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高海拔地区开春鲤细菌性疾病病原菌分离鉴定及药敏试验
1
作者 康鹏天 丁丰源 +4 位作者 刘丽萍 张国维 杨娟 王秀琴 金凡力 《科学养鱼》 2024年第4期58-59,共2页
本次研究通过对随机采集疑似患细菌性疾病的鲤主要患病组织和内脏器官进行初步诊断及病原菌的分离、革兰氏染色、16S rRNA扩增和测序,确定本次细菌性疾病致病菌,并通过药敏试验,筛选出敏感药物,科学指导鲤养殖生产过程中的细菌病防治。... 本次研究通过对随机采集疑似患细菌性疾病的鲤主要患病组织和内脏器官进行初步诊断及病原菌的分离、革兰氏染色、16S rRNA扩增和测序,确定本次细菌性疾病致病菌,并通过药敏试验,筛选出敏感药物,科学指导鲤养殖生产过程中的细菌病防治。一、材料与方法(一)试验材料1.试验动物试验动物为刘家峡黄河鲤鱼原种场养殖患病的濒死鲤4尾。试验鱼个体重650~1 200克,用于临床剖检、病原菌分离、鉴定试验。 展开更多
关键词 细菌性疾病 病原菌分离 养殖生产过程 药敏试验 黄河鲤鱼 临床剖检 随机采集 内脏器官
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鸡源4种病原菌的分离鉴定及灭活疫苗的研制 被引量：4
2
作者 高文娟 李世瑛 +2 位作者 邢小勇 柳纪省 胡永浩 《动物医学进展》 北大核心 2022年第8期50-55,共6页
为对甘肃省张掖市多个地区肉鸡饲养场的致病菌进行分离鉴定,采集病鸡组织样品进行细菌分离,鉴定出鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、禽致病性大肠埃希氏菌和多杀性巴氏杆菌,将分离菌株分别接种于培养基收获菌体抗原,经终浓度为3 mL/L的... 为对甘肃省张掖市多个地区肉鸡饲养场的致病菌进行分离鉴定,采集病鸡组织样品进行细菌分离,鉴定出鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、禽致病性大肠埃希氏菌和多杀性巴氏杆菌,将分离菌株分别接种于培养基收获菌体抗原,经终浓度为3 mL/L的甲醛灭活后,与ISA 206佐剂进行乳化,初步研制成功禽沙门氏菌、大肠埃希氏菌、巴氏杆菌三联四价灭活疫苗,并对该疫苗的物理性状、安全性和免疫效果等进行试验。结果显示,制备灭活疫苗的黏度、稳定性、无菌检验和安全性检验均合格,攻毒后对照组鸡全部发病(10/10),而免疫鸡的保护率为100%,将该疫苗接种1日龄白羽肉鸡,首免间隔14 d进行二免试验,42日龄出栏时,保护率达到90%。 展开更多
关键词 肉鸡 沙门氏菌 大肠埃希氏菌 巴氏杆菌 分离鉴定 灭活疫苗
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传染性造血器官坏死症重组腺病毒载体的构建 被引量：3
3
作者 李守湖 范玉锋 +4 位作者 高欣 李宝玉 吴鹏程 胡永浩 柳纪省 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第5期37-42,共6页
【目的】克隆传染性造血器官坏死症病毒(IHNV)G基因,构建其重组腺病毒载体,为IHN预防及疫苗的研制提供参考。【方法】通过RT-PCR和PCR技术扩增IHNV G基因,将G基因插入到腺病毒穿梭载体中,再用带有目的基因的腺病毒载体与骨架载体在大肠... 【目的】克隆传染性造血器官坏死症病毒(IHNV)G基因,构建其重组腺病毒载体,为IHN预防及疫苗的研制提供参考。【方法】通过RT-PCR和PCR技术扩增IHNV G基因,将G基因插入到腺病毒穿梭载体中,再用带有目的基因的腺病毒载体与骨架载体在大肠杆菌BJ5183中同源重组,构建重组腺病毒质粒,通过PCR扩增及SalⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定,经PacⅠ酶切后转染HEK-293细胞进行包装,获得带有目的基因的重组腺病毒,通过观察绿色荧光蛋白表达情况来监控重组腺病毒,用Western-blot法检测糖蛋白的表达,并测定重组腺病毒的TCID_(50)。【结果】成功克隆出IHNVG基因,其长度为1 533bp。成功构建了IHNV G蛋白重组腺病毒载体。GFP监测显示,重组腺病毒转染成功。重组腺病毒能在HEK-293细胞中表达出分子质量约58ku的产物,与预期相符,其TCID_(50)达到1.0×10^(10.4)mL^(-1)。【结论】成功构建了带有IHNVG基因的重组腺病毒载体,重组腺病毒能高效表达,滴度较高。 展开更多
