啮齿类实验动物4种常见病原菌多重巢式PCR检测方法的建立与初步应用

1

作者 席晓霞 孙婧 +3 位作者 郭家熙 张丽娟 刘晓玲 段天林 《中兽医医药杂志》 2025年第4期18-25,共8页

建立一种检测啮齿类实验动物鼠伤寒沙门菌、鼠棒状杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等4种常见致病菌的多重巢式PCR检测方法,在此基础上,采用咽拭子和肛拭子等采样方法优化检测流程。试验针对病原菌16S rDNA序列保守区和可变区,通过... 建立一种检测啮齿类实验动物鼠伤寒沙门菌、鼠棒状杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等4种常见致病菌的多重巢式PCR检测方法,在此基础上,采用咽拭子和肛拭子等采样方法优化检测流程。试验针对病原菌16S rDNA序列保守区和可变区,通过引物长短差异分别设计通用引物和特异性引物,通过巢式PCR检测各种样本中的病原菌。结果显示,优化后的四重巢式PCR方法可对同一样品中的4种致病菌模板进行特异性扩增,无交叉反应;多重巢式PCR方法可从标准菌株DNA模板中扩增出待检病原菌DNA片段,而阴性对照组均未能检出;多重巢式PCR方法的检测灵敏度明显高于普通多重PCR方法(≤10-2pg/μL vs≤1 pg/μL);多重巢式PCR方法可从混合感染的样本中特异性地检测出4种致病菌;在实际应用中,多重巢式PCR可检测出病原菌感染的阳性样本,且检出率高于普通多重PCR方法。本试验建立的4种病原菌多重巢式PCR检测方法可同时检测动物咽拭子或肛拭子等临床样本中的多种病原菌,与普通多重PCR方法相比,该方法具有省时省力、灵敏性高、特异性强等优点。 展开更多

关键词 多重巢式PCR 鼠伤寒沙门菌 鼠棒状杆菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

浅谈实验动物质量检测规范化采样 被引量：2

2

作者 张丽娟 孙婧 段天林 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第5期90-93,共4页

实验动物是生命科学、医学、兽医学、生物医药等众多研究领域科学实验的重要生物材料,应用广泛。随着科技发展,实验动物的需求量也不断增加。因课题研究方向多样,使用的实验动物品种多、数量大,实验动物的质量控制显得尤为重要。实验动... 实验动物是生命科学、医学、兽医学、生物医药等众多研究领域科学实验的重要生物材料,应用广泛。随着科技发展,实验动物的需求量也不断增加。因课题研究方向多样,使用的实验动物品种多、数量大,实验动物的质量控制显得尤为重要。实验动物的质量直接影响研究结果、科研成果评价以及生物安全等。实验动物的质量检测对于提升实验动物质量控制能力、保障实验动物安全具有重要意义。在实验动物质量检测工作中,检测结果除了受到实验方法、实验设备、试剂等因素的影响外,还与样本的采集、运输、保存等因素密切相关。实验动物的样本采集是检测工作中的一项重要内容,如何规范地采集样本,直接关系到检测结果的准确性和可靠性。本文对实验动物检测规则、样本采集人员及物品准备、采集方法、记录、常见问题等进行详细阐述,为实验动物质量检测的采样工作提供参考。 展开更多

关键词 实验动物 质量检测 规范化 样本采集

在线阅读 下载PDF 职称材料

锰超氧化物岐化酶模拟化合物诱导K562细胞凋亡的机制研究 被引量：8

3

作者 范临兰 魏虎来 +2 位作者 窦伟 刘伟生 张慧芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1363-1366,共4页

目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物（mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm）对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法（MTT法）测定细胞增殖活性;Annexin V/P... 目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物（mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm）对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法（MTT法）测定细胞增殖活性;Annexin V/PI双标记和细胞形态学法检测细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2和bax基因mRNA的表达水平;流式细胞术（FCM）测定Bcl-2和Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞色素C（Cyt C）释放和Caspase-3活性变化。结果0.5~10mg·mL-1MnSODm明显抑制K562细胞增殖（P〈0.01）,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;bcl-2基因mRNA和蛋白表达下调,bax基因mRNA和蛋白表达上调,线粒体Δψm降低,Cyt C释放增多,Caspase-3活性增强。结论MnSODm调控Bax/Bcl-2表达,通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。 展开更多

