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雌激素作用下输卵管上皮细胞S100A8和S100A9的表达及其作用探讨 被引量:2
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作者 李晓丹 曹贵方 +6 位作者 杨宏新 于建 刘默宁 龙鑫 魏巍 李春芳 苏红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期562-568,共7页
目的研究基因S100A8和S100A9是否可能参与雌激素对输卵管的功能调控,并探讨它们对输卵管可能的影响。方法免疫组织化学法检测S100A8和S100A9在健康间情期,绵羊输卵管壶腹部中的基础表达及分布;利用E2作用绵羊输卵管上皮细胞,在不同作用... 目的研究基因S100A8和S100A9是否可能参与雌激素对输卵管的功能调控,并探讨它们对输卵管可能的影响。方法免疫组织化学法检测S100A8和S100A9在健康间情期,绵羊输卵管壶腹部中的基础表达及分布;利用E2作用绵羊输卵管上皮细胞,在不同作用时间及不同浓度E2作用下,q-PCR及免疫荧光法检测输卵管上皮细胞S100A8和S100A9 mRNA及蛋白的表达情况。结果在健康间情期绵羊输卵管,S100A8和S100A9高表达于黏膜上皮及腺上皮,并在血管中也有表达。输卵管上皮细胞在高浓度E2作用下,S100A8和S100A9的表达在不同时间出现动态变化,并均在E2作用6 h后出现表达高峰,在该时间下不同浓度的E2均显著诱导S100A8和S100A9的高表达,但在10-7 mol·L^-1和10-8 mol·L^-1浓度下表达最高,两组差异不显著。结论输卵管上皮细胞中S100A8和S100A9受到雌激素调控,高浓度雌激素促进S100A8和S100A9的高表达,可能与交配时生殖道的天然防御有关,并可能参与卵子在输卵管的运输。 展开更多
关键词 雌激素 输卵管 S100A8 S100A9 天然防御 卵子运输
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多囊卵巢颗粒细胞凋亡中NF-κB的作用机制 被引量:11
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作者 刘秀兰 杨宏新 +2 位作者 武瑞兵 王海生 王静媛 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期596-598,共3页
目的探讨NF-κB在多囊卵巢颗粒细胞凋亡中的作用机制。方法选用24日龄未成年雌性Wista大鼠,随机分成两组,每组20只,建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型;Western blot法检测大鼠卵巢组织中NF-κB抑制蛋白Iк... 目的探讨NF-κB在多囊卵巢颗粒细胞凋亡中的作用机制。方法选用24日龄未成年雌性Wista大鼠,随机分成两组,每组20只,建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型;Western blot法检测大鼠卵巢组织中NF-κB抑制蛋白IкBα的表达;Real-time PCR法检测卵巢组织中Caspase-3及BCL-2基因表达。结果 PCOS组大鼠卵巢组织中IкBα蛋白水平低于对照组,差异有显著性( P <0.01);PCOS组卵巢组织中BCL-2、Caspase-3 mRNA水平均较正常组的升高,差异有显著性( P <0.01)。结论 NF-κB可能通过正向调控Caspase-3及BCL-2的表达,诱导多囊卵巢颗粒细胞凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 NF-ΚB 凋亡 WESTERN BLOT REAL time-PCR
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兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:3
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作者 杨宏新 杨勇 曹贵方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期362-367,共6页
目的制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体。方法构建pET-22b-SAS1B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达。用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SA... 目的制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体。方法构建pET-22b-SAS1B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达。用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SAS1B多克隆抗体。ELISA检测SAS1B抗体效价,Western blot和免疫组织化学法鉴定SAS1B抗体特异性。结果在构建pET-22b-SAS1B-His原核表达载体的基础上,在BL21(DE3)细胞成功诱导表达SAS1B重组蛋白。制备的兔抗人SAS1B多克隆抗体效价为1∶51200。SAS1B多克隆抗体能与SAS1B重组蛋白特异结合且能识别乳腺癌组织中的SAS1B蛋白。结论成功制备具有较好特异性的兔抗人SAS1B多克隆抗体。 展开更多
关键词 精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B) 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
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