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内蒙古绒山羊原始生殖细胞(PGCs)的培养与鉴定 被引量:1
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作者 刘羿羿 赵丽霞 +2 位作者 李燕 白俊 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期92-96,共5页
本试验从内蒙古白绒山羊胎儿的生殖嵴中分离出原始生殖细胞体外培养并进行了鉴定。为建立内蒙古绒山羊原始生殖细胞(pri mordial germcells,PGCs)的培养体系,试验对比了A、B、C3组不同的培养条件对内蒙古绒山羊原始生殖细胞传代数的影响... 本试验从内蒙古白绒山羊胎儿的生殖嵴中分离出原始生殖细胞体外培养并进行了鉴定。为建立内蒙古绒山羊原始生殖细胞(pri mordial germcells,PGCs)的培养体系,试验对比了A、B、C3组不同的培养条件对内蒙古绒山羊原始生殖细胞传代数的影响。RT-PCR鉴定结果表明,β-actin、hTERT、GAPDH、Nanog、Oct3/4为阳性、AKP染色为阳性;免疫荧光检测胚胎干细胞特异标志物Oct3/4、SSEA-3、SSEA-4呈阳性。未添加任何因子的A培养体系仅能传1代,添加LIF及Insulin的B培养体系可以传至4代,添加LIF、Insulin及优质胎牛血清的C组培养体系可以传至9代。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 Oct3/4 免疫荧光 NANOG
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5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷标记内蒙古绒山羊皮肤组织的免疫组织化学检测 被引量:1
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作者 郑琰 席海燕 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期28-31,共4页
探讨5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记内蒙古绒山羊皮肤组织的可行性及免疫组织化学检测的最优条件。通过对试验组绒山羊颈部静脉注射BrdU,活体背部皮肤采样,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片,利用免疫组织化学技... 探讨5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记内蒙古绒山羊皮肤组织的可行性及免疫组织化学检测的最优条件。通过对试验组绒山羊颈部静脉注射BrdU,活体背部皮肤采样,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片,利用免疫组织化学技术检测切片中是否有阳性细胞分布;通过试验BrdU不同注射剂量、生物素标记的第二抗体和链霉菌抗生物素-过氧化物酶各自稀释度、抗原修复方式及DNA变性温度对BrdU标记结果的影响,以寻求免疫组织化学检测的最佳条件。观察发现抗BrdU单克隆抗体处理的试验组皮肤组织切片中均有红色BrdU阳性细胞分布;未经BrdU标记的对照组动物同部位组织切片和以PBS代替抗BrdU单克隆抗体处理的试验组皮肤组织切片中均未见BrdU阳性细胞。BrdU适于内蒙古绒山羊活体标记;2 mol/L HCl 37℃变性30 min,胰蛋白酶37℃修复30 min,生物素标记的第二抗体和链霉菌抗生物素-过氧化物酶的稀释度均为1?100时,免疫组织化学检测结果最佳。 展开更多
关键词 BRDU 绒山羊 免疫组织化学技术 标记
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电场对干旱胁迫下油葵种子萌发的生物学效应 被引量:10
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作者 侯建华 杨体强 +1 位作者 王征宏 杨丽君 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2003年第3期119-122,共4页
用不同强度的电场处理不同品种的油葵(HelianthusannuusL.)种子,用PEG6000模拟干旱胁迫,发现电场处理能提高油葵种子在干旱胁迫下的发芽率,发芽指数,活力指数;萌发期油葵种子的脂肪酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶(SOD)活力显著地高于对... 用不同强度的电场处理不同品种的油葵(HelianthusannuusL.)种子,用PEG6000模拟干旱胁迫,发现电场处理能提高油葵种子在干旱胁迫下的发芽率,发芽指数,活力指数;萌发期油葵种子的脂肪酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶(SOD)活力显著地高于对照;降低了处理组膜脂过氧化产物——丙二醛(MDA)的积累;而且不同电场强度对不同的油葵品种影响程度不同,总体上认为W6和W8两种处理效果较好。电场处理组的代谢酶和保护酶活性的提高可能是静电场促进干旱条件下种子萌发的原因之一。 展开更多
关键词 电场 干旱胁迫 油葵 种子萌发 生物学效应 代谢酶 保护酶 酶活性 播前种子预处理
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山羊胚胎体外培养条件的优化 被引量:1
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作者 刘羿羿 赵高平 +4 位作者 李燕 白俊 王申元 巴特尔 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期146-149,共4页
为优化山羊胚胎体外培养条件,本试验比较了含有3种不同来源血清(优质胎牛血清、发情山羊血清、前列腺素(PG)处理后发情山羊血清)的M199对卵母细胞成熟效果的影响,成熟率分别为65.95%、49.2%、76.47%,差异极显著(P<0.01);本试验还分... 为优化山羊胚胎体外培养条件,本试验比较了含有3种不同来源血清(优质胎牛血清、发情山羊血清、前列腺素(PG)处理后发情山羊血清)的M199对卵母细胞成熟效果的影响,成熟率分别为65.95%、49.2%、76.47%,差异极显著(P<0.01);本试验还分别采用了SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞共培养,以及改进的DMEM/F12发育体系培养受精卵,结果发现,SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞的发育培养系统得到的囊胚率为29.62%、24.73%,差异不显著(P>0.05),改进的DMEM/F12发育液囊胚率最高为48.42%,差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 发情山羊血清 囊胚率 输卵管上皮细胞
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