关键词 MnSOD模拟化合物 K562细胞 凋亡 Bcl-2 BAX 膜电位 细胞色素C CASPASE-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

硒酸酯多糖诱导白血病多药耐药细胞凋亡的作用机制 被引量：7

4

作者 张哲文 魏虎来 +2 位作者 苏海翔 刘建民 郝春燕 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第5期505-508,共4页

目的:观察硒酸酯多糖(Kappaselenocarrageenan,KSC)对K562ADM耐药细胞的诱导凋亡效应,并探讨其作用机制。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、WrightGiemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(Flowcytometry,FCM)观察K562ADM细胞凋亡;FCM测... 目的:观察硒酸酯多糖(Kappaselenocarrageenan,KSC)对K562ADM耐药细胞的诱导凋亡效应,并探讨其作用机制。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、WrightGiemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(Flowcytometry,FCM)观察K562ADM细胞凋亡;FCM测定K562ADM细胞Fas、P53和Bcl2蛋白表达水平;RTPCR检测Caspase3mRNA的表达。结果:50～500mg·L-1KSC抑制K562ADM细胞增殖,并诱导K562ADM细胞凋亡,细胞出现呈典型凋亡形态改变,DNA电泳可见DNA梯状条带(DNAladder);FCM分析出现亚G1期细胞群,S期细胞比例增高。Fas蛋白表达上调,Bcl2蛋白表达下调,Caspase3mRNA表达显著增强,但P53蛋白表达无明显改变。结论:KSC通过Fas依赖性Caspase3激活途径诱导K562ADM细胞凋亡。 展开更多

关键词 白血病 多药耐药 硒酸酯多糖 凋亡 机制

在线阅读 下载PDF 职称材料

锰超氧化物歧化酶模拟化合物通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡 被引量：6

5

作者 范临兰 李娟 +2 位作者 魏虎来 窦伟 刘伟生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第8期847-850,共4页

目的:探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物(mi mics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞的凋亡诱导效应及作用机制。方法:应用MTT比色法、An-nexin V/PI双标记和细胞形态学法观察细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Fa... 目的:探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物(mi mics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞的凋亡诱导效应及作用机制。方法:应用MTT比色法、An-nexin V/PI双标记和细胞形态学法观察细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Fas蛋白表达水平;RT-PCR检测Caspase-3mRNA的表达水平,比色法测定Caspase-3活性变化。结果:MnSODm作用后K562细胞的增殖受到抑制,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变。同时,Fas蛋白表达水平显著增高,Caspase-3mRNA表达水平明显升高,活性显著增强。结论:MnSODm可能通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡。 展开更多

关键词 锰超氧化物歧化酶模拟化合物 白血病 细胞凋亡 FAS蛋白 CASPASE-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯的影响 被引量：5

6

作者 王学习 赵健雄 +2 位作者 陈茹 程卫东 白德成 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期343-346,共4页

目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响。方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2+]、细... 目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响。方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2+]、细胞间通讯状况。结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞RNA、DNA含量降低,[Ca2+]升高,细胞间通讯状况得到改善。结论:扶正抑瘤颗粒含药血清抑制H22细胞的增殖,并提高肿瘤细胞[Ca2+],阻止肿瘤细胞分裂。 展开更多

关键词 扶正抑瘤颗粒 中药血清 [Ca^2+] 细胞间通讯

在线阅读 下载PDF 职称材料

siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性 被引量：4

7

作者 高丽萍 魏虎来 +5 位作者 景涛 吴勇杰 陈静 孙静 易娟 赵怀顺 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第1期58-61,共4页

