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苯并（a）芘对大鼠肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因表达的影响
1
作者 常福厚 白图雅 +2 位作者 吕晓丽 余婉佳 胡玉霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期1-1,共1页
目的观察苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2（cytochromeP4501A2,CYP1A2）和细胞色素P4502E1（cytochromeP4502E1,CYP2E1）基因表达的影响.方法（1）动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁... 目的观察苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2（cytochromeP4501A2,CYP1A2）和细胞色素P4502E1（cytochromeP4502E1,CYP2E1）基因表达的影响.方法（1）动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁级,200～250g,随机分为B[a]P25mg·kg^-1、B[a]P50mg·kg^-1和B[a]P100mg·kg^-1染毒组和空白对照组,每组10只.各染毒组B[a]P溶于橄榄油成均匀的混悬液,空白对照组给等体积的橄榄油,每日1次,连续灌胃14d（染毒各组在d14一次性腹腔注射各个剂量的B[a]P后）,禁食不禁水24h后断头放尽血液,剖胸迅速取出肺组织放入液氮中速冻,后迅速转移至-80℃冰箱保存备用（用于总RNA提取和基因表达分析）.（2）大鼠肺组织RNA的提取：参照RNA提取试剂盒说明书方法提取大鼠肺总RNA,测定RNA溶液的吸光度（A260）和A260/A280以判断总RNA的浓度和纯度,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳以判断RNA的完整性.（3）逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）：用RT-PCR反应试剂盒检测CYP1A2和CYP2E1基因mRNA的表达,以β-actin作为内对照,分析B[a]P对大鼠肺组织中CYP1A2和CYP2E1基因mRNA表达的影响.结果与空白对照组相比,高、中剂量的B[a]P组可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而低剂量的B[a]P组与空白对照组比较差异无显著性（P〉0.05）.结论一定剂量的B[a]P可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,提示CYP1A2和CYP2E1基因可能参与B[a]P的代谢过程,催化B[a]P生成有毒的代谢产物,本研究对B[a]P相关的代谢酶的影响及B[a]P致癌机制的探讨具有-定的理论意义,为进一步探索B[a]P的致癌机理及与代谢酶相关基因的相互作用奠定一定的研究基础. 展开更多
关键词 CYP2E1基因 CYP1A2 基因表达分析 大鼠肺组织 苯并(A)芘 总RNA提取 基因MRNA表达 逆转录聚合酶链反应
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氢氧化镧通过阻断HIF-1α信号通路抑制慢性肾病所致的血管钙化 被引量：1
2
作者 崔雅婷 王琪雯 +1 位作者 王胜男 李刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2354-2360,共7页
目的研究氢氧化镧对慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)所致大鼠肾损伤及血管钙化的治疗作用及其机制。方法通过给予腺嘌呤构建CKD模型,造模后随机分为模型组、氢氧化镧低、中、高剂量组、碳酸镧组、碳酸钙组。8周后,检测血清磷(Pi)... 目的研究氢氧化镧对慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)所致大鼠肾损伤及血管钙化的治疗作用及其机制。方法通过给予腺嘌呤构建CKD模型,造模后随机分为模型组、氢氧化镧低、中、高剂量组、碳酸镧组、碳酸钙组。8周后,检测血清磷(Pi)、钙(Ca)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRAP-5b)水平;组织病理学染色评估血管钙化程度;对血管中平滑肌蛋白22α(smooth muscle protein 22α,SM22α)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、低氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)通路mRNA及其蛋白表达水平进行检测。结果氢氧化镧可明显降低CKD大鼠血清Pi、Scr、BUN、PTH、FGF23及TRAP-5b水平,明显减少CKD大鼠胸主动脉的钙沉积、胞质中BMP-2、VEGF及胞核内RUNX2、HIF-1α的表达,增加SM22αmRNA及蛋白的表达。结论氢氧化镧可明显改善CKD大鼠高磷血症,其可能通过阻断HIF-1α信号通路发挥改善CKD大鼠血管钙化的作用。 展开更多
关键词 氢氧化镧 慢性肾病 腺嘌呤 高磷血症 血管钙化 低氧诱导因子1Α
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氯化镧通过低氧诱导因子1信号通路抑制高磷诱导的人血管平滑肌细胞钙化 被引量：1
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作者 王琪雯 赵璐璐 +5 位作者 元晓荣 高原 王鲁豫 张春生 谷超 李刚 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期729-738,共10页
