校企合作赋能兽医影像学实验课教学改革的探索与实践——以内蒙古农业大学瑞派动物医院为例

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作者 王宇 刘行健 呼格吉乐图 《养殖与饲料》 2025年第4期143-146,共4页

[目的]提升学生专业素养,探索兽医影像学教学模式改革与创新的路径。[方法]以内蒙古农业大学兽医学院为例,以提升学生素质、贴近实际需求为目标,通过校企合作的方式从考核标准、开展方式、教育方式等方面对兽医影像学实验课教学进行深... [目的]提升学生专业素养,探索兽医影像学教学模式改革与创新的路径。[方法]以内蒙古农业大学兽医学院为例,以提升学生素质、贴近实际需求为目标,通过校企合作的方式从考核标准、开展方式、教育方式等方面对兽医影像学实验课教学进行深化改革。[结果]探索出了一种目前较为适合于内蒙古农业大学兽医影像学的教学模式,使用该模式教学后,兽医影像学的课程质量有了质的提升,学生对课程的满意度和掌握度有了明显的提高。[结论]该模式的施行为兽医行业的影像学人才培养提供了很好的教育环境,为未来技能型学科的教学提供了可借鉴的路径。 展开更多

关键词 兽医影像学 校企合作 实践能力 教学方法 课程改革

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内蒙古牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定及其全基因组分析 被引量：5

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作者 黄金田 李静 +3 位作者 丁玉林 王文龙 高娃 王金玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期476-483,共8页

为确定引起内蒙古地区3月龄~6月龄荷斯坦犊牛暴发呼吸系统疾病的病原,并分析其基因组序列,本研究对病死犊牛剖检并观察其各脏器的剖检病变,制备各组织病理切片,观察其组织病变。结果可见犊牛肺脏呈深红色有光泽的肌肉样实变,心脏肥大,... 为确定引起内蒙古地区3月龄~6月龄荷斯坦犊牛暴发呼吸系统疾病的病原,并分析其基因组序列,本研究对病死犊牛剖检并观察其各脏器的剖检病变,制备各组织病理切片,观察其组织病变。结果可见犊牛肺脏呈深红色有光泽的肌肉样实变,心脏肥大,肝脏表面散在细小的结节状灰白色病灶,肾脏表面散在细小深红色出血点;组织病理学观察可见典型间质性肺炎,多数各级细支气管腔和肺泡腔内巨噬细胞和淋巴细胞大量增生和浸润,偶见合胞体细胞,在各级细支气管部分黏膜上皮细胞浆内有大小不等的圆形红染的病毒包涵体;轻度纤维化和小坏死灶的变质性肝炎,急性炎性脾肿,多发性小出血灶的慢性硬化性肾小球肾炎。进一步进行RT-PCR检测,结果显示,扩增获得约600 bp的目的条带,测序后与GenBank中相关基因序列比对,结果显示目的基因与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)美国分离株USII/S1(KU159366)的同源性最高(98.42%),表明该地区某牧场犊牛感染了BRSV。将该病例肺组织研磨上清液接种牛肾细胞(MDBK)盲传3代出现典型的细胞病变,经RT-PCR检测确认为BRSV,进一步表明分离到1株BRSV,命名为IM BRSV-39。分段扩增IM BRSV-39株的全基因组序列,经测序后拼接获得长度为15130 bp的BRSV全基因组序列。采用MegAlign软件分析IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因序列和F基因序列的同源性及突变位点;采用MEGA 11软件构建分离株全基因组进化树分析其遗传进化关系。结果显示,IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因和F基因序列均与BRSVⅢ亚型分离株相应基因序列的同源性最高、且位于同一进化分支,证实IM BRSV-39株属于BRSVⅢ亚型;突变位点分析结果显示:与BRSVⅢ亚型参考株相比,IM BRSV-39株G基因序列存在7个突变位点,F基因序列存在12个突变位点;G蛋白氨基酸序列存在4个突变位点,其中L13H处在G蛋白的胞质结构域(aa1~aa37);Y^(127)H、I^(139)T、P^(177)L、A^(186)T处在G蛋白的胞外结构域(aa66~aa257);F蛋白氨基酸序列存在5个氨基酸突变位点,其中M^(4)T、M^(7)T、S^(14)C处在F蛋白氨基末端信号肽区(aa1~aa26)。本研究检测并分离到1株BSRV,揭示了该病毒基因组的遗传进化特征,为国内BRSV的深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 病毒包涵体 牛呼吸道合胞体病毒 全基因组 遗传进化

