产β-半乳糖苷酶酵母菌株15D产酶条件研究 被引量：4

1

作者 陈朋 韩跃武 +2 位作者 胡先望 韩冲 冯克宽 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期73-75,共3页

从马克斯克鲁维酵母的突变菌株中,获得了一株高产β-半乳糖苷酶的酵母菌株15D。本文对菌株15D的产酶条件及小型发酵培养实验进行研究,表明在适宜条件下菌株15D产酶水平可达287.8U/mL,比出发菌产酶水平提高了5倍。

关键词 Β-半乳糖苷酶 酵母 液体发酵 产酶条件

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JmjC家族在肿瘤发生中作用的研究进展 被引量：3

2

作者 吴炳浩 王玉平 韩泽广 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期676-680,共5页

肿瘤通常伴有遗传学和表观遗传学的改变,组蛋白修饰是一种重要的表观遗传学调控方式,常参与肿瘤的发生和发展。研究表明部分包含JmjC结构域的蛋白具有组蛋白去甲基化酶的活性,能够移除组蛋白上的甲基。JmjC家族在肿瘤的发生中发挥重要作... 肿瘤通常伴有遗传学和表观遗传学的改变,组蛋白修饰是一种重要的表观遗传学调控方式,常参与肿瘤的发生和发展。研究表明部分包含JmjC结构域的蛋白具有组蛋白去甲基化酶的活性,能够移除组蛋白上的甲基。JmjC家族在肿瘤的发生中发挥重要作用,其机制研究已成为肿瘤表观遗传学研究的热点。文章主要介绍JmjC家族成员的基本信息,并对其在肿瘤发生中的作用进行探讨。 展开更多

关键词 JmjC家族 肿瘤 表观遗传

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纳米纤维素基血液接触性材料研究进展 被引量：2

3

作者 张春亮 吴治宇 +4 位作者 张瑜 杨培 王凯荣 周风山 王小慧 《中国造纸》 CAS 北大核心 2021年第11期134-142,共9页

纳米纤维素是在某一尺度上具有纳米级的纤维素材料,其具有优异的力学性能和良好的生物相容性,在血液接触性材料领域得到了迅速的发展。纳米纤维素材料具有可控的血液相容性,作为抗凝血材料和促凝血材料具有广泛的应用前景。本文讨论了... 纳米纤维素是在某一尺度上具有纳米级的纤维素材料,其具有优异的力学性能和良好的生物相容性,在血液接触性材料领域得到了迅速的发展。纳米纤维素材料具有可控的血液相容性,作为抗凝血材料和促凝血材料具有广泛的应用前景。本文讨论了纳米纤维素基血液接触性材料的制备方法,总结了其在抗凝血与促凝血中的应用,并就其未来应用进行了展望。 展开更多

关键词 纤维素纳米纤丝 纤维素纳米晶体 细菌纤维素 抗凝血材料 促凝血材料

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小鼠脑室下区细胞增殖能力随年龄增加逐渐下降与β-catenin的相关研究

4

作者 姚婷婷 姚建明 +4 位作者 尹洁 穆继英 高丽平 宋焱峰 景玉宏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期265-269,共5页

目的:脑内成体干细胞状态和年龄的关系非常密切,本研究探讨小鼠老化过程中脑室下区(subven-tricular zone,SVZ)内成体干细胞随年龄增加增殖活性的变化和脑内β-catenin信号的相关性。方法:C57B/L小鼠分别饲养至2,12,18月时处死,各组动... 目的:脑内成体干细胞状态和年龄的关系非常密切,本研究探讨小鼠老化过程中脑室下区(subven-tricular zone,SVZ)内成体干细胞随年龄增加增殖活性的变化和脑内β-catenin信号的相关性。方法:C57B/L小鼠分别饲养至2,12,18月时处死,各组动物处死前腹腔注射BrdU(60 mg/kg,处死前3 d开始注射,连续注射3 d,1次/d)。部分动物断头取脑,冰台上游离前额皮层,冷冻备用,部分动物灌注固定,连续冠状冰冻切片备用。利用免疫组织化学方法检测SVZ区BrdU和Ki67表达。利用Western blot技术检测前额皮层内β-catenin的表达水平。结果:12,18月时小鼠SVZ区BrdU和Ki67阳性细胞的数量与2月时比较明显有所减少(P<0.05)。Western blot结果可见前额皮层内β-catenin的表达水平在2月时达高峰,12月和18月时逐渐减少。结论:SVZ区干细胞的增殖能力随年龄增加逐渐下降可能与脑内β-catenin信号的减弱有关。 展开更多

