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HIE幼龄大鼠神经元自噬诱导线粒体功能障碍的研究
被引量：
1
1
作者
李鹏
李晓华
+2 位作者
苏秦
白静
郝雷
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期366-370,共5页
目的:探讨细胞自噬对缺氧缺血性脑病(HIE)幼龄大鼠神经元线粒体功能的影响。方法:随机选取10日龄SPF级SD大鼠30只,分为假手术(sham)组和HIE组,后者结扎单侧颈总动脉复制缺血缺氧模型。取脑组织行镜下病理观察,免疫组化分析活化型caspas...
目的:探讨细胞自噬对缺氧缺血性脑病(HIE)幼龄大鼠神经元线粒体功能的影响。方法:随机选取10日龄SPF级SD大鼠30只,分为假手术(sham)组和HIE组,后者结扎单侧颈总动脉复制缺血缺氧模型。取脑组织行镜下病理观察,免疫组化分析活化型caspase-3和LC3B-II蛋白表达;体外实验中观察缺氧诱导的原代大鼠神经元的自噬过程,Western blot检测相关蛋白,并对大鼠神经元线粒体功能进行测试。结果:(1)与sham组相比,HIE组大鼠出现脑萎缩和脑室增宽;HIE组免疫组化显示活化型caspase-3和LC3B-II蛋白表达上调(P<0.01);(2)体外细胞实验发现,缺氧可诱导大鼠神经元出现自噬和凋亡;(3)与sham组相比,单纯缺氧的神经元内活性氧簇增加,线粒体超氧化物上调,线粒体跨膜电位降低(P<0.01)。结论:在HIE大鼠模型中,缺氧诱导的神经元线粒体功能障碍,可能与缺氧时神经元出现的自噬和凋亡有关。这一结果将为临床上开发细胞自噬因子类药物治疗HIE提供了新的思路。
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关键词
细胞凋亡
自噬
线粒体功能障碍
缺氧缺血性脑病
神经元
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职称材料
趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制
2
作者
宣成睿
塔拉
+1 位作者
王翠艳
徐晓艳
《科学技术与工程》
北大核心
2022年第34期15088-15094,共7页
多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞...
多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞,实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜,镜下观察质粒转染效率。利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况;利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况;利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后,ACHN细胞形态变化,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况。研究结果显示:荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达,证明转染效率良好。CCK8检测结果显示:转染48、72 h后,实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示:实验组增值指数PI明显高于对照组,差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01)。荧光显微镜下Hoechst染色结果显示:与对照组相比较,实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比较,转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot结果:与对照组相比较,周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase,JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05)。趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡,其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。
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关键词
肾癌
趋化素样因子1
凋亡
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职称材料
题名
HIE幼龄大鼠神经元自噬诱导线粒体功能障碍的研究
被引量：
1
1
作者
李鹏
李晓华
苏秦
白静
郝雷
机构
内蒙古
医科
大学
附属医院儿科
内蒙古医科大学病理生理学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期366-370,共5页
基金
内蒙古自然科学基金资助项目[No.2016MS(LH)0815
No.2017MS0899]
文摘
目的:探讨细胞自噬对缺氧缺血性脑病(HIE)幼龄大鼠神经元线粒体功能的影响。方法:随机选取10日龄SPF级SD大鼠30只,分为假手术(sham)组和HIE组,后者结扎单侧颈总动脉复制缺血缺氧模型。取脑组织行镜下病理观察,免疫组化分析活化型caspase-3和LC3B-II蛋白表达;体外实验中观察缺氧诱导的原代大鼠神经元的自噬过程,Western blot检测相关蛋白,并对大鼠神经元线粒体功能进行测试。结果:(1)与sham组相比,HIE组大鼠出现脑萎缩和脑室增宽;HIE组免疫组化显示活化型caspase-3和LC3B-II蛋白表达上调(P<0.01);(2)体外细胞实验发现,缺氧可诱导大鼠神经元出现自噬和凋亡;(3)与sham组相比,单纯缺氧的神经元内活性氧簇增加,线粒体超氧化物上调,线粒体跨膜电位降低(P<0.01)。结论:在HIE大鼠模型中,缺氧诱导的神经元线粒体功能障碍,可能与缺氧时神经元出现的自噬和凋亡有关。这一结果将为临床上开发细胞自噬因子类药物治疗HIE提供了新的思路。
关键词
细胞凋亡
自噬
线粒体功能障碍
缺氧缺血性脑病
神经元
Keywords
Apoptosis
Autophagy
Mitochondrial dysfunction
Hypoxic ischemic encephalopathy
Neurons
分类号
R722 [医药卫生—儿科]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制
2
作者
宣成睿
塔拉
王翠艳
徐晓艳
机构
内蒙古医科大学病理生理学教研室
内蒙古
自治区人民医院泌尿外科
内蒙古
医科
大学
病理
学
教研室
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2022年第34期15088-15094,共7页
基金
内蒙古自治区高校科技研究项目(NJZY19093)
内蒙古自治区肿瘤生物治疗协同创新项目(ZLXT2018)
+1 种基金
内蒙古自治区自然科学基金(2020MS08198)
内蒙古自治区卫生健康科技计划(202201218)。
文摘
多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞,实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜,镜下观察质粒转染效率。利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况;利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况;利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后,ACHN细胞形态变化,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况。研究结果显示:荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达,证明转染效率良好。CCK8检测结果显示:转染48、72 h后,实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示:实验组增值指数PI明显高于对照组,差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01)。荧光显微镜下Hoechst染色结果显示:与对照组相比较,实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比较,转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot结果:与对照组相比较,周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase,JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05)。趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡,其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。
关键词
肾癌
趋化素样因子1
凋亡
Keywords
renal cancer
chemokine-like factor 1
apoptosis
分类号
R737.11 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIE幼龄大鼠神经元自噬诱导线粒体功能障碍的研究
李鹏
李晓华
苏秦
白静
郝雷
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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职称材料
2
趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制
宣成睿
塔拉
王翠艳
徐晓艳
《科学技术与工程》
北大核心
2022
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