山羊颞下颌关节盘胶原构筑和生物力学性能研究 被引量：2

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作者 李燕梅 包广洁 +4 位作者 钟妮 吕玮 张文霞 王兰兰 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期73-77,共5页

目的为工程化颞下颌关节盘组织建立客观的生物力学标准。方法从4只健康1月龄山羊头中完整分离8个颞下颌关节盘,用直径3 mm的冲子在前、中、后带取圆柱状试样,预处理压缩速度为0.025 mm·s-1,结束条件为最大载荷小于4.9 N,压缩位移1.... 目的为工程化颞下颌关节盘组织建立客观的生物力学标准。方法从4只健康1月龄山羊头中完整分离8个颞下颌关节盘,用直径3 mm的冲子在前、中、后带取圆柱状试样,预处理压缩速度为0.025 mm·s-1,结束条件为最大载荷小于4.9 N,压缩位移1.5 mm,循环3次,在预处理基础上完成压缩实验,获取各区带的应力应变关系图和弹性模量值。扫描电子显微镜和偏振光显微镜观察各区带的超微结构和胶原纤维走向。结果 1)关节盘组织的生理应变范围在10%以内,关节盘组织的拟线性本构方程可以用多项式y=ax+bx2+cx3进行拟合。2)关节盘中间带的弹性模量值最大,其与前带和后带均有统计学差异(P<0.05),前带与后带之间无统计学差异(P=0.361)。3)颞下颌关节盘内部呈现环形胶原网状结构,中间带胶原排列致密,呈前后向排列;前带和后带主要呈内外走向,伴有前后方向的纤维。结论环形胶原网状结构是山羊颞下颌关节盘抗力性能的基础,中间带抗压性能高于前带和后带。 展开更多

关键词 颞下颌关节盘 拟线性本构方程 压缩实验 弹性模量 扫描电子显微镜 偏振光显微镜

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山羊颞下颌关节盘细胞的表面形貌和力学特性研究

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作者 包广洁 孔楠楠 +2 位作者 郭曼丽 苏雪莲 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期352-356,共5页

目的采用JPK Nano Wizard 3型生物原子力显微镜(AFM)对两种类型的山羊颞下颌关节盘细胞(软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞)的表面形貌和生物力学特性进行研究,为颞下颌关节盘组织工程研究中种子细胞的选择提供依据。方法单层培养原代... 目的采用JPK Nano Wizard 3型生物原子力显微镜(AFM)对两种类型的山羊颞下颌关节盘细胞(软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞)的表面形貌和生物力学特性进行研究,为颞下颌关节盘组织工程研究中种子细胞的选择提供依据。方法单层培养原代山羊颞下颌关节盘细胞,生理状态下用AFM接触模式扫描两种类型的关节盘细胞,获得形貌图。随机选取20个软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞,扫描获得细胞核区和细胞质区的力-位移曲线,通过JPK Data Processing软件分析两种细胞的杨氏模量和黏附力。结果 AFM下,三角形的软骨细胞样细胞的细胞核占据其大部分体积,细胞骨架结构呈树枝状排列,边缘伸出许多伪足;长梭形的成纤维细胞样细胞的细胞核明显高于细胞质区,骨架结构规则排列,边缘光滑,极少有伪足伸出;两种细胞的表面粗糙度没有明显差异。分析力-位移曲线得出:两种类型细胞的杨氏模量在细胞核区没有明显差异(P>0.05),在细胞质区略有差异(P=0.047);但两种细胞的黏附力没有明显差异(P>0.05)。结论两种类型的关节盘细胞在形貌上虽有较大的差别,但在生物力学特性上的差异并不明显。 展开更多

关键词 原子力显微镜 关节盘细胞 表面形貌 生物力学

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山羊颞下颌关节盘细胞肌动蛋白骨架的研究 被引量：3

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作者 孔楠楠 张文霞 +1 位作者 康宏 包广洁 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期953-956,共4页