背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选... 背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs(si-mdr1-1,si-mdr1-2),脂质体介导转染K562/ADM细胞;RT-PCR法检测mdr1mRNA的转录;流式细胞术测定P-糖蛋白(P-gp)表达水平;MTT法检测K562/ADM细胞对多柔比星(阿霉素,ADM)的敏感性。结果si-mdr1-1、si-mdr1-2转染24h和48h,si-mdr1-1的抑制率分别为55.5%和22.5%,而si-mdr1-2则分别为16.0%和57.6%。si-mdr1-1和si-mdr1-2作用72h时,P-gp的表达强度分别下降74%和85%。si-mdr1-1和si-mdr1-2均可提高K562/ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性,逆转倍数分别为2.52倍和1.96倍。结论siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达,逆转P-gp介导的白血病细胞耐药性。 展开更多

关键词 SIRNA MDR1基因 白血病 耐药性

在线阅读 下载PDF 职称材料

非创伤性股骨头坏死相关基因的表达调控 被引量：3

8

作者 张辉 台会平 +4 位作者 王和平 郭士方 王芳 王仁济 陈根元 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1298-1299,共2页

目的:通过构建股骨头坏死的一般模型,找出与此病相关的基因表达变化及其可能的信号转导通路,进而为非创伤性股骨头坏死的临床骨组织基因工程学方法治疗提供理论依据。方法:40只新西兰兔分两组,每组20只。模型组注射内毒素和甲基强的松龙... 目的:通过构建股骨头坏死的一般模型,找出与此病相关的基因表达变化及其可能的信号转导通路,进而为非创伤性股骨头坏死的临床骨组织基因工程学方法治疗提供理论依据。方法:40只新西兰兔分两组,每组20只。模型组注射内毒素和甲基强的松龙;对照组注射等量的生理盐水。第8周将两组兔同时处死,取兔后腿关节软骨电镜观察,破碎抽提DNA然后PCR扩增血管内皮生长因子(VEGF),将部分骨组织破碎抽提DNA后电泳检测。结果:模型组电镜观察发现细胞粗面内质网膨大,线粒体空泡化,附着核糖体减少说明模型建立成功可以进行相关实验。VEGF mRNA的表达水平明显降低,软骨细胞DNA电泳结果出现DNA ladder。结论:骨细胞病变可能由于内外因共同作用产生凋亡信号致使部分细胞凋亡引起骨组织大部分细胞坏死,进而导致内皮生长因子表达水平降低,内质网附着核糖体减少等细胞学现象。 展开更多

关键词 非创伤性股骨头坏死 细胞凋亡 细胞坏死 信号转导 免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

三氧化二砷诱导K562/ADM耐药细胞凋亡中活性氧的作用 被引量：3

9

作者 张亚莉 魏虎来 郭璐 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第12期1375-1379,共5页

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562/ADM细胞凋亡中活性氧(ROS)的作用和其与耐药基因mdr1及其编码的P-糖蛋白(P-gp)表达的关系。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测K562/ADM细胞增殖活性;AnnexinⅤ/PI染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基... 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562/ADM细胞凋亡中活性氧(ROS)的作用和其与耐药基因mdr1及其编码的P-糖蛋白(P-gp)表达的关系。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测K562/ADM细胞增殖活性;AnnexinⅤ/PI染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基因mRNA的表达;流式细胞术测定P-gp表达、ROS活性和细胞内阿霉素(ADM)含量。结果:As2O3显著抑制K562/ADM细胞的增殖,AnnexinⅤ/PI双染检测显示凋亡细胞明显增加;ROS活性明显下降;mdr1mRNA和P-gp表达明显降低,P-gp功能受抑,细胞内ADM含量显著增高。结论:As2O3抑制K562/ADM耐药细胞的增殖活性和促进其凋亡,其机制可能为通过降低细胞ROS水平、抑制mdr1/P-gp的表达和功能,进而逆转mdr1/P-gp介导的多药耐药和凋亡抑制。 展开更多