关键词 脑室下区 前体细胞增殖 β—catenin 小鼠

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金丝桃素对口蹄疫病毒的体外抗病毒实验 被引量：12

5

作者 王曙阳 梁剑平 +3 位作者 杨林西 崔颖 尚若峰 罗永江 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第6期6-9,共4页

本文报道了金丝桃素体外抗口蹄疫病毒(FM DV)的研究结果。采用双抗体捕获抗原法、病毒滴度测定、M TT法、组织细胞培养等方法均检测到抗病毒作用。结果显示:金丝桃素在BHK-21细胞感染FM DV前、后及同时加入,都有明显抑制细胞病变的作用... 本文报道了金丝桃素体外抗口蹄疫病毒(FM DV)的研究结果。采用双抗体捕获抗原法、病毒滴度测定、M TT法、组织细胞培养等方法均检测到抗病毒作用。结果显示:金丝桃素在BHK-21细胞感染FM DV前、后及同时加入,都有明显抑制细胞病变的作用。金丝桃素使FM DV的TC ID50从8.5下降到6.25。双抗体捕获抗原法检测到金丝桃素有效抑制FM DV和BHK-21细胞的吸附、融合,抑制率可达59.72%。研究结果提示:金丝桃素在体外有抗口蹄疫病毒作用,抑制口蹄疫病毒与宿主细胞的吸附、融合是抗病毒的重要途径之一。 展开更多

关键词 金丝桃素 抗口蹄疫病毒 BHK-21细胞 细胞病变

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Nested-PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌 被引量：6

6

作者 闵现华 刘箐 +6 位作者 韩跃武 文朝慧 王军平 刘姝彤 刘雅莉 宋蕤 施颖波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期28-31,共4页

利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵... 利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵敏度为107cfu/mL,Nested-PCR为104cfu/mL;在自然感染种子提取液中,稀释104倍后Nested-PCR仍然可以检出。建立的番茄种子Nested-PCR检测技术,无需经过核酸提取步骤,可以在8 h内完成整个检测过程,方便快捷,成本低廉,可作为番茄种子带菌的常规检测方法。 展开更多

关键词 番茄溃疡病 番茄种子 Direct-PCR NESTED-PCR

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STZ诱导的糖尿病大鼠额叶皮层内神经细胞线粒体损伤和DMT1高表达 被引量：2

7

作者 尹洁 阿迪力江.伊明 +3 位作者 穆继英 张朗 高丽萍 景玉宏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期445-449,共5页

目的:探讨1型糖尿病脑内自由基产生的铁代谢途径及线粒体氧化损伤水平。方法:利用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)股静脉单次注射(60 mg/kg)诱导大鼠糖尿病模型,2个月后检测血糖及脑脊液的葡萄糖水平。通过Western Blot技术检测额叶皮... 目的:探讨1型糖尿病脑内自由基产生的铁代谢途径及线粒体氧化损伤水平。方法:利用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)股静脉单次注射(60 mg/kg)诱导大鼠糖尿病模型,2个月后检测血糖及脑脊液的葡萄糖水平。通过Western Blot技术检测额叶皮层内特异性转运蛋白(divalent metal transport,DMT1)及硫氧环蛋白1(thioredoxin,TR1)的表达水平;分离神经细胞线粒体,检测线粒体中丙二醛(malonaldehyde,MDA)及谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量。结果:与正常组比较,STZ诱导的糖尿病模型大鼠在2个月时的血糖和脑脊液葡萄糖水平持续升高(P<0.05),前额叶皮层DMT1表达增加,而TR1的表达减少(P<0.05)。同时还观察到额叶皮层神经细胞线粒体GSH水平下降,而MDA的水平升高(P<0.05)。结论:糖尿病导致的神经细胞损伤和自由基累积关系密切,而铁代谢异常可能是原因之一,线粒体损伤可能是启动因素。 展开更多

关键词 糖尿病脑病 铁代谢 线粒体 链脲佐菌素 大鼠

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早期胃腺癌原代细胞适配子的筛选与鉴定 被引量：2

8

作者 郭鹏 习静 +8 位作者 张雪燕 姚海燕 马驰 马鑫 杨敏 冯慧婷 侯纯荣 徐先云 韩跃武 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期250-256,共7页