关键词 传染性造血器官坏死症 G基因 腺病毒载体
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复方中草药对肉鸡生长性能及天然免疫相关基因mRNA表达的影响 被引量：18
4
作者 高强 贾绥安 +4 位作者 杜宝龙 薛瑞林 唐德富 李守湖 柳纪省 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第1期14-21,共8页
【目的】为探讨复方中草药对肉鸡生长性能、免疫器官指数及天然免疫相关基因mRNA表达的影响.【方法】504只科宝肉鸡随机分为7组,分别饲喂基础饲粮(对照组,A组)、基础饲粮+抗生素(B组,0.48 g/kg氟苯尼考,1~42 d)、基础饲粮+100 mL/kg复... 【目的】为探讨复方中草药对肉鸡生长性能、免疫器官指数及天然免疫相关基因mRNA表达的影响.【方法】504只科宝肉鸡随机分为7组,分别饲喂基础饲粮(对照组,A组)、基础饲粮+抗生素(B组,0.48 g/kg氟苯尼考,1~42 d)、基础饲粮+100 mL/kg复方中药制剂提取物(C组,14~42 d)、基础饲粮+100 mL/kg复方中药制剂提取物(D组,21~42 d)、基础饲粮+10 g/kg复方中药粉末制剂(E组,14~42 d)、基础饲粮+10 g/kg复方中药粉末制剂(F组,21~42 d)、基础饲粮+20 g/kg复方中药粉末制剂(G组,14~42 d),每组6个重复,每个重复12只鸡(公母各半),饲养期为42 d,分前期(0~21 d)和后期(22~42 d)2期进行.【结果】试验前期,B组肉鸡平均日采食量显著高于A组和F组(P<0.05),且其平均日增质量显著高于除C组和E组外的其他各组(P<0.05).试验后期,C组肉鸡平均日采食量和平均日增质量均显著高于A组和E组(P<0.05),B组肉鸡平均日增质量显著高于A组、E组和F组(P<0.05).从全期(0~42 d)看,B组肉鸡平均日增质量显著高于A组、D组和F组(P<0.05),且C组、E组、G组肉鸡平均日增质量显著高于A组(P<0.05),而A组肉鸡料质量比显著高于B组、C组和E组(P<0.05),B组肉鸡料质量比显著低于D组和F组(P<0.05).B组胸腺指数与脾脏指数均显著性高于A组、D组、F组、G组(P<0.05),且胸腺指数C组、E组显著高于A组(P<0.05),脾脏指数C组、E组、G组显著高于A组(P<0.05).饲粮中持续添加复方中药制剂提取物可显著提高肉鸡血液中IL-2、IL-6、IL-8、TLR3和TLR4 mRNA的表达,显著降低IL-10 mRNA的表达.【结论】饲粮添加复方中草药可提高肉鸡生产性能及免疫器官指数,并可上调血液细胞因子IL-2、IL-6、IL-8、TLR3、TLR4 mRNA的表达,下调IL-10 mRNA的表达. 展开更多
关键词 复方中草药 肉鸡 生产性能 天然免疫基因
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湖羊乳房炎病原菌的分离鉴定及其耐药性分析 被引量：5
5
作者 薛瑞林 高强 +2 位作者 李守湖 柳纪省 马友记 《家畜生态学报》 北大核心 2022年第1期69-73,共5页