关键词 三氧化二砷 多药耐药 凋亡 活性氧 mdr1 P-糖蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

(GTG)_5探针产生的DNA指纹图在近交系小鼠遗传检测中的应用 被引量：2

10

作者 王芳 孙以方 +2 位作者 段天林 安蓓 张文慧 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第5期361-364,共4页

目的探讨用非放射性标记的寡聚核苷酸探针（GTG）5进行近交系小鼠的DNA指纹分析。方法用非放射性标记的寡聚核苷酸探针（GTG）5制作BALB/c、C57BL/6J、DBA/2、C3H近交系小鼠的DNA指纹图,对这四个品系的小鼠进行遗传检测,分析各品系内和... 目的探讨用非放射性标记的寡聚核苷酸探针（GTG）5进行近交系小鼠的DNA指纹分析。方法用非放射性标记的寡聚核苷酸探针（GTG）5制作BALB/c、C57BL/6J、DBA/2、C3H近交系小鼠的DNA指纹图,对这四个品系的小鼠进行遗传检测,分析各品系内和品系间的遗传变异性。结果（GTG）5探针可产生具有良好多态性的DNA指纹图,平均图带数为8-12条。各品系内的DNA指纹图平均相似系数（^-x）在0.96-1.00的范围内,具有相同指纹图的概率（P）均在3.1×10^-1以上,极显著地高于品系间的相似系数（0.22-0.39）和相同指纹图的概率（P〈1.07×10^-4）。结论（GTG）5可用于制作近交系小鼠的DNA指纹图以对其进行遗传检测。 展开更多

关键词 寡聚核苷酸探针 DNA指纹法 小鼠 近交系 遗传检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞的凋亡诱导作用 被引量：2

11

作者 陈静 张晓云 +1 位作者 倪京满 魏虎来 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第8期888-891,共4页

目的研究鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞K562的凋亡诱导效应。方法薄膜超声分散法制备鬼臼毒素纳米脂质体。不同浓度的鬼臼毒素和鬼臼毒素纳米脂质体分别处理K562细胞,MTT法检测细胞的增殖活性,细胞形态学改变和AnnexinⅤ/PI染色检... 目的研究鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞K562的凋亡诱导效应。方法薄膜超声分散法制备鬼臼毒素纳米脂质体。不同浓度的鬼臼毒素和鬼臼毒素纳米脂质体分别处理K562细胞,MTT法检测细胞的增殖活性,细胞形态学改变和AnnexinⅤ/PI染色检测细胞凋亡。结果鬼臼毒素纳米脂质体对K562细胞增殖的抑制作用明显高于鬼臼毒素,24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.71、0.02、0.003μg·ml-1,而鬼臼毒素为1.50、0.12、0.05μg·ml-1;0.01μg·ml-1鬼臼毒素纳米脂质体处理24、72h,AnnexinⅤ/PI染色K562细胞凋亡率分别为91.1%和92.7%,但72h时以晚期凋亡为主;而0.01μg·ml-1鬼臼毒素处理的细胞凋亡率分别为63.4%和66.8%。鬼臼毒素纳米脂质体和鬼臼毒素处理后,K562细胞出现皱缩、胞膜起泡、凋亡小体等典型的细胞凋亡形态学改变。结论鬼臼毒素纳米脂质体较鬼臼毒素对白血病K562细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效应。 展开更多

关键词 鬼臼毒素 纳米脂质体 细胞凋亡 K562细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

甘肃省10种鸟类新记录 被引量：2

12

作者 张立勋 安蓓 +1 位作者 周天林 刘迺发 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期57-59,共3页