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内蒙古地区神经致病型马疱疹病毒1型的分离与鉴定

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作者 冯心如 刘佳利 +5 位作者 李静 丁玉林 王文龙 高娃 张迪 王金玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期636-640,共5页

为调查内蒙古四子王旗某马场马流产是否由马疱疹病毒1型(EHV-1)感染导致,本研究采集该场马流产胎儿肝、脾等组织,将组织研磨上清液接种MDBK细胞,盲传5代,待出现细胞病变时收集细胞及培养上清,通过gB基因的PCR及透射电镜对分离病毒进行鉴... 为调查内蒙古四子王旗某马场马流产是否由马疱疹病毒1型(EHV-1)感染导致,本研究采集该场马流产胎儿肝、脾等组织,将组织研磨上清液接种MDBK细胞,盲传5代,待出现细胞病变时收集细胞及培养上清,通过gB基因的PCR及透射电镜对分离病毒进行鉴定,采用2代测序技术对分离病毒全基因组测序,并进行分离病毒gB基因的同源性及遗传进化分析。采用SnapGene6.0.2软件分析分离病毒ORF30基因及其编码氨基酸序列。结果显示,组织上清液接种MDBK细胞并盲传5代后,细胞出现典型的圆缩、融合、脱落和聚堆成葡萄串状等细胞病变特征;EHV-1 gB基因的PCR检测结果呈阳性;电镜观察可见疱疹病毒典型的形态特征,表明分离到1株EHV-1,命名为EHV-1-NM2021。同源性分析结果显示:分离株EHV-1-NM2021 gB基因序列与国内外EHV-1参考株gB基因序列的同源性为97.7%~100%;构建gB基因的系统发育进化树,结果显示该基因与EHV-1德国株(RacL11)、澳大利亚株(438-77)处于同一进化分支,亲缘关系较近。此外,ORF30基因序列及氨基酸序列比对结果显示,EHV-1-NM2021 ORF30基因nt2254为鸟嘌呤(G),aa752为天冬氨酸(D),该分离株为神经致病型病毒。本研究首次在内蒙古鉴定并分离到神经致病型EHV-1,丰富了国内EHV-1的流行病学数据库,为EHV-1感染所导致马流产的防控奠定了研究基础。 展开更多

关键词 马流产 神经致病型马疱疹病毒1型 遗传进化

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奶山羊接种布鲁氏菌S2疫苗后全血和羊乳中菌体驻留的研究

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作者 张雅婷 陈兰 +5 位作者 陈昕迪 王腾宇 曹天宇 于宇 张慧忠 王文龙 《动物医学进展》 北大核心 2025年第9期46-51,共6页

为评价奶山羊接种布鲁氏菌S2疫苗后全血和羊乳样本中疫苗菌体驻留情况及检样中提取DNA的最佳得率,分别采集布鲁氏菌抗体呈阳性和阴性的全血和羊乳样本各10份,提取全血及羊乳中的全基因组DNA,根据实验室建立的实时荧光定量PCR(qPCR)方法... 为评价奶山羊接种布鲁氏菌S2疫苗后全血和羊乳样本中疫苗菌体驻留情况及检样中提取DNA的最佳得率,分别采集布鲁氏菌抗体呈阳性和阴性的全血和羊乳样本各10份,提取全血及羊乳中的全基因组DNA,根据实验室建立的实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测全血和羊乳中是否含有布鲁氏菌疫苗菌;分析全血和羊乳qPCR检测中Ct值差异,评价2种样本中的菌体载量。结果显示,从羊乳不同组分中提取全基因组DNA,以离心后沉淀中菌体核酸含量最高。在10只布鲁氏菌抗体呈阳性的全血样本中,均检测到S2疫苗菌;在10只布鲁氏菌抗体呈阳性的羊乳样本中,9份样本检测到布鲁氏菌S2疫苗株核酸信号,羊乳Ct值低于全血的Ct值。布鲁氏菌抗体呈阴性的全血和羊乳样本中,3份样本检测到S2疫苗株核酸信号。结果表明,该研究成功检测到奶山羊全血和羊乳中S2疫苗菌体驻留,试验结果可为奶山羊布鲁氏菌病的免疫防控提供参考。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 羊乳 菌体驻留检测 实时荧光定量PCR

