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绒山羊血浆中褪黑素含量的测定 被引量:1
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作者 常子丽 张文广 +10 位作者 王志新 张永斌 高爱琴 张燕军 丽春 刘兴亮 吴萍 刘维 苏蕊 蔡铁铁 李金泉 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第10期2535-2537,共3页
以绒山羊为试验材料,采用放射性免疫法测定了一个年周期内夜间绒山羊血浆中褪黑素的水平。结果发现,对照组一年内夜间血浆中褪黑素水平在7~30pg/mL之间,4月份和8月份血液中褪黑素含量较高,埋植组全年血浆中褪黑素平均为150.77pg/mL,平... 以绒山羊为试验材料,采用放射性免疫法测定了一个年周期内夜间绒山羊血浆中褪黑素的水平。结果发现,对照组一年内夜间血浆中褪黑素水平在7~30pg/mL之间,4月份和8月份血液中褪黑素含量较高,埋植组全年血浆中褪黑素平均为150.77pg/mL,平均高出对照组10.06倍,为进一步研究褪黑素与绒毛周期性生长的关系奠定基础。 展开更多
关键词 绒山羊 血浆 褪黑素 放免法
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绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究 被引量:1
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作者 栾兆进 赵勇超 +1 位作者 宋慧子 张家新 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2022年第8期8-14,26,共8页
【目的】利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)探究谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)的抗氧化功能。【方法】体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列(siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3),同时随机设计一段不与GPX5重... 【目的】利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)探究谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)的抗氧化功能。【方法】体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列(siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3),同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码(scramble)序列(siRNA-NC),采用瞬时转染法转染EECs,以正常的EECs为对照(CK),于转染34 h后取样,从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果。采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力,采用DCFH-DA探针法检测其活性氧(ROS)水平,采用TBA法检测其丙二醛(MDA)水平,采用免疫荧光法检测其8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。【结果】分离培养的细胞可与角蛋白18(CK18)特异性抗体反应,表明细胞为EECs,可用于后续试验。siRNA-N.3(即siRNA-GPX5)对EECs GPX5 mRNA和蛋白表达的干扰效果最优,可用于后续试验。随着过氧化氢(H_(2)O_(2))处理浓度的增加,与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降。与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)升高,8-OHdG水平明显上升。【结论】GPX5可以有效保护绵羊EECs,使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤。 展开更多
关键词 绵羊 附睾上皮细胞 谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5) 抗氧化能力
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p66Shc对绵羊早期胚胎发育的影响
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作者 赵勇超 张通 +3 位作者 王兆琛 刘春洁 张文广 张家新 《安徽农业科学》 CAS 2021年第20期108-112,133,共6页
[目的]探讨p66Shc对绵羊早期胚胎发育的影响。[方法]以受精后28 h为节点,将早期胚胎分为早卵裂胚胎和晚卵裂胚胎,观察不同时期卵裂胚胎的进一步发育情况,同时通过实时荧光定量PCR检测不同来源的4-8细胞阶段胚胎中p66Shc基因的表达水平;... [目的]探讨p66Shc对绵羊早期胚胎发育的影响。[方法]以受精后28 h为节点,将早期胚胎分为早卵裂胚胎和晚卵裂胚胎,观察不同时期卵裂胚胎的进一步发育情况,同时通过实时荧光定量PCR检测不同来源的4-8细胞阶段胚胎中p66Shc基因的表达水平;利用siRNA分子干扰技术将特异性siRNA分子通过显微注射到绵羊合子细胞质中,以敲减早期胚胎p66Shc基因;通过免疫荧光技术检测p66Shc基因对绵羊早期胚胎发育过程中活性氧(ROS)和氧化应激标记物(8-OHdG)表达的影响。[结果]早卵裂胚胎的囊胚发育率显著高于晚卵裂胚胎(P<0.05);晚卵裂胚胎中p66Shc mRNA表达水平显著高于早卵裂胚胎(P<0.05);将绵羊早期胚胎中的p66Shc基因敲减后,与对照组相比,其胚胎内p66Shc mRNA水平、p66Shc蛋白水平显著降低,ROS和8-OHdG水平显著低于对照组(P<0.05);基因敲减后桑椹胚发育率显著升高(P<0.05)。[结论]低水平的p66shc可以提高绵羊早期胚胎对氧化应激的抵抗力,并进一步提高其发育能力。 展开更多
关键词 绵羊 P66SHC 早期胚胎 卵裂 氧化应激
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