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布鲁菌BMEI1829基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验被引量：3: 1; 作者赵晓燕朱亮 +4 位作者姜德玉高啸段越强王希良李培锋《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期5-9,共5页; 利用PSORTb及CELLO生物学软件对布鲁菌16M菌株基因组序列进行分析,预测其外膜蛋白基因序列;选取BMEI1829基因进行PCR扩增并与原核表达载体pET32a(+)连接,转入E.coliBL21(DE3)感受态细胞;IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE分析及Western blot鉴... 展开更多; 关键词布鲁菌 BMEI1829基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬细小病毒上海分离株全基因的克隆及进化树分析被引量：15: 2; 作者郭伟商晓桂 +4 位作者单同领华修国杨志彪朱建国周雨霞《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第3期27-32,共6页; 为研究上海地区犬感染细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的基因特点和基因型,参考GenBank上细小病毒3个基因型的全基因设计6对扩增引物进行PCR,分段扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列并拼接,用MEGA软件、NJ法构建进化树。结果显示,... 展开更多; 关键词犬细小病毒上海 2a基因亚型进化树分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用被引量：4: 3; 作者商晓桂郭伟 +4 位作者杨莲茹杨志彪华修国朱建国崔立《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1049-1053,共5页; 本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化... 展开更多; 关键词 SYBR Green Ⅰ 猪星状病毒检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪卵母细胞的体外成熟影响因素的研究被引量：9: 4; 作者杨喜王志刚 +4 位作者刘丑生曹贵方王立贤赵俊金孟飞《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期74-76,共3页; 本试验研究了猪卵母细胞的体外成熟体系,着重研究了季节因素、FCS、pFF、胰岛素和17β-E2对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:①3月～4月和10月～11月卵母细胞成熟率最高,与其它月份相比差异显著(P<0.05);②卵泡期卵母细胞成熟率... 展开更多; 关键词猪卵母细胞体外培养胰岛素 17Β-E2; 在线阅读下载PDF 职称材料

小反刍兽疫H蛋白主要抗原表位的原核表达被引量：3: 5; 作者田晓灵赵永刚 +2 位作者宋厚辉王志亮王凤龙《中国动物检疫》 CAS 2009年第3期28-30,共3页; 目的表达小反刍兽疫病毒H蛋白的主要抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫病毒H基因的主要抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中扩增PPRV的H基因的主要抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,... 展开更多; 关键词小反刍兽疫 H基因表达抗原位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同地椒添加量对绵羊瘤胃内环境各项指标的影响及适宜添加量的筛选被引量：5: 6; 作者卢媛敖长金苏鹏程《饲料工业》北大核心 2003年第1期32-35,共4页; 将采自内蒙古武川县的地椒冻干制成冻干粉后分9个添加水平(0、31、41、51、62、72、82、92、102mg),按时间分为(4、9、15、24h)4个试验组,每组2个重复。测定每个时间点的产气量,培养液中瘤胃细菌-N产量,NDF、DM降解率总VFA产量及乙酸、... 展开更多; 关键词添加量绵羊地椒瘤胃内环境; 在线阅读下载PDF 职称材料

体外驱除瘤胃厌氧真菌对绵羊和山羊细菌、原虫及稻草干物质降解率的影响被引量：1: 7; 作者李大彪侯先志《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期43-48,共6页; 选择体况良好、体重30kg左右、安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古白绒山羊和内蒙古土种去势绵羊各3只作为供体羊,为体外批次培养提供瘤胃液。比较研究了驱除瘤胃厌氧真菌对绵羊和山羊细菌、原虫及稻草干物质降解率的影响。结果表明:对照组(F... 展开更多; 关键词真菌绵羊山羊细菌原虫; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽流感的诊断检测及防治研究进展被引量：9: 8; 作者索永兵樊树芳 +1 位作者陈化兰希尼尼根《畜牧兽医科技信息》 2008年第5期9-10,共2页; 高致病力禽流感(HPAI)被国际兽疫局列为A类烈性传染病,本文对HPAI的诊断检测技术及防制对策进行了综述,总结了禽流感诊断方法如病原学、血清学、分子生物学等方面的最新研究进展,分析了禽流感疫苗预防禽流感的效果和缺点。; 关键词禽流感诊断检测病原学血清学分子生物学防制; 在线阅读下载PDF 职称材料