胃腺癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一,由于没有针对早期胃腺癌有效的诊断方法,目前胃腺癌手术治疗还主要针对中晚期患者,预后差.本文应用cell-SELEX技术,筛选早期胃腺癌原代细胞的适配子,为早期胃腺癌的诊断提供新的思路.从早期胃腺癌... 胃腺癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一,由于没有针对早期胃腺癌有效的诊断方法,目前胃腺癌手术治疗还主要针对中晚期患者,预后差.本文应用cell-SELEX技术,筛选早期胃腺癌原代细胞的适配子,为早期胃腺癌的诊断提供新的思路.从早期胃腺癌组织中分离得到早期胃腺癌原代细胞,应用体外合成全长88 bp中间含52 bp随机序列的单链DNA文库,通过对PCR扩增条件的优化,借助生物素-链霉亲和素磁珠系统,经cell-SELEX反复筛选,可获得针对早期胃腺癌原代细胞的特异性适配子.经12轮cell-SELEX筛选,ssDNA文库与早期胃腺癌原代细胞的亲和力由1 560上升到4 336,表明亲和力较高的适配子得到逐步富集.经克隆和测序,应用软件分析可知,30个克隆子中编号为C17和C27的2个序列完全一致,具同源性,二级结构预测可知单链DNA形成不同的茎环结构可能是适配子与早期胃腺癌原代细胞作用的结构基础.特异性分析显示,胃腺癌原代细胞组与正常胃粘膜上皮细胞、空白对照组之间荧光强度值差异非常显著(P<0.01);正常胃粘膜上皮细胞组与空白对照组之间差异不显著(P>0.05).经亲和力测定,各适配子与早期胃腺癌原代细胞的解离系数达到nmol/L,具有很高的亲和力.利用cell-SELEX技术成功筛选到早期胃腺癌原代细胞的适配子,为胃腺癌的早期诊断与治疗药物靶点方面的研究奠定了实验基础. 展开更多

关键词 胃肿瘤 腺癌 细胞-SELEX 适配子 随机单链DNA文库

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人源性胃癌单链抗体库的构建 被引量：1

9

作者 韩亚萍 韩跃武 +3 位作者 路艳 王春霞 刘玲玲 李真真 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期738-739,742,共3页

目的:构建人源天然库容量大、多样性好的核糖体展示单链抗体(scFv)库。方法:采集人新鲜外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体VH和VL基因,同时扩增作为间隔区的人抗体CK基因;采用重叠延伸PCR(简称SOEPCR)技术连接VH-VL-CK基... 目的:构建人源天然库容量大、多样性好的核糖体展示单链抗体(scFv)库。方法:采集人新鲜外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增人抗体VH和VL基因,同时扩增作为间隔区的人抗体CK基因;采用重叠延伸PCR(简称SOEPCR)技术连接VH-VL-CK基因,同时引入T7启动子和核糖体结合位点序列,体外构建核糖体展示scFv库模板,连接T-Vector转化E.coliDH5α大肠杆菌,蓝白筛选,挑取阳性克隆测序以鉴定scFv组装。结果:成功构建了库容量达3.1×1013的人源性胃癌核糖体展示scFv库。结论:构建的大容量人源性胃癌核糖体展示抗体库可以成为进一步筛选多种特异性人源抗体的实验平台,为开发治疗性人源抗体奠定了很好的实验基础。 展开更多

关键词 核糖体展示技术 SOE PCR 单链抗体(scFv)库 胃癌

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早期胃癌血清特异标志物过氧化物酶4核酸适配体的筛选、鉴定与应用 被引量：7

10

作者 杜振亚 贾茹涵 +4 位作者 李文慧 杨静 习静 石大林 韩跃武 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1065-1072,共8页

