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艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性研究 被引量:3
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作者 马雪瑛 郑荣梁 孟筱琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期458-461,共4页
目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] ... 目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] Uridine(尿嘧啶 )测定细胞膜损伤 ,光学、荧光显微镜观察细胞的形态变化等方法测定比较A毒素对TPC 1细胞 (人甲状腺乳头癌细胞 )和Vero细胞 (非洲绿猴肾细胞 )的作用。结果 在A毒素的作用下 ,TPC 1细胞的增长抑制、凋亡指数、细胞脱落率及细胞膜损伤情况均高于Vero细胞 ,且这种作用具有时间和剂量依赖性。结论 A毒素对TPC 1细胞的杀伤作用远大于对Vero细胞的作用。以上结果对细菌毒素的开发利用。 展开更多
关键词 艰难梭菌 A毒素 抗肿瘤活性
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多重聚合酶链式反应检测C、D型肉毒神经毒素基因 被引量:6
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作者 王兴民 孟筱琦 王成怀 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期14-16,共3页
目的为了建立检测C、D型肉毒神经素基因的PCR方法。方法用人工合成的两对寡核苷酸引物于同一反应管中扩增C、D型肉毒素基因的一段DNA片断,建立了用于C、D型肉毒神经毒素基因检测的多重PCR方法。用多重聚合酶链式反应对... 目的为了建立检测C、D型肉毒神经素基因的PCR方法。方法用人工合成的两对寡核苷酸引物于同一反应管中扩增C、D型肉毒素基因的一段DNA片断,建立了用于C、D型肉毒神经毒素基因检测的多重PCR方法。用多重聚合酶链式反应对梭状芽胞杆菌属的10种26株菌进行了鉴定,并对其特异性及灵敏度进行了检查。结果当样本中同时含有C、D型的模板DNA时用该PCR系统可同时扩增出C、D型的目的片段,分别为999bp和404bp,其它各型肉毒酸梭菌及其它梭菌均为阴性,灵敏度较C、D型分别扩增偏低,C型为450pg,D型为10pg。结论该PCR系统可用于C、D型肉毒梭菌的鉴定。 展开更多
关键词 肉毒神经毒素 基因检测 C型 D型 聚合酶链反应
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一种检测A型肉毒毒素的高灵敏度酶联免疫吸附法 被引量:3
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作者 刘志佳 李永明 +6 位作者 宋朝君 李娜 卢卫嘉 孙元杰 毛晓燕 杨琨 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期546-548,共3页
目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法。方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。... 目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法。方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:该方法理论检测下限达到了8.34 pg/mL,检测天然A型肉毒毒素制剂时其实际检测下限可达0.78 LD50/mL,与其他型别的肉毒毒素均未见交叉反应。通过测定基质中的回收率,发现基质中的相关的蛋白对检测具有较大的影响。结论:该方法具有灵敏度高,特异性好,使用方便等优点,具有较高的的实用价值。 展开更多
关键词 A型肉毒毒素 酶联免疫吸附法 重组A型肉毒毒素重链羧基端片段 单克隆抗体
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