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棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配杀蝇蛆的增效作用 被引量：1

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作者 李倩楠 马园 +5 位作者 郝陆瑶 张艳妮 郭志凯 丁玉林 杜山 王瑞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期78-83,共6页

为了研究棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)与高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)复配在蝇蛆防控中的应用,试验测定了高效氯氰菊酯和棕色绿僵菌的相容性,以及单一棕色绿僵菌组、棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配制剂组杀蝇蛆毒性试验。结果表... 为了研究棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)与高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)复配在蝇蛆防控中的应用,试验测定了高效氯氰菊酯和棕色绿僵菌的相容性,以及单一棕色绿僵菌组、棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯复配制剂组杀蝇蛆毒性试验。结果表明,即使在较高浓度的下,高效氯氰菊酯对棕色绿僵菌的菌丝生长情况、孢子萌发率和孢子产量等无显著影响;高效氯氰菊酯与棕色绿僵菌联合使用确实可以增加棕色绿僵菌对蝇蛆的致死率,其中孢子浓度为1×10^(8)个/mL、1×10^(7)个/mL对蝇蛆的累计死亡率分别从90.0%、86.7%提高到100%;孢子浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(4)个/mL的累计死亡率分别从86.7%、50%和36.7%提高到93.3%、70%和63.3%。说明棕色绿僵菌与高效氯氰菊酯相容性良好,可以一起使用。低剂量的高效氯氰菊酯与棕色绿僵菌联用应用可以降低高效氯氰菊酯的使用量并提高生物防治效果。 展开更多

关键词 棕色绿僵菌 高效氯氰菊酯 蝇蛆 生物防治 增效作用

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捕食性真菌与植物单宁联合制剂对绵羊消化道线虫的杀灭效果

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作者 李倩楠 马园 +5 位作者 郝陆瑶 张艳妮 郭志凯 丁玉林 杜山 王瑞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期137-140,共4页

为了测试捕食线虫性真菌(Duddingtonia flagrans)及植物单宁对绵羊消化道线虫的杀灭效果,在制备伊维菌素、捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans及植物单宁片剂与联合制剂的基础上,进行了绵羊消化道线虫的防控试验,并通过EPG的计数评测... 为了测试捕食线虫性真菌(Duddingtonia flagrans)及植物单宁对绵羊消化道线虫的杀灭效果,在制备伊维菌素、捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans及植物单宁片剂与联合制剂的基础上,进行了绵羊消化道线虫的防控试验,并通过EPG的计数评测驱虫效果。结果表明,成功制备了生物制剂与药物的联合制剂,动物试验表明该制剂具有一定杀虫效果。试验发现单宁酸有一定驱线虫作用;植物单宁、驱虫药与捕食性真菌联合制剂的防治效果优于单一组分组。试验结果为绵羊消化道线虫防治提供了新方法,为植物源杀虫活性物质研究提供了参考数据。 展开更多

关键词 捕食线虫性真菌 Duddingtonia flagrans 单宁酸 联合制剂 线虫

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捻转血矛线虫虫卵孵化及幼虫L3培养条件的优化

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作者 马梅清 贾晓晴 +9 位作者 马园 郝陆瑶 张艳妮 李倩楠 李炎夫 邵瑾 杜山 丁玉林 张磊 王瑞 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期73-76,共4页