为分析湖羊场临床乳房炎病原菌种类及其耐药特征,对患病湖羊乳样中病原菌进行分离鉴定及耐药性分析。根据形态学和分子生物学鉴定结果,分离得到3种乳房炎病原菌,共计28株,其中金黄色葡萄球菌14株,大肠杆菌10株,粪肠球菌4株;耐药试验结... 为分析湖羊场临床乳房炎病原菌种类及其耐药特征,对患病湖羊乳样中病原菌进行分离鉴定及耐药性分析。根据形态学和分子生物学鉴定结果,分离得到3种乳房炎病原菌,共计28株,其中金黄色葡萄球菌14株,大肠杆菌10株,粪肠球菌4株;耐药试验结果显示,3种病原菌均对左氟沙星、庆大霉素、氯霉素、环丙沙星、诺氟沙星敏感,对青霉素、红霉素、氨苄西林有较强耐药性;复方中草药制剂对大肠杆菌、粪肠球菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)分别达到125 mg/mL、125 mg/mL和62.5 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)达到250 mg/mL、125 mg/mL和125 mg/mL。研究结果揭示,分离得到金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌对青霉素、红霉素和氨苄西林耐药,对左氟沙星、庆大霉素、氯霉素、环丙沙星、诺氟沙星敏感,复方中草药制剂能有效抑杀病原菌。 展开更多
关键词 湖羊 乳房炎 病原菌 分离鉴定 耐药性
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复方中草药制剂抑菌作用及其对湖羊部分细胞因子mRNA表达的影响 被引量：3
6
作者 薛瑞林 高强 +2 位作者 李守湖 柳纪省 马友记 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第1期8-13,21,共7页
【目的】检测复方中草药制剂对引起湖羊乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌的抑杀作用,并探究该制剂对湖羊外周血中部分细胞因子mRNA相对表达量的影响.【方法】采用牛津杯法和试管二倍稀释法进行复方中草药制剂的体外抑菌试验... 【目的】检测复方中草药制剂对引起湖羊乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌的抑杀作用,并探究该制剂对湖羊外周血中部分细胞因子mRNA相对表达量的影响.【方法】采用牛津杯法和试管二倍稀释法进行复方中草药制剂的体外抑菌试验,荧光定量检测用药前和用药后第1、3、7、14天及21天湖羊外周血中IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α等7种细胞因子mRNA相对表达量.【结果】体外抑菌试验结果显示,该复方中草药制剂对大肠杆菌、粪肠球菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)分别达到125、125、62.5 mg/mL;最小杀菌浓度(MBC)分别为250、125、125 mg/mL.荧光定量试验结果显示,使用该制剂处理湖羊后能显著提高湖羊外周血中IL-2、IL-8、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA表达水平(P<0.05),显著降低IL-6和TNF-αmRNA表达水平(P<0.05).【结论】该复方中草药制剂对3种乳房炎病原菌具有很好的抑杀作用,并能上调湖羊外周血中IL-2、IL-8、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA相对表达量,下调IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量. 展开更多
关键词 湖羊 乳房炎 病原菌 细胞因子 表达
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湖羊乳房炎病原菌多重PCR检测方法的建立及其耐药性分析 被引量：5
7
作者 薛瑞林 高强 +2 位作者 李守湖 柳纪省 马友记 《中国草食动物科学》 CAS 2020年第4期49-54,共6页
