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拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊毛囊特异表达载体的构建及其转基因细胞株的筛选
被引量：
2
1
作者
王海涛
孟凡华
+1 位作者
房君
周欢敏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第6期1-6,共6页
试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛...
试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆,并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确,酶切得到正确目的条带,筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞,并在RNA水平表达,为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。
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关键词
细毛羊
拟蜘蛛牵丝蛋白基因
毛囊特异表达
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职称材料
转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定
被引量：
1
2
作者
房君
孟凡华
+1 位作者
王海涛
周欢敏
《安徽农业科学》
CAS
2013年第22期9305-9308,共4页
[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中...
[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达。[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好(细胞生长曲线呈S型)、染色体数目为2n=54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA。[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础。
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关键词
拟蜘蛛牵丝蛋白基因
细毛羊成纤维细胞
脂质体转染
鉴定
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职称材料
纳米抗体在口蹄疫防治中的研究进展
3
作者
靳慧茹
武艺
+9 位作者
贾婷
张宏亮
王申元
凌宇
刘羿羿
刘春霞
周欢敏
李璐
张焱如
曹俊伟
《中国动物检疫》
CAS
2022年第11期89-95,共7页
口蹄疫作为一种急性、热性和高度传染性疫病,目前尚缺乏长期有效且能完全抑制其病原的药物或疫苗。纳米抗体是一种新型基因工程抗体,具有生产成本低、与抗原亲和力高、特异性强、相对分子质量小等优点,且结构独特,因而成为对抗病毒的抗...
口蹄疫作为一种急性、热性和高度传染性疫病,目前尚缺乏长期有效且能完全抑制其病原的药物或疫苗。纳米抗体是一种新型基因工程抗体,具有生产成本低、与抗原亲和力高、特异性强、相对分子质量小等优点,且结构独特,因而成为对抗病毒的抗体之一,被用于某些病毒性疾病的预防及治疗。本文从纳米抗体的结构与特性、在口蹄疫诊断中的应用、在中和口蹄疫病毒中的作用以及在口蹄疫治疗中的展望等方面进行综述,探索其作为“探针”来诊断疾病的能力,以及将药物传递到机体内部,作为免疫抑制剂或治疗药物来中和病毒毒力的能力,以期为纳米抗体用于口蹄疫预防提供研发基础及创新思路。
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关键词
口蹄疫病毒
纳米抗体
诊断
治疗应用
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职称材料
题名
拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊毛囊特异表达载体的构建及其转基因细胞株的筛选
被引量：
2
1
作者
王海涛
孟凡华
房君
周欢敏
机构
内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第6期1-6,共6页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008008)
文摘
试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆,并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确,酶切得到正确目的条带,筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞,并在RNA水平表达,为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。
关键词
细毛羊
拟蜘蛛牵丝蛋白基因
毛囊特异表达
Keywords
fine wool sheep
spider dragline silk protein gene
speeially expressed in hair follicle
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定
被引量：
1
2
作者
房君
孟凡华
王海涛
周欢敏
机构
内蒙古农业大学
生命科学
学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
2013年第22期9305-9308,共4页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-008)
文摘
[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达。[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好(细胞生长曲线呈S型)、染色体数目为2n=54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA。[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础。
关键词
拟蜘蛛牵丝蛋白基因
细毛羊成纤维细胞
脂质体转染
鉴定
Keywords
Spider dragline silk-like protein gene
Fibroblast cell of fine wool sheep
Liposome transfection
Identification
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
纳米抗体在口蹄疫防治中的研究进展
3
作者
靳慧茹
武艺
贾婷
张宏亮
王申元
凌宇
刘羿羿
刘春霞
周欢敏
李璐
张焱如
曹俊伟
机构
内蒙古农业大学
生命科学
学院
赤峰市元宝山区农牧局
出处
《中国动物检疫》
CAS
2022年第11期89-95,共7页
基金
内蒙古自治区自然科学基金项目(2020MS03048)
内蒙古自治区研究生科研创新项目(S20210216Z)。
文摘
口蹄疫作为一种急性、热性和高度传染性疫病,目前尚缺乏长期有效且能完全抑制其病原的药物或疫苗。纳米抗体是一种新型基因工程抗体,具有生产成本低、与抗原亲和力高、特异性强、相对分子质量小等优点,且结构独特,因而成为对抗病毒的抗体之一,被用于某些病毒性疾病的预防及治疗。本文从纳米抗体的结构与特性、在口蹄疫诊断中的应用、在中和口蹄疫病毒中的作用以及在口蹄疫治疗中的展望等方面进行综述,探索其作为“探针”来诊断疾病的能力,以及将药物传递到机体内部,作为免疫抑制剂或治疗药物来中和病毒毒力的能力,以期为纳米抗体用于口蹄疫预防提供研发基础及创新思路。
关键词
口蹄疫病毒
纳米抗体
诊断
治疗应用
Keywords
FMDV
nanobody
diagnosis
therapeutic application
分类号
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊毛囊特异表达载体的构建及其转基因细胞株的筛选
王海涛
孟凡华
房君
周欢敏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定
房君
孟凡华
王海涛
周欢敏
《安徽农业科学》
CAS
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
纳米抗体在口蹄疫防治中的研究进展
靳慧茹
武艺
贾婷
张宏亮
王申元
凌宇
刘羿羿
刘春霞
周欢敏
李璐
张焱如
曹俊伟
《中国动物检疫》
CAS
2022
0
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职称材料
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