捻转血矛线虫病是由捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)寄生于牛、羊等反刍动物的皱胃所引起的一类消化道线虫病。为了优化捻转血矛线虫的体外培养技术,得到纯化的虫株以及稳定的样品,为捻转血矛线虫抗原和基因的分离鉴定、病原检测、... 捻转血矛线虫病是由捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)寄生于牛、羊等反刍动物的皱胃所引起的一类消化道线虫病。为了优化捻转血矛线虫的体外培养技术,得到纯化的虫株以及稳定的样品,为捻转血矛线虫抗原和基因的分离鉴定、病原检测、疫苗研制及虫体耐药性试验奠定基础。论文对培养基类型、培养液体积、抗生素及二甲基亚砜(DMSO)对捻转血矛线虫卵孵化和虫体生长发育的影响。结果表明,NCTC-109培养基可作为捻转血矛线虫体外培养的首选培养基,200μL培养液体积为最佳培养体积,青-链霉素及两性霉素B的终浓度分别不得超过20%及6.25%,DMSO终浓度要控制在0.625%以下。不同培养基及浓度,常用的抗菌药物和DMSO对捻转血矛线虫的发育均有不同程度的毒性。 展开更多

关键词 捻转血矛线虫 体外培养 二甲基亚砜 NCTC-109

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布鲁氏菌A19疫苗株全基因组测序及比较基因组学分析 被引量：7

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作者 王姝懿 赵学亮 +2 位作者 孙柯 呼和巴特尔 王文龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1002-1008,共7页

目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基... 目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基因,GC含量57.25%。通过注释COG库,对应基因有2560个,将其归入22类COG中;根据比对KEGG库,得到2544个基因,共参与33类代谢通路。结果综合两个数据库结果发现,大多数A19预测基因中的基因功能主要与膜运输、氨基酸转运及碳水化合物代谢有关。结论通过分析发现,A19和猪羊牛种布鲁氏菌之间存在一定差异,并找出牛种毒力基因。本实验通过测序A19全基因组,为布鲁菌疫苗的研究提供思路。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 布鲁菌疫苗株A19 全基因组测序 比较基因组学研究

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牛磺鹅去氧胆酸对糖皮质激素受体的激活作用 被引量：2

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作者 李磊 刘畅 +3 位作者 毛伟 关红 何秀玲 李培锋 《动物医学进展》 北大核心 2019年第7期82-86,共5页

旨在研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的活化作用,进而阐明TCDCA作用机制。采用分子对接模拟TCDCA与GR的结合情况,并通过构建含有GFP标签的GR真核表达质粒,经瞬时转... 旨在研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的活化作用,进而阐明TCDCA作用机制。采用分子对接模拟TCDCA与GR的结合情况,并通过构建含有GFP标签的GR真核表达质粒,经瞬时转染HEK-293T细胞,观察TCDCA对GR核移位的影响。结果表明TCDCA(1mmol/L)可与GR发生结合并激活GR,产生核移位,证明TCDCA抗炎免疫调节作用与其活化GR信号通路相关。 展开更多

关键词 牛磺鹅去氧胆酸 糖皮质激素受体 分子对接

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捻转血矛线虫耐药相关基因P450原核表达及其生物信息学分析 被引量：3

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作者 王文龙 苏倩 +4 位作者 赵学亮 孙柯 翟帅 王腾宇 呼和巴特尔 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1181-1184,共4页

为表达捻转血矛线虫P450蛋白并分析其生物信息学特性,本研究利用RT-PCR扩增捻转血矛线虫P450基因,构建重组质粒pET-P450,经双酶切鉴定,将其转化大肠杆菌后,采用SDS-PAGE检测P450蛋白的表达;利用生物信息学软件对P450蛋白的理化性质、结... 为表达捻转血矛线虫P450蛋白并分析其生物信息学特性,本研究利用RT-PCR扩增捻转血矛线虫P450基因,构建重组质粒pET-P450,经双酶切鉴定,将其转化大肠杆菌后,采用SDS-PAGE检测P450蛋白的表达;利用生物信息学软件对P450蛋白的理化性质、结构特点进行分析。结果显示,正确构建了重组质粒pET-P450且P450蛋白以包涵体的形式表达。生物信息学分析结果显示,P450蛋白分子式为C1154H1812N314O330S15,为不稳定蛋白、无跨膜区、无信号肽,是一种含较多抗原表位的亲水性蛋白,有7个B细胞抗原表位和11个T细胞抗原表位,有望用作捻转血矛线虫耐药性的诊断抗原。本研究获得了P450重组蛋白,为捻转血矛线虫耐药性快速检测方法和新药开发奠定物质基础。 展开更多

