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淫羊藿总黄酮胶囊对生长期大鼠骨密度和骨形态计量学的影响 被引量：1
1
作者 高玉海 杨芳芳 +3 位作者 葸慧荣 李文苑 甄平 陈克明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期581-586,共6页
目的：研究淫羊藿总黄酮胶囊（ITFC）对生长期大鼠峰值骨密度和骨形态计量学的影响，探索其抗骨质疏松的作用机制。方法：30只雌性SD大鼠按体质量随机分为正常对照纽、ITFC-1组及ITFC-2组。其中。ITFC-1组和ITFC-2组分别以50mg·k-1... 目的：研究淫羊藿总黄酮胶囊（ITFC）对生长期大鼠峰值骨密度和骨形态计量学的影响，探索其抗骨质疏松的作用机制。方法：30只雌性SD大鼠按体质量随机分为正常对照纽、ITFC-1组及ITFC-2组。其中。ITFC-1组和ITFC-2组分别以50mg·k-1·d-1ITFC和100mg·kg-1·d-1ITFC灌胃，正常对照组灌服等体积蒸馏水。在灌胃后4、8、12周测定全身骨密度。12周后处死大鼠检测右侧股骨和腰椎骨骨密度；ELISA法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP5b）和骨碱性磷酸酶（BALP）水平；右侧胫骨进行骨形态计量学分析。结果：与正常对照组比较，ITFC-1组和ITFC-2组大鼠体质量增加减少，但差异无统计学意义（均P〉0．05）。4周和8周时，ITFC-1组和ITFc-2组全身骨密度均有所提高，但与正常对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。12周时，ITFC-1组和ITFC-2组大鼠全身骨密度、离体骨密度及血清BALP和骨小梁面积百分比均高于正常对照组（均P〈0．05），骨小梁分离度均低于正常对照组（均P〈0．05）；ITFC-2组大鼠骨小梁宽度和数量均高于正常对照组，血清TRACP5b低于正常对照组（均P〈0．05）；ITFC-2组大鼠离体骨密度、血清BALP、骨小梁数量和面积百分比均高于ITFC-1组，骨小梁分离度和血清TRACP5b均低于ITFC-1组（均P〈0．05）。结论：ITFc有可能通过提高骨密度、增加骨形成、降低骨吸收及改善骨组织微结构来预防老年骨质疏松的发生。 展开更多
关键词 黄酮类/投药和剂量 淫羊藿甙/治疗应用 骨质疏树中药疗法 骨和骨组织/解剖学和组织学 疾病模型 动物 骨密度
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初级纤毛细胞外氧感受器功能和机制研究
2
作者 高玉海 漆欣筑 +3 位作者 周建 王昕 陈克明 马慧萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期618-624,共7页
目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位和PC1... 目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位和PC12细胞初级纤毛生长情况;实时定量RT-PCR法检测HIF-1α、Nrf2、血管内皮生长因子(VECF)和超氧化物歧化酶(SOD)基因表达。结果:siRNA干扰组细胞的初级纤毛被抑制。与常氧对照组比较,缺氧对照组和阴性对照组细胞的HIF-1α和Nrf2发生了明显的核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达量增加,SOD表达量下降;siRNA干扰组细胞在缺氧状态下HIF-1α和Nrf2未发生核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达受到抑制,而SOD表达量升高。结论:PC12细胞的初级纤毛可能具有细胞外氧感受器的作用,可以感知细胞外环境中的缺氧和氧化应激状态,并通过一定途径将缺氧信号传导至细胞内,进而启动细胞抗缺氧机制。 展开更多
关键词 PC12细胞 纤毛 感受器 感觉 缺氧/病理生理学 动力传导 细胞 RNA 小分子干扰
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1.8 mT不同频率正弦电磁场对青年大鼠骨生物力学性能的影响 被引量：3
3
作者 周延峰 高玉海 +1 位作者 甄平 陈克明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期561-567,共7页
目的：研究1．8mT不同频率的正弦交变电磁场对青年大鼠骨密度和骨生物力学性能的影响。方法：32只6周龄雌性SD大鼠随机分为对照组、10Hz组、25Hz组和40Hz组，每组8只。除对照组外，均每日给予1．8mT不同频率的正弦电磁场干预，干预时间... 目的：研究1．8mT不同频率的正弦交变电磁场对青年大鼠骨密度和骨生物力学性能的影响。方法：32只6周龄雌性SD大鼠随机分为对照组、10Hz组、25Hz组和40Hz组，每组8只。除对照组外，均每日给予1．8mT不同频率的正弦电磁场干预，干预时间均为90min。干预后第4、8周经双能X线骨密度仪检测全身骨密度，并在第8周骨密度检测之后处死实验大鼠，分离骨组织，检测股骨与腰椎骨的骨密度，测量股骨长度、直径、内外两髁外侧间距，用电子万能材料试验机检测股骨和腰椎骨的生物力学指标，显微CT分析胫骨松质骨的骨微结构改变。结果：与对照组比较，10Hz组、40Hz组大鼠的全身骨密度、股骨骨密度、股骨最大载荷、屈服强度以及腰椎骨最大载荷、弹性模量差异均有统计学意义（均P〈0．05）；而股骨的长度、直径、两髁间的宽度与对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。显微CT分析结果显示，10Hz组、40Hz组大鼠胫骨松质骨的骨小梁数量、分离度、骨体积百分比较对照组均增加（均P〈0．01）。25Hz组全身骨密度及股骨生物力学性能与对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：10、40Hz的1．8mT正弦交变电磁场可提高青年大鼠骨密度、改善骨微结构和骨生物力学特性。 展开更多
关键词 大鼠 Sprague—Dawley 电磁场 胫骨 骨密度 骨质疏松/病理学 生 物力哮
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淫羊藿素通过CXCR4/SDF-1信号通路促进小鼠成骨细胞成熟和矿化 被引量：8
4
