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Bcl-2相关的永生基因4对胃癌干细胞自我更新能力的调控作用
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作者 姜雷 闵光涛 +5 位作者 王军 何进程 朱俊亚 吕坤 乐奇 姚南 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期136-142,共7页
目的:探讨Bcl-2相关的永生基因4(Bcl-2 associated athanogene 4,BAG4)在胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)自我更新能力中的调控作用。方法:采用成球培养法分离/富集GCSCs,并对其生物学特征进行鉴定。采用慢病毒干扰技术构... 目的:探讨Bcl-2相关的永生基因4(Bcl-2 associated athanogene 4,BAG4)在胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)自我更新能力中的调控作用。方法:采用成球培养法分离/富集GCSCs,并对其生物学特征进行鉴定。采用慢病毒干扰技术构建沉默BAG4表达的MGC803胃癌细胞系,以平板克隆形成和成球实验分别检测沉默BAG4对胃癌细胞克隆形成和成球能力的影响。结果:成球培养法成功分离/富集出球细胞(sphere cell,SC)。与普通单层贴壁细胞相比,MGC803-SC高表达干性相关基因Sox2、Oct4和Bmi1,具有更强的克隆形成能力(198±17 vs.92±11,P<0.001),诱导分化后干性标志物CD44表达下降,在体外具有更强的侵袭能力(185±18 vs.84±11,P<0.01)。上述实验结果证实MGC803-SC具有GCSCs特性。BAG4在GCSCs中的表达水平明显高于普通贴壁胃癌细胞,沉默BAG4明显降低胃癌细胞的克隆形成和成球能力。结论:沉默BAG4基因能有效抑制GCSCs的自我更新能力,有望成为胃癌靶向治疗的新靶标。 展开更多
关键词 Bcl-2相关的永生基因4 胃癌干细胞 自我更新
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miR-149-5p通过靶向AEBP1调控胃癌细胞的迁移侵袭
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作者 陈燕 姜雷 +4 位作者 闵光涛 王军 陈伟 王红鹏 王向文 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1159-1165,共7页
目的:探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法:qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性,建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株,Transwel... 目的:探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法:qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性,建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株,Transwell实验检测miR-149-5p表达水平对胃癌癌细胞迁移侵袭能力的影响;生物信息学网站预测miR-149-5p的靶基因,采用荧光素酶报告基因实验加以验证。结果:miR-149-5p在胃癌组织和细胞株中均低表达(均P<0.05)。miR-149-5p的表达水平与胃癌患者的浸润深度(P=0.016)、淋巴结转移(P=0.001)和TNM分期(P=0.023)相关。miR-149-5p低表达是胃癌患者总生存期的独立危险因素。与对照组相比,miR-149-5p mimics明显抑制胃癌细胞的迁移侵袭能力(均P<0.01),而转染miR-149-5p inhibitors后得到了相反的结果(均P<0.05)。miR-149-5p靶向调控脂肪细胞增强结合蛋白1(Adipocyte enhancer binding protein 1,AEBP1)蛋白的表达。荧光素酶报告基因实验表明,miR-149-5p明显抑制了野生型AEBP1载体的荧光素酶活性(P<0.01),而突变型的荧光素酶活性不受影响。敲低AEBP1可部分逆转下调miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响。结论:miR-149-5p在胃癌组织中低表达,通过靶向AEBP1负性调控胃癌癌细胞的迁移侵袭。 展开更多
关键词 miR-149-5p 胃癌 脂肪细胞增强结合蛋白1
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