关键词 捻转血矛线虫 P450基因 原核表达 生物信息学分析

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猫传染性腹膜炎病毒的检测及ORF 7 ab、N和S基因遗传进化分析 被引量：2

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作者 高雅 黄金田 +5 位作者 冯心如 付胜 高娃 王文龙 丁玉林 王金玲 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期60-65,共6页

采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个... 采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个病例均表现典型的混合型FIP的大体病变,腹腔积满浆液纤维素性渗出物,在腹腔浆膜面散在或弥漫分布细小的灰白色结节。组织病理学显示腹膜表面上附着大小不等的炎性细胞浸润灶,以及坏死性肠炎、间质性胰腺炎和间质性肺炎。免疫组织化学染色结果显示,FPIV特异性的强阳性信号见于炎性细胞浸润灶、脾脏和胰腺内。基因同源性和遗传进化分析结果显示,2例基因均属于FCoVⅠ型。IMAU No.11685与浙江杭州ZJU1709毒株(MT239440)同源性最高,亲缘关系最近;IMAU No.11824与湖北武汉QS毒株(MW030108)同源性最高,亲缘关系最近。说明2例FIPV与国内流行毒株起源于共同祖先,其中ORF 7 ab、N基因相对保守,变异不明显,S基因发生一定的变异。研究结果可为我国FIP的分子流行病学研究和防控提供参考。 展开更多

关键词 猫传染性腹膜炎 猫传染性腹膜炎病毒 免疫组织化学 遗传进化

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致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌Csa1A、Hlɑ和EsxA-B重组蛋白的表达及免疫效果的评价 被引量：3

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作者 王宇 段跃强 李建云 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期867-872,共6页

为评价金黄色葡萄球菌(S. aureus)Csa1A、Hlɑ和EsxA-B蛋白的免疫保护作用,本研究构建了重组质粒p GEX-4T-2-Csa1A、pET-22b-Hlα、pGEX-4T-2-EsxA-B并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并利用相应层析柱纯化后,采用SDS-PAGE检测重... 为评价金黄色葡萄球菌(S. aureus)Csa1A、Hlɑ和EsxA-B蛋白的免疫保护作用,本研究构建了重组质粒p GEX-4T-2-Csa1A、pET-22b-Hlα、pGEX-4T-2-EsxA-B并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并利用相应层析柱纯化后,采用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。结果显示,获得了纯度较高的重组蛋白Csa1A(rCsa1A)、Hlɑ(r Hlɑ)和EsxA-B(r EsxA-B),纯度分别为89%、95%、85%,大小分别为54 ku、33 ku和39 ku。以纯化的r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B 60μg/只分别免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔14 d,采用间接ELISA法检测各组小鼠免疫后14 d的抗体效价。结果显示,3种重组蛋白免疫后均能刺激小鼠产生较高效价的抗体,三免后抗体效价分别为1:14 700(rCsa1A)、1:16 890(rHlɑ)、1:15 760(rEsxA-B)。利用5型NM2株(2×10^(7)cfu/只)、8型LZ145株(2×10^(7)cfu/只)、336型XJ44株(2×10^(7)cfu/只)3种血清型S. aureus分别经尾静脉注射攻菌,观察并统计各组小鼠的发病和死亡率,评价各重组蛋白的免疫保护率。结果显示,分别经原核表达了rCsa1A、rHlɑ和rEsxAB。攻菌后对照组小鼠全部死亡;3组重组蛋白免疫组96 h内死亡的小鼠在攻菌48 h后出现精神沉郁,食欲不振等症状,而存活小鼠未出现临床症状。r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B免疫组小鼠提供的抵抗NM2、LZ145、XJ44菌株攻击的保护率分别为60%、60%、50%;80%、70%、70%;50%、60%、60%,其中rHlα的免疫保护效果最佳,其对3种攻毒菌株提供的平均保护率为73.3%,是较为理想的亚单位疫苗候选抗原。以上结果表明,S. aureus rHlα能够刺激免疫小鼠产生抗体,对小鼠提供不同程度的保护力。本研究为奶牛乳腺炎S. aureus亚单位疫苗的研制和应用提供参考依据。 展开更多