目的研究氯化镧(LaCl_(3))对高磷诱导的人血管平滑肌细胞(hVSMC)钙化的抑制作用及其机制。方法采用高磷诱导hVSMC钙化模型。将对数生长期的hVSMC随机分为细胞对照组、LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组、高磷模型组(磷酸盐缓冲液3 mmol... 目的研究氯化镧(LaCl_(3))对高磷诱导的人血管平滑肌细胞(hVSMC)钙化的抑制作用及其机制。方法采用高磷诱导hVSMC钙化模型。将对数生长期的hVSMC随机分为细胞对照组、LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组、高磷模型组(磷酸盐缓冲液3 mmol·L-1)、模型+氯化钠(NaCl)180μmol·L^(-1)组、模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组、模型+二甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)100μmol·L^(-1)+LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组、模型+焦磷酸盐(PPI)100μmol·L^(-1)组。hVSMC给予磷酸盐缓冲液3 mmol·L-1孵育6 d造模,第4天,按分组给予相应药物孵育2 d。茜素红染色法及Von Kossa染色法检测细胞钙沉积;试剂盒检测细胞内钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性;荧光染色法检测细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞平滑肌蛋白22α(sm22α)、骨形态发生蛋白2(bmp-2)、成骨相关转录因子2(runx2)和血管内皮生长因子(vegf)mRNA表达水平;Western印迹法检测细胞质低氧诱导因子1α(HIF-1α)、VEGF、SM22α和BMP-2及细胞核Runx2和HIF-1α蛋白表达水平。结果茜素红染色结果显示,与细胞对照组相比,高磷模型组细胞钙沉积明显升高(P<0.01);与高磷模型组相比,模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组细胞钙沉积明显降低(P<0.05,P<0.01)。Von Kossa染色结果显示,高磷模型组细胞黑色沉积物呈现大量聚集并广泛分布;模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组黑色沉积物有所减少。与细胞对照组相比,高磷模型组细胞内钙含量和ALP活性均明显升高(P<0.01);与高磷模型组相比,模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组细胞内钙含量和ALP活性均显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型+LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组相比,模型+DMOG+LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组细胞钙含量及ALP活性均显著升高(P<0.01)。ROS检测结果显示,与细胞对照组相比,高磷模型组ROS含量显著增加(P<0.01);与高磷模型组相比,模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组ROS含量显著减少(P<0.05,P<0.01),而与模型+LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组相比,模型+DMOG+LaCl_(3)60μmol·L^(-1)组ROS含量显著增加(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,与细胞对照组相比,高磷模型组sm22αmRNA表达水平显著下降(P<0.01),bmp-2,runx2和vegf mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与高磷模型组相比,模型+LaCl_(3)15,30和60μmol·L^(-1)组sm22αmRNA表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),bmp-2,runx2和vegf mRNA表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与细胞对照组相比,高磷模型组细胞胞质内VEGF和BMP-2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),HIF-1α及SM22α蛋白表达水平明显降低(P<0.01);细胞核内HIF-1α和Runx2蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与高磷模型组相比,模型+LaCl_(3)30和60μmol·L^(-1)组细胞质内VEGF和BMP-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),HIF-1α和SM22α蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);细胞核HIF-1α和Runx2蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论LaCl_(3)可抑制高磷诱导的hVSMC中ROS生成,并可通过阻断HIF-1信号通路发挥抑制高磷诱导的hVSMC钙化的作用。 展开更多
关键词 氯化镧 高磷血症 低氧诱导因子1Α 信号通路 血管钙化
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