小反刍兽疫病毒F蛋白抗原位点的克隆与表达: 9; 作者赵永刚田晓灵 +2 位作者宋厚辉王志亮吴树清《中国动物检疫》 CAS 2009年第7期23-25,共3页; 目的表达小反刍兽疫F蛋白的抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫的抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中PPRV的F基因的抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重... 展开更多; 关键词小反刍兽疫病毒 F基因原核表达抗原位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名布鲁菌BMEI1829基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验被引量：3: 1; 作者赵晓燕朱亮姜德玉高啸段越强王希良李培锋; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室中国农业大学农学与生物技术学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期5-9,共5页; 基金国家973计划资助项目(2010CB530202); 文摘利用PSORTb及CELLO生物学软件对布鲁菌16M菌株基因组序列进行分析,预测其外膜蛋白基因序列;选取BMEI1829基因进行PCR扩增并与原核表达载体pET32a(+)连接,转入E.coliBL21(DE3)感受态细胞;IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定目的蛋白的表达;经His-TrapTMHP纯化,免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测特异性抗体。结果表明,BMEI1829蛋白在原核表达系统中成功表达,纯化后蛋白免疫Balb/c小鼠可产生特异性抗体,抗体亚型分布以IgG1、IgG2b为主,为进一步研究其功能奠定了基础。; 关键词布鲁菌 BMEI1829基因原核表达; Keywords Brucella BMEI1829 gene prokaryotic expression; 分类号 S852.614 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬细小病毒上海分离株全基因的克隆及进化树分析被引量：15: 2; 作者郭伟商晓桂单同领华修国杨志彪朱建国周雨霞; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院上海交通大学农业与生物学院; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第3期27-32,共6页; 文摘为研究上海地区犬感染细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的基因特点和基因型,参考GenBank上细小病毒3个基因型的全基因设计6对扩增引物进行PCR,分段扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列并拼接,用MEGA软件、NJ法构建进化树。结果显示,犬细小病毒全基因为4 758bp,命名为CPV-SH,提交到GenBank上的序列号为FJ792845,与GenBank中4种基因型犬细小病毒的VP2基因核苷酸序列同源性比较发现,CPV-SH克隆与2a亚型犬细小病毒核苷酸同源性为最高99.7%,与2型、2b亚型、2c亚型的同源性分别为98.8%、99.5%、99.5%。CPV-SH属于2a亚型犬细小病毒,与国内北京分离株CPV/BJ082亲缘关系最近,同源性为99.9%。; 关键词犬细小病毒上海 2a基因亚型进化树分析; Keywords Canine parvovirus Shanghai genotype 2a phylogenetic tree; 分类号 S858.292.265.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用被引量：4: 3; 作者商晓桂郭伟杨莲茹杨志彪华修国朱建国崔立; 机构上海交通大学农业与生物学院内蒙古农业大学动物医学与科学学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1049-1053,共5页; 文摘本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异性和重复性进行验证。结果表明,猪星状病毒荧光定量PCR的标准曲线Ct值与模板浓度呈良好的线性关系,熔解曲线特异,灵敏度可达1×101拷贝,是普通PCR检测方法的100倍,特异性和重复性较好。本次建立的猪星状病毒荧光定量PCR检测方法具有快速、简便、敏感等优点,有重要的实用价值。