目的:通过激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)研究原代及传代山羊颞下颌关节盘细胞骨架(Cytoskeleton,CSK)蛋白-肌动蛋白的形态及蛋白量的改变,以说明关节盘细胞随着传代的发生,细胞骨架蛋白-肌动蛋白的差... 目的:通过激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)研究原代及传代山羊颞下颌关节盘细胞骨架(Cytoskeleton,CSK)蛋白-肌动蛋白的形态及蛋白量的改变,以说明关节盘细胞随着传代的发生,细胞骨架蛋白-肌动蛋白的差异。方法:原代(P0)山羊颞下颌关节盘细胞及传代1、2、3、4(P1、P2、P3、P4)代的关节盘细胞,分别接种在有方形盖玻片的6孔板中制作细胞爬片。对各代关节盘细胞肌动蛋白骨架进行免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜获取各代关节盘细胞肌动蛋白的形态,同时利用荧光强度测定软件对各代关节盘细胞肌动蛋白荧光量进行测定。结果:丝状的肌动蛋白主要沿着细胞膜外围均匀排列,随着传代丝状结构逐渐清晰,且逐渐增粗,P4代时形成较粗的纤维束。荧光强度整体趋势是随着传代荧光量表达是递增的,P3代以内没有统计学差异,而在P4代时统计学差异明显。结论:肌动蛋白骨架随着传代过程形态学上发生了改变,在P4代时可见骨架蛋白形成较粗的纤维束,荧光量表达同其他代细胞差异明显,这为以后工程化颞下颌关节盘种子细胞的选择提供了依据。 展开更多

关键词 关节盘细胞 传代 细胞骨架 激光共聚焦显微镜

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口腔鳞状细胞癌外泌体mRNA表达图谱分析 被引量：5

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作者 胡慧珍 王世琴 +3 位作者 孙贵军 金佳佳 李志勇 何祥一 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第9期943-947,共5页

目的:研究口腔鳞状细胞癌细胞(oral squamous cell cancer cells,OSCC))外泌体与正常口腔上皮细胞(Human immortalized oral epithelial cell,HOEC)外泌体mRNA之间的表达差异,通过特异性外泌体mRNA表达图谱分析,为探究口腔鳞状细胞癌的... 目的:研究口腔鳞状细胞癌细胞(oral squamous cell cancer cells,OSCC))外泌体与正常口腔上皮细胞(Human immortalized oral epithelial cell,HOEC)外泌体mRNA之间的表达差异,通过特异性外泌体mRNA表达图谱分析,为探究口腔鳞状细胞癌的发生发展机制打下一定的研究基础。方法:利用高通量测序技术检测CAL-27和HOEC外泌体mRNA表达谱,筛选出差异mRNA,对差异mRNA进行GO(Gene Ontoloty)分析和KEGG通路分析。结果:口腔鳞状细胞癌细胞外泌体中检测到mRNA 44699条,口腔上皮细胞外泌体中mRNA数量为44761条,其中,差异表达的mRNA共471条(234个上调,237个下调)。生物信息学分析表明上述差异表达的mRNA参与了口腔癌的生物学调节功能和通路。结论:口腔鳞癌细胞及口腔上皮细胞均能产生丰富的外泌体;口腔鳞状细胞癌细胞外泌体与正常口腔上皮细胞外泌体间mRNA表达谱存在较大差异,差异表达的mRNA在肿瘤的发生、发展及转移过程中可能有重要作用。 展开更多

关键词 口腔癌 外泌体 MRNA 高通量分析

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自组装山羊颞下颌关节盘组织工程纤维软骨模型的构建 被引量：5

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作者 康宏 李振强 闭艳妲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期314-317,共4页