近几年我们在甘肃省境内进行野外科学考察的过程中采集和见到白鹈鹕Pelecanus onocro- talus、小鸨Otis tetrax、红胸田鸡Porzana fusca、中贼鸥Stercorarius pomarinus、西藏毛腿沙鸡Syrr- haptes tibetanus、雪鹗Nyctea scandiaca、... 近几年我们在甘肃省境内进行野外科学考察的过程中采集和见到白鹈鹕Pelecanus onocro- talus、小鸨Otis tetrax、红胸田鸡Porzana fusca、中贼鸥Stercorarius pomarinus、西藏毛腿沙鸡Syrr- haptes tibetanus、雪鹗Nyctea scandiaca、长尾地鸫Zoothera dixoni、攀雀Remiz pendulinus、红额金翅雀Carduelis ambigus、红翅鵙鹛Ptesottius flaviscapis等10种鸟类,均为甘肃省首次记录．其中采集到标本的种类有中贼鸥、红胸田鸡、西藏毛腿沙鸡、雪鹗、长尾地鸫、红翅鹏鹛,野外观察到的种类有白鹈鹕、小鸨、攀雀和红额金翅雀． 展开更多

关键词 鸟类 新记录 甘肃省

在线阅读 下载PDF 职称材料

DNA指纹技术在近交系小鼠遗传检测中的应用研究 被引量：2

13

作者 段天林 刘英 +1 位作者 王芳 张文慧 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期26-29,共4页

采用生物素标记的（GGAT）4寡核苷酸探针对C57BL/6J、BALB/c和DBA/2三种近交系小鼠进行了DNA指纹图分析.结果表明：（GGAT）4寡核苷酸探针对上述3种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平均DNA指纹... 采用生物素标记的（GGAT）4寡核苷酸探针对C57BL/6J、BALB/c和DBA/2三种近交系小鼠进行了DNA指纹图分析.结果表明：（GGAT）4寡核苷酸探针对上述3种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平均DNA指纹图的相似系数在0.92-1.00的范围内,具有相同指纹图的概率均在0.40以上,极显著地高于品系间的相似系数（0.21-0.39）和相同指纹图的概率（P〈3.10×10^-7）,说明（GGAT）4寡核苷酸探针可用于制作近交系小鼠的DNA指纹图,以对其进行遗传检测. 展开更多

关键词 近交系小鼠 DNA指纹技术 遗传检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

三氧化二砷对K562/ADM耐药细胞凋亡抑制的逆转作用 被引量：3

14

作者 张亚莉 魏虎来 孙利军 《实用医学杂志》 CAS 2007年第23期3651-3654,共4页

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞法(FCM)测定P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和bcl-2蛋白表达及caspase-3活性。结果:As2O3显著抑制K562/ADM耐药细胞的增殖;经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,annexinV /PI双染显示凋亡细胞明显增加;mdr1mRNA表达和P-gp合成明显降低,凋亡抑制基因bcl-2mRNA及其蛋白bcl-2表达下调,caspase-3mRNA表达和caspase-3活性显著增强。结论:As2O3诱导K562/ADM耐药细胞凋亡,其主要机制可能为As2O3抑制mdr1和bcl-2基因表达,逆转耐药白血病细胞因bcl-2和P-gp高表达所介导的凋亡抑制。 展开更多

关键词 白血病 三氧化二砷 细胞凋亡 多药耐药抗药性 多药 凋亡抑制 P-糖蛋白 bcl-2 Caspase-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型自由基清除剂对鼠视神经挫伤后视网膜细胞的保护作用 被引量：5

15

作者 周海燕 高晨 +4 位作者 张景科 周丽雅 王小梅 田蔓男 魏志诚 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期40-44,共5页

目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen speciesin,ROS)的含量和依达拉奉(edaravone,MCI-186)对视网膜细胞的保护作用。方法 SD大鼠192只,雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各4... 目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen speciesin,ROS)的含量和依达拉奉(edaravone,MCI-186)对视网膜细胞的保护作用。方法 SD大鼠192只,雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各48只。对照组、治疗组用视神经钳夹法制作大鼠视神经夹挫伤模型;治疗组造模后腹腔注射依达拉奉30mg/kg,用生理盐水稀释后每隔12h腹腔注射给药。给药时间为30min,共14d。于实验的3、6、10、14d处死大鼠。2′,7′-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)为标记探针,通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞内2′,7′-二氯双氢荧光素(DCF)的荧光强度;以AnnexinV/PI双染色法通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡的形态特征;透射电镜观察各组鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的超微结构改变。结果造模后3～14d,视网膜细胞中活性氧的表达量和细胞总凋亡率在3、6、10、14d时每个时间点对照组较治疗组和正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),假手术与正常组间相比均无显著性差异。透射电镜检查显示:治疗组大鼠RGCs细胞核、染色质、细胞器损伤较对照组有明显减轻。结论依达拉奉通过清除ROS,阻止了RGCs凋亡,具有一定的视网膜细胞保护作用。 展开更多

