殖和分化的影响。经测序证实合成的含PPARγ-shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确,对肌内脂肪细胞的感染效率为80%以上,荧光定量和Western blot检测慢病毒介导的shRNA可以有效降低PPARγ的表达,其mRNA和蛋白水平作用的时间相隔24h。沉默PPARγ基因后,脂肪细胞内甘油三脂的浓度明显低于对照组,相反MTT检测干扰组中细胞增殖能力高于对照组。本研究构建了绒山羊shRNA-PPARγ慢病毒干扰载体,成功转染至肌内脂肪细胞后可明显抑制脂肪细胞的分化,而促进肌内脂肪细胞的增殖,为进一步研究PPARγ基因在绒山羊脂肪细胞代谢通路中的作用及脂肪沉积机制奠定基础。
关键词
肌内脂肪细胞
RNA干扰
PPARΓ
Keywords
intramuscular adipocyte
RNA interference
PPARγ
分类号
S827 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析
被引量:
6
2
作者
杜琛
李金泉
陈秀娟
机构
内蒙古
医科
大学
附属
医院
内蒙古
农业
大学
动物科学学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第2期285-295,共11页
基金
国家自然科学基金(30960246)
内蒙古自然科学基金(2010Zd11)
国家科技支撑项目(2011BAD28B05)
文摘
试验旨在研究脂肪沉积关键基因在内蒙古白绒山羊的表达规律,以期深入分析绒山羊肌内脂肪沉积特征。利用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ、FTO、Lipin、LPL、HSL、A-FABP和Perilipin 7个基因在绒山羊10个不同肌肉组织及肌内前体脂肪细胞分化的3个时期(早期(D3)、中期(D7)、末期(D11))、诱导分化关键时间点(24、48、72和96h)的变化,分别从组织和细胞角度对其进行分析,并研究其与肌内脂肪含量的关系。结果表明,FTO基因的表达水平高于其他基因;Lipin基因的表达量最低;LPL和HSL是脂肪合成和分解的关键酶类,其表达趋势大致相同,仅仅在腰大肌和斜方肌这两个部位的表达模式相反。A-FABP和Perilipin基因表达模式也较为特殊,整体表达量较低,前者仅仅在胸下矩肌中有较高表达,后者在股二头肌中有较高表达。从细胞水平分析发现Lipin、PPARγ、A-FABP和Perilipin的表达模式相似,随着前体脂肪细胞培养日龄的增加和甘油三酯的积聚,其表达量逐渐升高;Lipin基因在各个时间点的表达丰度极低;HSL基因的表达量随分化程度的升高而逐渐降低;Perilipin基因仅仅在诱导分化的后期有较高表达。相关性统计分析发现,PPARγ基因mRNA与肌内脂肪多呈负相关;而其他成脂基因HSL、LPL、FTO、Lipin、Perilipin、A-FABP mRNA与肌内脂肪含量多呈正相关。因此,脂肪沉积关键基因的表达具有特异性,总体上看基因表达量为FTO>PPARγ>LPL>HSL>A-FABP>Perilipin>Lipin,该结果为进一步研究脂肪沉积机制及优化山羊肉品质奠定基础。
关键词
绒山羊
肌内脂肪细胞
肌内脂肪含量
基因
Keywords
cashmere goat
intramuscular adipocytes
intramuscular fat content
gene
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
肉碱的生物合成、转运及其在畜牧业中的应用
被引量:
1
3
作者
王静
杜琛
张燕军
李金泉
张文广
机构
内蒙古
农业
大学
动物科学学院
内蒙古医科大学附属医院妇产科生殖医学中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第6期1471-1479,共9页
基金
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-40-05)
公益性行业(农业)科研专项(201303059
201003019)
文摘
肉碱是1905年在肌肉中发现的一种必需代谢产物,它的主要生理功能是将细胞液中的长链脂肪酸转运到线粒体中参与脂肪酸β-氧化为机体提供能量。近年来,肉碱作为一种改善畜禽生产和繁殖性能的必需营养物质,在畜牧生产中的应用越来越广泛。作者综述了肉碱的生物合成、转运及其在畜牧业中的应用,以期为肉碱相关研究提供理论依据和思路。
关键词
肉碱
生物合成
转运
应用
Keywords
carnitine
biosynthesis
transport
application
分类号
S816 [农业科学—饲料科学]
在线阅读
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职称材料
题名
基于RNA-Seq识别山羊肉品质候选基因
被引量:
14
4
作者
孟宪然
杜琛
王静
付绍印
郑竹清
张文广
李金泉
机构
内蒙古
农业
大学
动物科学学院动物遗传育种与繁殖自治区重点实验室
内蒙古医科大学附属医院妇产科生殖医学中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1300-1307,共8页
基金
国家自然科学基金(30960246)
内蒙古自然科学基金(2010Zd11)
+1 种基金
"内蒙古自治区草原英才"与"内蒙古自治区高等学校创新团队发展计划"(NMGIRT1106)
国家绒毛用羊现代农业产业技术体系(CARS-40-05)
文摘
通过研究不同年龄和不同性别绒山羊背最长肌之间的差异表达基因,筛选影响绒山羊肉品质的候选基因。本研究基于RNA-Seq技术对4个绒山羊背最长肌的转录组进行高通量测序,在测序评估的基础上,对差异表达基因进行筛选、功能注释和富集分析。本研究通过CLC Genomics Workbench 6.0软件共找到263个候选基因,其中包含123个高表达有利基因和140个高表达有害基因。GO功能注释结果显示,高表达有利基因主要与骨骼肌的生长发育、细胞器的形成和蛋白结合功能有关;高表达有害基因主要与脂质代谢、细胞骨架以及结合功能有关。利用KEGG数据库作为参考,这些基因主要参与糖酵解/糖异生、丝裂原活化蛋白激酶、凝血-补体级联反应和色氨酸代谢等通路中。结合其他家畜基因组学研究,ADIPOQ、PDK4和CD36可能作为参与肉品质重要的候选基因。该结果为绒山羊肉品质的改善以及候选基因的研究提供了理论依据。
关键词
绒山羊
背最长肌
肉品质
RNA-SEQ
候选基因
Keywords
cashmere goat
longissimus dorsi
meat quality
RNA-Seq
candidate gene
分类号
S827.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白绒山羊PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对肌内脂肪细胞增殖分化的影响
杜琛
李金泉
陈秀娟
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
10
在线阅读
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职称材料
2
绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析
杜琛
李金泉
陈秀娟
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
肉碱的生物合成、转运及其在畜牧业中的应用
王静
杜琛
张燕军
李金泉
张文广
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
基于RNA-Seq识别山羊肉品质候选基因
孟宪然
杜琛
王静
付绍印
郑竹清
张文广
李金泉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
14
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职称材料
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引证文献
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