; 关键词 SYBR Green Ⅰ 猪星状病毒检测; Keywords SYBR Green Ⅰ porcine astrovirus detection; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪卵母细胞的体外成熟影响因素的研究被引量：9: 4; 作者杨喜王志刚刘丑生曹贵方王立贤赵俊金孟飞; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院全国畜牧兽医总站畜禽牧草资源中心中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期74-76,共3页; 基金科技部十五攻关项目"猪的胚胎冷冻技术的研究" 农业部畜禽牧草品种资源保护项目资助; 文摘本试验研究了猪卵母细胞的体外成熟体系,着重研究了季节因素、FCS、pFF、胰岛素和17β-E2对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:①3月～4月和10月～11月卵母细胞成熟率最高,与其它月份相比差异显著(P<0.05);②卵泡期卵母细胞成熟率和卵裂率均显著高于黄体期;③添加10%FCS、10%pFF、20%FCS和10%FCS+10%pFF的卵裂率差异不显著(P>0.05),添加10%FCS或10%pFF的成熟率差异不显著,与添加20%FCS或10%FCS+10%pFF成熟率差异显著;④培养液中添加一定量的胰岛素和17β-E2有助于提高成熟率和卵裂率。; 关键词猪卵母细胞体外培养胰岛素 17Β-E2; 分类号 S814.8 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小反刍兽疫H蛋白主要抗原表位的原核表达被引量：3: 5; 作者田晓灵赵永刚宋厚辉王志亮王凤龙; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院中国动物卫生与流行病学中心中国科学院青岛生物能源与过程研究所; 出处《中国动物检疫》 CAS 2009年第3期28-30,共3页; 文摘目的表达小反刍兽疫病毒H蛋白的主要抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫病毒H基因的主要抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中扩增PPRV的H基因的主要抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中,经不同浓度的IPTG诱导表达PPRVH基因的主要抗原位点;用SDS-PAGE和Western-blotting分析所有蛋白的表达。结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-H66-249和PET-28b-H281-550酶切后,均出现预期相符的片段;DNA测序表明插入片段的序列与小反刍兽疫H蛋白基因完全一致,其大小分别为569bp和831bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和Western-blotting检测,证明所有的蛋白均得到表达。结论成功表达了PPRVH基因的主要抗原蛋白,为日后的检测与预防工作奠定了基础。; 关键词小反刍兽疫 H基因表达抗原位点; Keywords peste des petits ruminants （PPRV） H gene express antigen epitope; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同地椒添加量对绵羊瘤胃内环境各项指标的影响及适宜添加量的筛选被引量：5: 6; 作者卢媛敖长金苏鹏程; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院; 出处《饲料工业》北大核心 2003年第1期32-35,共4页; 文摘将采自内蒙古武川县的地椒冻干制成冻干粉后分9个添加水平(0、31、41、51、62、72、82、92、102mg),按时间分为(4、9、15、24h)4个试验组,每组2个重复。测定每个时间点的产气量,培养液中瘤胃细菌-N产量,NDF、DM降解率总VFA产量及乙酸、丙酸、丁酸产量和乙酸/丙酸值,以确定地椒的最适添加量,及其在不同时间点的降解水平。实验结果表明,添加不同水平的地椒对产气量、DM、NDF降解率以及VFA的各项指标和细菌-N产量都有不同程度的影响。根据各项测定结果综合分析,适宜的地椒添加范围为:41.3～68g/kg。; 关键词添加量绵羊地椒瘤胃内环境; 分类号 S826.5 [农业科学—畜牧学] S816.7 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名体外驱除瘤胃厌氧真菌对绵羊和山羊细菌、原虫及稻草干物质降解率的影响被引量：1: 7; 作者李大彪侯先志; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院; 出处《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期43-48,共6页; 基金内蒙古科技厅科技攻关项目(20020607)资助。; 文摘选择体况良好、体重30kg左右、安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古白绒山羊和内蒙古土种去势绵羊各3只作为供体羊,为体外批次培养提供瘤胃液。比较研究了驱除瘤胃厌氧真菌对绵羊和山羊细菌、原虫及稻草干物质降解率的影响。结果表明:对照组(F0组)绵羊瘤胃液中真菌游动孢子数量多于对照组山羊瘤胃液;且在培养的2、4、6、48、72小时差异显著(P<0.05)。在培养初期(0～12小时)山羊F0组和F2组(驱真菌组)细菌总数均高于绵羊;绵羊和山羊驱真菌组(F2组)细菌总数均高于对照组(F0组)。