关键词 自由基清除剂 视神经钳夹伤 视网膜细胞 活性氧 凋亡 超微结构 依达拉奉

在线阅读 下载PDF 职称材料

DNA指纹技术在近交系动物遗传检测中的研究 被引量：3

16

作者 段天林 孙以方 +2 位作者 张文慧 程杰 席晓霞 《中兽医医药杂志》 2005年第3期24-26,共3页

采用生物素标记的(GGAT)4寡核苷酸探针对DBA/1、DBA/2两种近交系小鼠及DBA/2×DBA/1F1代小鼠进行了DNA指纹图分析,并与常规生化位点标记分析法进行了比较。结果显示,DNA指纹图具有良好的多态性,不仅可以分辨生化位点标记分析法能够... 采用生物素标记的(GGAT)4寡核苷酸探针对DBA/1、DBA/2两种近交系小鼠及DBA/2×DBA/1F1代小鼠进行了DNA指纹图分析,并与常规生化位点标记分析法进行了比较。结果显示,DNA指纹图具有良好的多态性,不仅可以分辨生化位点标记分析法能够区分的不同品系的近交系动物,而且也能够分辨生化位点标记分析法不能区分的不同品系的近交系动物。研究还表明,用同一方法重复同一基因组DNA的指纹图时,获得相同的实验结果。因此,DNA指纹图法不仅比传统的生化位点检测分析法有更好的分辨力,也具有良好的稳定性。 展开更多

关键词 实验动物 近交系小鼠 DNA指纹图 生化位点标记 遗传质量 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

SPF级BALB/cC57BL/6小鼠繁殖性能及生长发育的比较研究 被引量：7

17

作者 席晓霞 秦天达 +4 位作者 吴润 程杰 张景科 田永刚 张文慧 《畜牧兽医杂志》 2009年第6期11-12,共2页

为提高SPF级实验动物的质量,选择10周龄BALB/c C57BL/6小鼠各50只（雌雄各半）,采取雌雄1？1近亲交配繁殖,并统计其生长发育和繁殖性能指标。BALB/c小鼠1～3周龄的平均窝重及离乳后的体重增长明显大于C57BL/6小鼠（p〈0.01）。第1胎交... 为提高SPF级实验动物的质量,选择10周龄BALB/c C57BL/6小鼠各50只（雌雄各半）,采取雌雄1？1近亲交配繁殖,并统计其生长发育和繁殖性能指标。BALB/c小鼠1～3周龄的平均窝重及离乳后的体重增长明显大于C57BL/6小鼠（p〈0.01）。第1胎交配分娩间隔,第1和第3胎离乳育成率品系间差异均有显著性（P〈0.05及P〈0.01）。BALB/c小鼠的体格比C57BL/6小鼠大,带乳能力比C57BL/6小鼠强但产仔能力比C57BL/6小鼠弱。 展开更多

关键词 SPF级 小鼠 繁殖性能

在线阅读 下载PDF 职称材料

依达拉奉对大鼠视神经钳夹伤后视网膜细胞的保护作用 被引量：2

18

作者 周海燕 高晨 +3 位作者 周丽雅 张景科 王小梅 田蔓男 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第12期1113-1116,1121,共5页