目的构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件。方法分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,按每井5.5×106个接种到预制的直径5 mm&#... 目的构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件。方法分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,按每井5.5×106个接种到预制的直径5 mm×深10 mm琼脂糖井内,每天换液,培养2周,观察和检测颞下颌关节盘形态和成分的变化。结果接种后1 d,山羊颞下颌关节盘细胞在琼脂糖井内聚集,开始自组装成一圆盘状基体,后来逐渐变成圆球形。培养2周时,苏木精-伊红染色可观察到纤维软骨细胞呈圆形,周围有基质包绕;Safranin-O/fast green染色显示自组装基体内纤维软骨细胞分泌细胞外基质氨基多糖;picro-sirius red染色可见自组装基体内有大量胶原纤维。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色可见胞浆和细胞外有棕黄色颗粒,表明自组装纤维软骨可以产生与自然关节盘组织一致的Ⅰ型胶原成分。结论利用琼脂糖井构建的山羊颞下颌关节盘自组装组织工程模型,能产生与自然关节盘成分相似的细胞外基质,表明组织工程化颞下颌关节盘组织的途径是可行的。 展开更多

关键词 颞下颌关节盘 组织工程 纤维软骨

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细胞松弛素B对山羊颞下颌关节盘细胞及细胞骨架肌动蛋白的影响 被引量：2

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作者 张文霞 康宏 +3 位作者 吕玮 李燕梅 钟妮 包广洁 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期775-779,共5页

目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及... 目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及形态的影响并得出最适浓度;观察最适浓度作用后细胞凋亡、粘附及肌动蛋白形态和mRNA表达的变化。结果:2μmol/L浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖活性具有明显抑制作用,但随培养时间延长抑制率明显降低,无促进凋亡作用;细胞粘附率明显下降;与对照组相比,处理组细胞突起结构逐渐消失,形态变圆,肌动蛋白纤维丝明显的断裂,荧光强度降低;肌动蛋白mRNA表达降低。结论:细胞松弛素B可能是通过破坏肌动蛋白的结构抑制了颞下颌关节盘细胞形态及功能。 展开更多

关键词 颞下颌关节盘 细胞松弛素 肌动蛋白 细胞骨架

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27颊侧罕见多生牙尖的CBCT诊断与鉴别诊断 被引量：7

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作者 车春晓 姜科宇 +2 位作者 胡松玲 陆玉莹 何祥一 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第6期706-710,共5页

目的利用锥形束CT(Cone Beam Computer Tomography,CBCT)确诊27颊侧多生牙尖1例,并对其鉴别诊断、发生机制及CBCT的临床应用特点进行分析。方法本文根据口腔临床一般检查、口腔局部X线片并结合CBCT对患牙进行确诊;对多生牙尖、融合牙、... 目的利用锥形束CT(Cone Beam Computer Tomography,CBCT)确诊27颊侧多生牙尖1例,并对其鉴别诊断、发生机制及CBCT的临床应用特点进行分析。方法本文根据口腔临床一般检查、口腔局部X线片并结合CBCT对患牙进行确诊;对多生牙尖、融合牙、双生牙、结合牙各自的特点及鉴别要点分析讨论。结果根据口腔临床一般检查、口腔局部X线片,特别是应用CBCT确诊了1例左上第2磨牙颊侧多生牙尖。结论口腔辅助检查是临床上确诊口腔颌面部疾病的必要手段。CBCT具有扫描时间短、辐射剂量小、扫描灵活、分辨率高等优点,提高了各类口腔疾病的诊疗水平。 展开更多

关键词 锥形束CT 上颌第2磨牙 多生牙尖 融合牙 双生牙 结合牙

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不同体积分数氧气对山羊颞下颌关节盘细胞骨架改建的影响 被引量：3

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作者 何晓兰 包广洁 +3 位作者 孙凌璐 张雪 保善英 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期362-367,共6页