为鉴定某规模化羊场患乳房炎母羊病原菌种类,构建病原菌多重PCR快速检测方法,分析其主要致病菌的耐药特征,对患临床型乳房炎湖羊乳样中乳房炎病原菌进行分离纯化和分子生物学鉴定,同时优化PCR体系,建立病原菌多重PCR快速鉴定方法,并进... 为鉴定某规模化羊场患乳房炎母羊病原菌种类,构建病原菌多重PCR快速检测方法,分析其主要致病菌的耐药特征,对患临床型乳房炎湖羊乳样中乳房炎病原菌进行分离纯化和分子生物学鉴定,同时优化PCR体系,建立病原菌多重PCR快速鉴定方法,并进行药物敏感实验。结果显示,分离得到3种致病菌,共计28株,其中金黄色葡萄球菌14株,大肠杆菌10株,粪肠球菌4株;多重PCR方法能够特异稳定地扩增出目的条带,敏感性满足临床需要;药敏结果显示,3种病原菌对左氟沙星、庆大霉素、氯霉素、环丙沙星、诺氟沙星敏感,对氨苄西林、青霉素、红霉素有较强耐药性。该结果对于临床上绵羊乳房炎的快速诊断和防治有重要参考意义。 展开更多
关键词 湖羊 乳房炎 多重PCR 耐药性分析
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鸡源大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定及耐药分析 被引量：20
8
作者 高强 薛瑞林 +2 位作者 李守湖 柳纪省 唐德富 《中国兽药杂志》 2020年第11期14-21,共8页
为探究甘肃省民勤县某饲养场肉仔鸡腹泻的病原及复方中草药制剂和抗生素分别对分离病原的抑菌效果,对7日龄病死肉鸡进行解剖,通过采集死亡肉仔鸡肝脏、脾脏、心脏进行病原菌分离培养、形态观察、16S rDNA分子鉴定,最终鉴定该病死肉仔鸡... 为探究甘肃省民勤县某饲养场肉仔鸡腹泻的病原及复方中草药制剂和抗生素分别对分离病原的抑菌效果,对7日龄病死肉鸡进行解剖,通过采集死亡肉仔鸡肝脏、脾脏、心脏进行病原菌分离培养、形态观察、16S rDNA分子鉴定,最终鉴定该病死肉仔鸡为大肠杆菌与沙门氏菌混合感染。抑菌结果显示,复方中草药对分离得到的大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡副伤寒沙门氏菌均有良好的抑菌效果。10种抗生素药敏试验结果显示,此三株菌同时对氨苄西林、环丙沙星、四环素、恩诺沙星四种药物耐药;鸡大肠杆菌对庆大霉素、阿米卡星敏感,鸡白痢沙门氏菌对链霉素、氟苯尼考、头孢噻肟敏感,鸡副伤寒沙门氏菌对头孢曲松、链霉素、头孢噻肟敏感。上述研究结果为肉仔鸡大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离鉴定以及科学指导用药提供参考。 展开更多
关键词 肉仔鸡 大肠杆菌 沙门氏菌 分离鉴定
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虹鳟鱼传染性造血器官坏死症病毒的分离和鉴定 被引量：2
9
作者 李宝玉 吴鹏程 范玉峰 《甘肃畜牧兽医》 2015年第2期35-36,共2页
本试验从甘肃永登爆发疫情的虹鳟鱼养殖场共采集了四次病料,分离出1株优势毒株,对新分离的毒株进行培养增殖,在EPC细胞上增殖良好,且可引起良好的病变;根据IHNV的保守基因N基因序列,设计特异性引物,结果扩增出786 bp的片段。对该片段进... 本试验从甘肃永登爆发疫情的虹鳟鱼养殖场共采集了四次病料,分离出1株优势毒株,对新分离的毒株进行培养增殖,在EPC细胞上增殖良好,且可引起良好的病变;根据IHNV的保守基因N基因序列,设计特异性引物,结果扩增出786 bp的片段。对该片段进行测序分析,发现与IHNV的参考序列有较高的相似性,证实该毒株为传染性造血器官坏死症病毒。结果表明传染性造血器官坏死病毒(IHNV)在永登虹鳟鱼中的存在与传播,本研究为我国北方地区IHN疫情动态监测和防控提供依据。 展开更多
关键词 虹鳟鱼 分离 鉴定
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