目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量和依达拉奉对视网膜细胞的保护作用。方法选择健康清洁级SD大鼠192只(384眼),雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各48... 目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量和依达拉奉对视网膜细胞的保护作用。方法选择健康清洁级SD大鼠192只(384眼),雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各48只。对照组、治疗组用视神经钳夹法制作大鼠视神经夹挫伤模型;治疗组造模后腹腔注射依达氉拉奉30mg·kg-1,用生理盐水稀释后每隔12h腹腔注射给药。给药时间为30min,共14d。分别于造模后3d、6d、10d、14d处死大鼠。光镜下观察各组不同时间点视网膜结构,通过激光共聚焦显微镜观察视网膜切片TUNEL荧光标记,2’,7’-二氯双氢荧光素双乙酸酯为标记探针,通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞内2’,7’-二氯双氢荧光素的荧光强度。以AnnexinV/PI双染色法通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞凋亡率。结果造模后3～14d,正常组及假手术组视网膜细胞偶见TUNEL阳性标记;对照组见大量TUNEL阳性标记细胞,但治疗组明显少于对照组。视网膜细胞中ROS的表达量在造模后3d、6d、10d、14d时正常组分别为32.530±2.203、43.600±3.635、32.800±1.952、45.330±2.902,治疗组分别为84.507±3.754、65.130±5.308、63.400±5.226、66.990±6.320,对照组分别为92.830±2.875、99.900±0.100、99.300±1.212、92.470±2.159,每个时间点治疗组和对照组比较、正常组和对照组比较、正常组和治疗组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);假手术组与正常组间相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。细胞总凋亡率也明显升高,造模后3d、6d、10d、14d时正常组分别为(9.550±0.325)%、(10.380±0.642)%、(11.540±1.224)%、(10.520±0.839)%,治疗组分别为(22.960±2.574)%、(27.590±1.369)%、(33.950±4.580)%、(25.810±2.170)%,对照组分别为(35.510±3.086)%、(37.550±2.357)%、(40.220±5.011)%、(34.320±3.351)%,每个时间点治疗组和对照组、正常组和对照组、正常组和治疗组之间比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),假手术组与正常组间相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论依达拉奉通过清除ROS,抑制了视网膜细胞凋亡,具有一定的视网膜细胞保护作用。 展开更多

关键词 依达拉奉 视神经钳夹伤 活性氧 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

DNA指纹技术对近交系小鼠生产扩大群的遗传检测 被引量：2

19

作者 段天林 刘英 +1 位作者 范晓梅 王芳 《中兽医医药杂志》 2008年第6期12-15,共4页

采用生物素标记的(GGAT)4寡核苷酸探针对C57BL/6J、BALB/c和DBA/2三种近交系生产扩大群F4代小鼠进行了DNA指纹图分析。结果显示(GGAT)4寡核苷酸探针对上述三种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平... 采用生物素标记的(GGAT)4寡核苷酸探针对C57BL/6J、BALB/c和DBA/2三种近交系生产扩大群F4代小鼠进行了DNA指纹图分析。结果显示(GGAT)4寡核苷酸探针对上述三种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平均DNA指纹图的相似系数(X)在0.88-0.95的范围内,具有相同指纹图的概率(P)均在0.35以上,极显著地高于品系间的相似系数(0.18-0.31)和相同指纹图的概率(P(8.4×10-7)。研究结果表明(GGAT)4寡核苷酸探针可用于制作近交系小鼠生产扩大群的DNA指纹图,以对其进行遗传检测。 展开更多

关键词 近交系小鼠 DNA指纹技术 生产扩大群 遗传检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

雏鸭绿脓杆菌病的诊治试验 被引量：2

20

作者 席晓霞 滕梅英 张文慧 《山东畜牧兽医》 2009年第7期19-20,共2页

本文就甘肃省兰州市某养殖户鸭场的6只病鸭的病料,经组织接种培养及细菌分离纯培养鉴定,确定了该批雏鸭暴发疾病是由绿脓杆菌引起,在此基础上提出了综合性的防治措施。

关键词 雏鸭 绿脓杆菌 诊治

在线阅读 下载PDF 职称材料