胃癌是世界上死亡率第三的重大疾病,而在早期阶段却有着良好的治愈率和生存率。因此,找到针对早期胃癌的特异性标志物从而提高早期胃癌的检出率,是目前亟待解决的问题。在本实验室的早期研究中,发现过氧化物酶4(peroxiredoxin-4,PRDX4)... 胃癌是世界上死亡率第三的重大疾病,而在早期阶段却有着良好的治愈率和生存率。因此,找到针对早期胃癌的特异性标志物从而提高早期胃癌的检出率,是目前亟待解决的问题。在本实验室的早期研究中,发现过氧化物酶4(peroxiredoxin-4,PRDX4)有极大的潜能作为早期胃癌的特异性标志物,并且由于蛋白质结构的特殊性,能够分泌至血清中,为早期胃癌的无创化诊断提供了可能。本文为寻找血清中PRDX4蛋白的特异性适配体,通过消减-SELEX方法找到9种适配体。经特异性和亲和力分析后,证实其中Ap-EGACS-11在9种适配体中具有最高的特异性和亲和力。随后在适配体的验证研究中证实,相对于进展期胃癌病人血清、结直肠癌病人血清和正常人血清,Ap-EGACS-11对早期胃癌病人血清的检出率最高。该结果表明,PRDX4具有早期胃癌特异性血清标志物的潜能,且Ap-EGACS-11可直接作为早期胃癌的检测试剂。 展开更多

关键词 过氧化物酶4 早期胃癌 适配体 生物标志物

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BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体诱导SGC-7901细胞凋亡 被引量：2

11

作者 陈建国 卢天龙 +2 位作者 韩跃武 冯惟萍 任慧子 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-135,共4页

目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点... 目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2构建成功。MTT法检测显示pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并呈时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡比例升高(P<0.01)。结论成功构建反义双靶区重组载体pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡。 展开更多

关键词 BAG-1 BCL-2 双表达质粒 反义RNA 胃癌

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饥饿促进嗅觉探索与梨状皮层神经细胞反应 被引量：1

12

作者 阎继龙 阿迪力江.伊明 +4 位作者 何俊杰 杨汝阳 杨晓庆 高丽萍 景玉宏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期460-464,共5页

目的:对嗅觉的处理和整合是形成嗅觉记忆的关键,本研究观察了饥饿状态下大鼠嗅觉探索行为变化和梨状皮层神经细胞活化的关系。方法:大鼠禁食48 h,嗅球注射荧光金,通过食物埋藏,检测大鼠嗅觉探索行为的变化。利用连续冠状切片,检测梨状... 目的:对嗅觉的处理和整合是形成嗅觉记忆的关键,本研究观察了饥饿状态下大鼠嗅觉探索行为变化和梨状皮层神经细胞活化的关系。方法:大鼠禁食48 h,嗅球注射荧光金,通过食物埋藏,检测大鼠嗅觉探索行为的变化。利用连续冠状切片,检测梨状皮层前部FG阳性细胞的数量,利用c-fos免疫荧光检测梨状皮层神经细胞活动状态。结果:饥饿促进了大鼠的嗅觉探索效能,梨状皮层FG阳性细胞及c-fos阳性细胞的数量明显高于对照组。结论:饥饿促进嗅觉探索行为和梨状皮层神经细胞活动及嗅球到梨状皮层投射增强有关。 展开更多

关键词 嗅觉 梨状皮层 饥饿

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高血糖影响海马GSK3β-β-catenin信号抑制大鼠海马颗粒下区成体神经干细胞再生

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作者 祁楚楚 马学珠 +3 位作者 陈海超 高丽萍 尹洁 景玉宏 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期430-434,共5页

目的:探讨持续高血糖对大鼠海马颗粒下区(subgranular zone,SGZ)神经干细胞状态的影响及可能机制。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型,腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,Brd U)标记新生细... 目的:探讨持续高血糖对大鼠海马颗粒下区(subgranular zone,SGZ)神经干细胞状态的影响及可能机制。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型,腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,Brd U)标记新生细胞。利用免疫组化法检测海马SGZ区Ki67,5-溴脱氧尿嘧啶核/双皮质素(bromodeoxyuridine/doublecortin,Brd U/DCX)标记的阳性细胞。利用免疫印迹法检测海马胰岛素受体β(insulin receptorβ,IRβ),糖元合成酶激酶3β(pho-glycogen synthase kinase-3β,GSK3β),β-链蛋白(β-Catenin)表达水平。结果:STZ注射大鼠胰岛素降低,血糖升高;糖尿病大鼠海马区Ki67阳性细胞,Brd U/DCX阳性细胞和对照组比较明显减少,海马区IRβ,pho-GSK3β,β-Catenin表达水平和对照组比较显著下降(P<0.05)。结论:STZ诱导的1型糖尿病大鼠海马SGZ区新生细胞增值能力下降,细胞分化异常,这一变化和海马区胰岛素信号下调,GSK3β活化,β-Catenin降解增加有关。 展开更多

关键词 1型糖尿病 神经干细胞 GSK3Β 大鼠

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