关键词 奶牛乳腺炎 金黄色葡萄球菌 α-溶血素 亚单位疫苗 免疫原性 免疫保护力

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牛嵴病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：1

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作者 赵润涛 特木尔巴根 +7 位作者 郭宇 武娅楠 王旭芬 侯琳 张贺 赵洋 张志丹 周伟光 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期851-856,共6页

【目的】建立一种快速、准确且能定量分析牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的检测方法。【方法】根据GenBank上发布的牛嵴病毒3D基因序列设计合成一对特异性引物和一条探针,通过优化反应体系建立牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法... 【目的】建立一种快速、准确且能定量分析牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的检测方法。【方法】根据GenBank上发布的牛嵴病毒3D基因序列设计合成一对特异性引物和一条探针,通过优化反应体系建立牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,并对临床样品进行检测。【结果】该方法最佳上下游引物浓度均为300nmol·L^(-1),探针浓度为400 nmol·L^(-1),在1×10^(1)~1×10^(8)copies·μL^(-1)呈现良好的线性关系,线性相关系数R^(2)=0.999,扩增效率为103%;特异性较强,在多个犊牛腹泻相关病原中,只检测出牛嵴病毒;敏感性较高,对BKoV质粒标准品最低检测下限为1×10^(1)copies·μL^(-1),而普通RT-PCR对BKoV质粒标准品最低检测下限为1×10^(2)copies·μL^(-1);重复性较好,组内变异系数和组间变异系数均小于3%。2021年3~5月采自内蒙古地区牧场的37份犊牛粪样中BKoV的检出率为24.3%,通过标准曲线计算其病毒载量,其中腹泻粪样平均病毒载量为3.7×10^(5)copies·μL^(-1),健康犊牛粪样平均病毒载量为8.65×10^(3)copies·μL^(-1)。【结论】建立的牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、稳定性好、灵敏度高,为BKoV的检测和分子流行病学调查提供了有力的手段。 展开更多

关键词 牛嵴病毒 荧光定量RT-PCR 犊牛腹泻 特异性 敏感性 重复性

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4℃无氧保存时间对绵羊粪便中线虫卵孵化率的影响 被引量：1

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作者 吕旭 苏倩 +3 位作者 刘晓磊 陆静 方伟 王文龙 《中国动物检疫》 CAS 2019年第9期74-77,共4页

为评估4℃无氧环境中绵羊粪便保存时间对虫卵孵化率的影响,将新鲜绵羊粪便混合均匀后,等分为8份保存,分别测定保存0、3、6、9、12、15、18和21d的虫卵孵化率。参考并改进世界兽医寄生虫学促进协会(WAAVP)推荐的虫卵孵化试验(egghatchtes... 为评估4℃无氧环境中绵羊粪便保存时间对虫卵孵化率的影响,将新鲜绵羊粪便混合均匀后,等分为8份保存,分别测定保存0、3、6、9、12、15、18和21d的虫卵孵化率。参考并改进世界兽医寄生虫学促进协会(WAAVP)推荐的虫卵孵化试验(egghatchtest,EHT)方法,收集线虫虫卵,用24孔培养板孵化虫卵进行重复性试验,记录线虫卵孵化率,并对数据进行统计分析。结果显示,4℃无氧环境中,保存9d内粪便的线虫卵孵化率可达到50.51%,9d后孵化率急剧下降。结果表明,4℃无氧环境中保存9d的新鲜粪便仍有50%以上的虫卵孵化率,可用于相关试验和研究。这种保存方法,延长了新鲜绵羊粪便采集后的有效使用时间,简便易行,对相关试验或研究提供了极大帮助。 展开更多

关键词 消化道线虫 虫卵孵化试验 耐药检测 孵化率

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