目的探讨不同体积分数的氧气对山羊颞下颌关节盘细胞3种细胞骨架蛋白改建的影响。方法体外分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,传代至第2代,分别于常氧21%O_2及低氧8%O_2、4%O_2、2%O_2下培养。甲苯胺蓝、天狼星红及Ⅰ型胶原免疫细胞化学... 目的探讨不同体积分数的氧气对山羊颞下颌关节盘细胞3种细胞骨架蛋白改建的影响。方法体外分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,传代至第2代,分别于常氧21%O_2及低氧8%O_2、4%O_2、2%O_2下培养。甲苯胺蓝、天狼星红及Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色观察不同氧体积分数下细胞显型的变化。细胞免疫荧光染色和实时定量逆转录聚合酶链反应检测细胞骨架蛋白,包括肌动蛋白、微管蛋白和波形蛋白的表达情况。结果不同氧体积分数下关节盘细胞仍然具有成纤维特性,3种细胞骨架蛋白有规律地排列。4%O_2时,肌动蛋白和波形蛋白荧光强度最低(P<0.05);2%O_2时,微管蛋白荧光强度最高(P<0.05),其他各组间差异无统计学意义(P>0.05)。检测肌动蛋白mRNA表达,21%O_2组最高,而2%O_2组和4%O_2组最低(P<0.05);微管蛋白mRNA表达在2%O_2组最高,8%O_2组最低(P<0.05);波形蛋白mRNA表达,在4%O_2组最低,21%O_2组最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在不同氧体积分数条件下,细胞骨架蛋白有不同程度的改建,2%O_2可能是适合颞下颌关节盘细胞扩增的最佳氧体积分数。 展开更多

关键词 颞下颌关节盘 低氧 细胞骨架 肌动蛋白 微管蛋白 波形蛋白

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不同过氧化物对牙釉质结构和硬度的影响 被引量：4

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作者 乃正刚 苏世斌 +2 位作者 焦志新 贾美娥 王雪梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1083-1085,共3页

目的:探究30%过氧化氢(hydrogen peroxide,HP)、22%过氧化脲(carbamide peroxide,CP)、3%过硼酸钠(sodium perborate,SP)对离体牙漂白后牙齿釉质表面结构和硬度的差异。方法:筛选正常人离体牙标本并随机分为A、B、C、D 4组,分别用生理... 目的:探究30%过氧化氢(hydrogen peroxide,HP)、22%过氧化脲(carbamide peroxide,CP)、3%过硼酸钠(sodium perborate,SP)对离体牙漂白后牙齿釉质表面结构和硬度的差异。方法:筛选正常人离体牙标本并随机分为A、B、C、D 4组,分别用生理盐水、30%过氧化氢、22%过氧化脲、3%过硼酸钠对4组牙齿进行漂白处理,最后对离体牙进行电镜扫描(×2000)和维氏硬度测定并进行统计分析。结果:实验组与对照组相比,扫描电镜显示:30%过氧化氢和3%过硼酸钠组,其釉质表面呈散在的孔状,蜂窝状破坏,说明牙齿出现了不同程度的脱矿、溶解;22%过氧化脲组牙齿釉质表面结构基本完整,无明显脱矿和溶解现象;硬度测定结果显示:组间两两比较存在差异性(P<0.05),漂白后4个组牙齿硬度大小是:对照组>22%过氧化脲组>3%过硼酸钠>30%过氧化氢。结论:3种过氧化物漂白试剂中22%过氧化脲对牙釉质结构和硬度的影响最小。 展开更多

关键词 漂白剂 硬度 电镜扫描

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针对变异链球菌的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性 被引量：1

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作者 车春晓 姜科宇 +4 位作者 马媛媛 曾飒 周建业 李志强 何祥一 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期295-301,共7页