山羊F0组(对照组)原虫数量各时间点的平均数显著高于绵羊F0组(P<0.05)。驱除厌氧真菌后绵羊和山羊对稻草干物质降解率显著下降,分别下降了12.06%和8.62%。这说明瘤胃厌氧真菌在纤维物质降解过程中的确发挥了重要作用。; 关键词真菌绵羊山羊细菌原虫; Keywords fungi sheep goats bacteria protozoa; 分类号 S826.5 [农业科学—畜牧学] S827.5 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感的诊断检测及防治研究进展被引量：9: 8; 作者索永兵樊树芳陈化兰希尼尼根; 机构内蒙古农业大学动物医学与科学学院传染病实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室; 出处《畜牧兽医科技信息》 2008年第5期9-10,共2页; 文摘高致病力禽流感(HPAI)被国际兽疫局列为A类烈性传染病,本文对HPAI的诊断检测技术及防制对策进行了综述,总结了禽流感诊断方法如病原学、血清学、分子生物学等方面的最新研究进展,分析了禽流感疫苗预防禽流感的效果和缺点。; 关键词禽流感诊断检测病原学血清学分子生物学防制; 分类号 S855 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小反刍兽疫病毒F蛋白抗原位点的克隆与表达: 9; 作者赵永刚田晓灵宋厚辉王志亮吴树清; 机构中国动物卫生与流行病学中心内蒙古农业大学动物医学与科学学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 2009年第7期23-25,共3页; 文摘目的表达小反刍兽疫F蛋白的抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫的抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中PPRV的F基因的抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中,经ITPG诱导表达PPRVF基因的抗原位点;用SDS-PAGE和Western-Blotting分析抗原位点蛋白的表达。结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-F35-111(pZLW013)、PET-28b-F143-485(pZLW014)和PET-28b-F323-485(pZLW015)酶切后,均出现与预期相符的片段;DNA测序表明插入的片段的序列与小反刍兽疫F基因的抗原位点序列分别完全一致,其大小分别为251bp、1053bp和514bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和West-ern-Blotting分析,证明小反刍兽疫抗原位点F35-111没有表达、抗原位点F143-485和F323-485得到表达。结论成功表达了PPRVF基因的两段抗原位点蛋白,为日后检测与预防工作奠定了基础。; 关键词小反刍兽疫病毒 F基因原核表达抗原位点; Keywords Peste des petits ruminants virus （PPRV） F gene Prokaryotic expression Antigen epitope; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	布鲁菌BMEI1829基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验	赵晓燕朱亮姜德玉高啸段越强王希良李培锋	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	犬细小病毒上海分离株全基因的克隆及进化树分析	郭伟商晓桂单同领华修国杨志彪朱建国周雨霞	《中国动物传染病学报》 CAS	2009	15	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用	商晓桂郭伟杨莲茹杨志彪华修国朱建国崔立	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪卵母细胞的体外成熟影响因素的研究	杨喜王志刚刘丑生曹贵方王立贤赵俊金孟飞	《中国畜牧兽医》 CAS	2007	9	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小反刍兽疫H蛋白主要抗原表位的原核表达	田晓灵赵永刚宋厚辉王志亮王凤龙	《中国动物检疫》 CAS	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	不同地椒添加量对绵羊瘤胃内环境各项指标的影响及适宜添加量的筛选	卢媛敖长金苏鹏程	《饲料工业》北大核心	2003	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	体外驱除瘤胃厌氧真菌对绵羊和山羊细菌、原虫及稻草干物质降解率的影响	李大彪侯先志	《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	禽流感的诊断检测及防治研究进展	索永兵樊树芳陈化兰希尼尼根	《畜牧兽医科技信息》	2008	9	在线阅读下载PDF 职称材料
9	小反刍兽疫病毒F蛋白抗原位点的克隆与表达	赵永刚田晓灵宋厚辉王志亮吴树清	《中国动物检疫》 CAS	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料