选择影响Invedal和Hanna绵羊多胎性状的BMP15基因作为多胎候选基因,旨在探索该候选基因与蒙古羊双羔群体繁殖性状之间的关系,为开展蒙古羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。本试验以蒙古羊单羔群体（18只）、多胎类型小尾寒羊（3...选择影响Invedal和Hanna绵羊多胎性状的BMP15基因作为多胎候选基因,旨在探索该候选基因与蒙古羊双羔群体繁殖性状之间的关系,为开展蒙古羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。本试验以蒙古羊单羔群体（18只）、多胎类型小尾寒羊（30只）为对照组对蒙古羊双羔群体（50只）进行了BMP15基因的遗传多态性分析,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性PCR-RFLP（Restriction Fragment Polymor-phisms,RFLPs）分子标记技术对BMP15的FecXI位点突变进行多态性分析;采用单核苷酸多态性标记PCR-SSCP技术对BMP15的B1位点进行多态性分析,结果表明：蒙古羊双羔群体、蒙古羊单羔群体以及多胎类型小尾寒羊群体中均不存在该位点的突变。即BMP15的FecXI位点不是影响蒙古羊和小尾寒羊多胎性状的主效基因;在三种群体中存在相应的B1突变28-30 bp（CTT缺失）,并发现了3种基因型,蒙古羊双羔群体3种基因型频率分别是0.020（＋＋）,0.940（B＋）,0.040（BB）;蒙古羊单羔群体只检测到了两种基因型,基因型频率分别是0.722（＋＋）,0.278（BB）;小尾寒羊群体中3种基因型频率分别是0.300（＋＋）,0.667（B＋）,0.033（BB）。B＋基因型蒙古羊平均产羔数比＋＋基因型多0.83只,差异极显著（P〈0.01）,推断BMP15的B1突变有可能是控制蒙古羊多胎性能的主效基因;小尾寒羊群体中3种基因型母羊平均产羔数差异不显著（P〉0.05）。经χ^2适合性检验表明,蒙古羊双羔群体该位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P〈0.01）;蒙古羊单羔群体及小尾寒羊该位点处于Hardy-Weinberg平衡（P〉0.05）。展开更多
【目的】基于PI3K/Akt通路研究含凝血酶敏感素基序的去解联金属蛋白酶1(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,ADAMTS1)在产双胎和单胎蒙古羊发情周期不同阶段卵巢内的表达规律,探究ADAMTS1基因影响蒙古...【目的】基于PI3K/Akt通路研究含凝血酶敏感素基序的去解联金属蛋白酶1(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,ADAMTS1)在产双胎和单胎蒙古羊发情周期不同阶段卵巢内的表达规律,探究ADAMTS1基因影响蒙古羊繁殖性状的作用机制。【方法】选取经产2次的双胎和单胎蒙古羊共40只,自然发情,确定母羊发情期和间情期,分为双胎发情期、双胎间情期、单胎发情期和单胎间情期组,每组各10只羊。利用注射器抽取2~3岁蒙古羊颗粒细胞,分为对照组和试验组,对照组不添加药物,试验组添加15μmol/L LY294002处理颗粒细胞,分别在24、48和72 h测定细胞活力。通过实时荧光定量PCR技术检测母羊卵巢组织和颗粒细胞内ADAMTS1、PI3K、PTEN、Akt、RPS6、Bcl-2和BAX基因的相对表达量;通过Western blotting技术检测卵巢和颗粒细胞内ADAMTS1、PI3K和Akt蛋白的表达丰度。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,双胎发情期组ADAMTS1、Bcl-2基因表达量均显著高于其余各组(P<0.05);双胎发情期组和双胎间情期组PI3K、Akt和PTEN基因表达量均显著高于单胎发情期组和单胎间情期组(P<0.05);单胎间情期组RPS6基因表达量显著低于其余各组(P<0.05);间情期与发情期相比,BAX基因表达显著上调(P<0.05)。Western blotting结果显示,双胎发情期ADAMST1蛋白表达量显著高于其余各组(P<0.05);双胎组与单胎组相比,PI3K和Akt蛋白均表达上调,其中,双胎发情期和双胎间情期PI3K蛋白表达量均显著高于单胎发情期组和单胎间情期组(P<0.05),双胎间情期Akt蛋白表达量最高,显著高于其余各组(P<0.05)。与对照组相比,试验组蒙古羊颗粒细胞形态异常,细胞增殖缓慢,且ADAMTS1、PI3K和Akt基因和蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】ADAMTS1、PI3K和Akt基因和蛋白在蒙古羊卵巢和颗粒细胞内的表达趋势一致,呈正向相关关系,证明ADAMTS1基因PI3K/Akt轴在蒙古羊产双胎性状中发挥重要作用。展开更多
文摘选择影响Invedal和Hanna绵羊多胎性状的BMP15基因作为多胎候选基因,旨在探索该候选基因与蒙古羊双羔群体繁殖性状之间的关系,为开展蒙古羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。本试验以蒙古羊单羔群体（18只）、多胎类型小尾寒羊（30只）为对照组对蒙古羊双羔群体（50只）进行了BMP15基因的遗传多态性分析,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性PCR-RFLP（Restriction Fragment Polymor-phisms,RFLPs）分子标记技术对BMP15的FecXI位点突变进行多态性分析;采用单核苷酸多态性标记PCR-SSCP技术对BMP15的B1位点进行多态性分析,结果表明：蒙古羊双羔群体、蒙古羊单羔群体以及多胎类型小尾寒羊群体中均不存在该位点的突变。即BMP15的FecXI位点不是影响蒙古羊和小尾寒羊多胎性状的主效基因;在三种群体中存在相应的B1突变28-30 bp（CTT缺失）,并发现了3种基因型,蒙古羊双羔群体3种基因型频率分别是0.020（＋＋）,0.940（B＋）,0.040（BB）;蒙古羊单羔群体只检测到了两种基因型,基因型频率分别是0.722（＋＋）,0.278（BB）;小尾寒羊群体中3种基因型频率分别是0.300（＋＋）,0.667（B＋）,0.033（BB）。B＋基因型蒙古羊平均产羔数比＋＋基因型多0.83只,差异极显著（P〈0.01）,推断BMP15的B1突变有可能是控制蒙古羊多胎性能的主效基因;小尾寒羊群体中3种基因型母羊平均产羔数差异不显著（P〉0.05）。经χ^2适合性检验表明,蒙古羊双羔群体该位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P〈0.01）;蒙古羊单羔群体及小尾寒羊该位点处于Hardy-Weinberg平衡（P〉0.05）。