目的研究针对变异链球菌(S.mutans)的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性。方法通过标准固相合成技术(Fmoc保护法)合成人源抗菌肽LL-37、S.mutans感受态刺激肽(CSP)C端16个氨基酸组成的多肽CSPC16及二者的重组多肽C16LL-37;以LL... 目的研究针对变异链球菌(S.mutans)的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性。方法通过标准固相合成技术(Fmoc保护法)合成人源抗菌肽LL-37、S.mutans感受态刺激肽(CSP)C端16个氨基酸组成的多肽CSPC16及二者的重组多肽C16LL-37;以LL-37、CSPC16为对照组,采用平板菌落计数法检测C16LL-37对S.mutans、黏性放线菌、大肠埃希菌、嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其对S.mutans的靶向性。通过扫描电子显微镜(SEM)观察,浓度为32μmol·L^(-1)的C16LL-37作用后S.mutans的细胞形态学变化;利用酶联免疫吸附法测定C16LL-37的红细胞溶血率以及不同条件对C16LL-37抗菌活性的影响。结果 1)C16LL-37对S.mutans的最小抗菌浓度为16μmol·L^(-1),最小杀菌浓度为64μmol·L^(-1)。2)C16LL-37浓度为64μmol·L^(-1)时,作用30 min后S.mutans存活率为3.46%,作用60 min后细菌存活率降至0%,其他4种细菌在各时间的存活率均大于60%(P<0.05)。3)SEM观察:经C16LL-37(32μmol·L^(-1))作用后,部分S.mutans细胞形态出现不规则改变,部分细胞的细胞膜粗糙、细胞质外溢或出现细胞裂解。4)C16LL-37浓度不超过64μmol·L^(-1)时,红细胞溶血率低于0.33%,与阴性对照组无明显差异(P>0.05)。5)不同温度、p H值、盐浓度及低浓度胰蛋白酶处理后,C16LL-37的抗菌活性无明显变化(P>0.05)。结论 C16LL-37对变异链球菌具有靶向特异性,并且具有较强的抗菌活性、较高的生物安全性及良好的稳定性。 展开更多

关键词 变异链球菌 感受态刺激肽 抗菌肽 特异性靶向抗菌肽

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PHMG根管封闭剂的制备及性能测定 被引量：1

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作者 贾美娥 乃正刚 +4 位作者 林君 解斯羽 张学琛 任君 何祥一 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期907-911,共5页

目的：制备并筛选出符合ISO 6876：2001标准的聚六亚甲基单胍（PHMG）改性根管封闭剂,测定其物理性能和抑菌性能,以开发具有较强抑菌性能的新型根管封闭剂。方法：以氧化锌丁香油糊剂（ZOE）为对照,按照ISO 6876：2001规定的方法,测定不... 目的：制备并筛选出符合ISO 6876：2001标准的聚六亚甲基单胍（PHMG）改性根管封闭剂,测定其物理性能和抑菌性能,以开发具有较强抑菌性能的新型根管封闭剂。方法：以氧化锌丁香油糊剂（ZOE）为对照,按照ISO 6876：2001规定的方法,测定不同PHMG浓度的根管封闭剂的物理性能;采用琼脂扩散法,测定其对粪肠球菌、白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌性能;并进行统计学分析。结果：11组不同材料的流动性、固化时间、薄膜厚度和溶解率均符合ISO 6876：2001标准;固化后尺寸变化中以浓度为0.8%~2.0%的材料符合ISO6876：2001标准。PHMG根管封闭剂的抑菌性显著高于氧化锌丁香油糊剂的抑菌性（P〈0.05）。结论：成功制备出符合新型根管封闭剂要求的PHMG根管封闭剂;PHMG浓度在0.8%~1.4%之间的根管封闭剂性能最佳。 展开更多

关键词 PHMG 根管封闭剂 物理性能 抑菌性能

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3种植物提取物联用对变形链球菌致龋力的影响 被引量：2

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作者 董伟 陈锐 +1 位作者 颜权 包广洁 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第9期943-945,共3页

目的:探究绿茶、野菊花、薄荷提取物及其混合物对变形链球菌增殖、产酸及粘附能力的影响。方法:变形链球菌在含有不同浓度植物提取物的MS培养基中培养24h后,进行离心,清洗,将菌细胞混悬于一定体积蒸馏水中,分光光度计测出A值。使用pH仪... 目的:探究绿茶、野菊花、薄荷提取物及其混合物对变形链球菌增殖、产酸及粘附能力的影响。方法:变形链球菌在含有不同浓度植物提取物的MS培养基中培养24h后,进行离心,清洗,将菌细胞混悬于一定体积蒸馏水中,分光光度计测出A值。使用pH仪测定离心后上清液pH值。玻片粘附法观察提取物对变形链球菌粘附能力的影响。结果:各浓度的提取物及其混合物对变形链球菌增殖、产酸、粘附均有抑制作用(P<0.05)。浓度为24g/L时,绿茶较其他提取物抑制变形链球菌增殖能力强(P<0.01)。浓度为0.75g/L、1.5g/L、3g/L时,混合物抑制变形链球菌粘附能力较同浓度其他提取物强(P<0.05)。结论:3种植物提取物均具有一定防龋能力,在抑制变形链球菌粘附能力方面三者可协同发挥作用。 展开更多

关键词 绿茶 野菊花 薄荷 变形链球菌 致龋力

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星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩的影响

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作者 保善英 包广洁 +2 位作者 唐玉尧 刘琳 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期275-279,共5页

目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中... 目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中分别接种于三维柱状琼脂糖井;每天每井换液,培养1周后观察自组装基体的形态变化;冰冻切片染色显示自组装基体细胞外基质及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的分布;酶联免疫吸附测定(ELISA)和Blyscan试剂盒检测基体细胞外基质含量的变化。结果山羊颞下颌关节盘细胞接种4 h后,星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装,形成一圆盘状基体,之后变成球形。各组自组装基体在1周时天狼星红染色可见基体内大量胶原纤维分布;番红染色显示基体内纤维软骨样细胞明显分泌糖胺多糖(GAGs);Ⅰ型胶原(ColⅠ)在免疫组织化学染色中呈强阳性;α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。星孢菌素组自组装基体内ColⅠ和GAGs较高,其中10 nmol·L^-1组最明显(P<0.01)。结论星孢菌素对自组装基体的收缩有一定干预效果,但不是非常突出;它更有利于细胞外基质的合成。 展开更多

关键词 星孢菌素 自组装基体 颞下颌关节盘

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腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立

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作者 孙贵军 秦晓东 +5 位作者 王世琴 胡慧珍 陆笑颜 金佳佳 吴生荣 何祥一 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期25-30,共6页

目的通过腺病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的牙周膜细胞系,以构建腺病毒介导的高效、稳定的hTERT牙周膜细胞系。方法聚合酶链反应(PCR)法扩增hTERT基因编码序列,构建同源重组腺病毒质粒p Ad-pshuttle-cmv-h TERT... 目的通过腺病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的牙周膜细胞系,以构建腺病毒介导的高效、稳定的hTERT牙周膜细胞系。方法聚合酶链反应(PCR)法扩增hTERT基因编码序列,构建同源重组腺病毒质粒p Ad-pshuttle-cmv-h TERT,收集腺病毒颗粒后感染人牙周膜细胞,实时荧光定量PCR检测h TERT及成骨相关基因碱性磷酸酶、核心结合因子2、骨涎蛋白、骨钙素、骨桥素、Ⅰ型胶原蛋白m RNA的表达水平,茜素红染色观察成骨分化能力,CCK-8检测细胞增殖能力。结果成功构建了含h TERT基因的腺病毒颗粒并感染牙周膜细胞,感染细胞与正常牙周膜细胞形态相似;实时荧光定量PCR结果显示h TERT及成骨相关基因在感染细胞中高表达;茜素红染色显示牙周膜细胞系成骨能力强;CCK-8结果示牙周膜细胞系增殖能力强。结论通过腺病毒法成功建立了过表达h TERT的人牙周膜细胞系,其具有较强的成骨分化能力,这为研究牙周膜再生机制提供了一个理想的细胞系。 展开更多

关键词 牙周膜细胞 人端粒酶反转录酶 腺病毒 稳定表达 成骨分化

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