作者 魏振龙 石文贵 +2 位作者 陈克明 周建 王鸣刚 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期571-577,共7页
目的:研究淫羊藿素是否通过CXC趋化因子受体4(CXCR4)/基质细胞衍生因子1(SDF-1)信号通路促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1成熟和矿化。方法:将体外培养的MC3T3-E1细胞分为空白对照组、AMD3100组、淫羊藿素组、淫羊藿素加AMD3100组。药物处理24 ... 目的:研究淫羊藿素是否通过CXC趋化因子受体4(CXCR4)/基质细胞衍生因子1(SDF-1)信号通路促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1成熟和矿化。方法:将体外培养的MC3T3-E1细胞分为空白对照组、AMD3100组、淫羊藿素组、淫羊藿素加AMD3100组。药物处理24 h时,采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4、SDF-1和成骨相关基因和蛋白的表达;药物处理3、6 d时,采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP的活性;药物处理14 d时,采用茜素红染色法检测钙化结节。结果:实时定量RT-PCR检测结果显示,与空白对照组比较,淫羊藿素组CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG基因表达量增加(P<0.05或P<0.01),而加入CXCR4拮抗剂AMD3100后,CXCR4基因相对表达量减少(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,与空白对照组比较,淫羊藿素组CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG蛋白的相对表达量增加(均P<0.01),而加入AMD3100后,CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG蛋白表达量减少(均P<0.01)。药物处理第3天和第6天时,淫羊藿素组ALP活性明显高于空白对照组(均P<0.01),而加入AMD3100后ALP活性显著降低(均P<0.01)。药物处理14 d时,与空白对照组比较,淫羊藿素组茜素红染色面积增加,而加入AMD3100后茜素红染色面积明显减少。结论:淫羊藿素可能通过CXCR4/SDF-1信号通路促进小鼠成骨细胞成熟及矿化。 展开更多
关键词 成骨细肜药物作用 淫羊藿甙/药理学 趋化因子 CXC/代谢 受体 CXCR4/代谢 细胞分化 信号传导 小鼠 细胞 培养的
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白藜芦醇对生长期大鼠峰值骨量的影响 被引量：4
5
作者 葸慧荣 高玉海 +3 位作者 杨芳芳 李文苑 马慧萍 陈克明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期578-584,共7页
目的:研究白藜芦醇对生长期大鼠峰值骨密度和骨质量的影响。方法:36只1月龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、淫羊藿苷组和白藜芦醇组,每组12只。淫羊藿苷组灌服淫羊藿苷25 mg·kg^(-1)·d^(-1),白藜芦醇组灌服白藜芦醇8.4 mg... 目的:研究白藜芦醇对生长期大鼠峰值骨密度和骨质量的影响。方法:36只1月龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、淫羊藿苷组和白藜芦醇组,每组12只。淫羊藿苷组灌服淫羊藿苷25 mg·kg^(-1)·d^(-1),白藜芦醇组灌服白藜芦醇8.4 mg·kg^(-1)·d^(-1),空白对照组灌服等体积蒸馏水。在灌胃4、8、12周时测定大鼠全身骨密度。12周时处死所有大鼠,进行股骨和椎骨离体骨密度检测、骨生物力学分析、血清骨代谢指标检测、显微CT扫描以及重要器官的器官指数计算和病理学观察。结果:实验期间各组大鼠体质量均呈上升趋势,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各组大鼠心、肝、肾、肺、子宫等的器官指数差异无统计学意义(均P>0.05),器官组织病理学也未见异常改变。灌胃12周时,淫羊藿苷组和白藜芦醇组大鼠全身骨密度均高于空白对照组(均P<0.05),而淫羊藿苷组和白藜芦醇组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);右侧股骨和椎骨离体骨密度改变呈现出与全身骨密度改变相同的趋势。与空白对照组比较,淫羊藿苷组和白藜芦醇组大鼠股骨最大载荷,以及椎骨最大载荷、弹性模量显著升高(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,淫羊藿苷组和白藜芦醇组股骨松质骨的体积骨密度、骨小梁数目、骨小梁厚度和骨小梁占骨髓腔体积百分比(BV/TV)均显著升高(P<0.05或P<0.01),骨小梁分离度显著下降(P<0.05或P<0.01);各组间股骨皮质骨的体积骨密度无明显变化(P>0.05)。淫羊藿苷组和白藜芦醇组骨钙素含量显著高于空白对照组(均P<0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)含量显著低于空白对照组(均P<0.05)。结论:白藜芦醇能提高骨形成、抑制骨吸收,增加青年大鼠的峰值骨密度和骨质量,增强骨强度,改善骨组织微结构,并且无明显毒副作用。 展开更多
关键词 藜芦生物碱类/药理学 骨密度/药物作用 骨质疏树药物疗法:生 长期 大鼠 WISTAR
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低频脉冲电磁场促进成骨细胞分化的基因调节和非基因调节探究 被引量：1
6
作者 方清清 李志忠 +3 位作者 周建 石文贵 闫娟丽 陈克明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期568-574,共7页
目的：探究50Hz0．6mT脉冲电磁场（PEMF）促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞（ROB）分化成熟是否存在基因调节和非基因调节。方法：体外培养ROB，传代融合后经50Hz0．6mTPEMF处理1．5h，于0、3、6、9、12h检测碱性磷酸酶（ALP）的活性及其... 目的：探究50Hz0．6mT脉冲电磁场（PEMF）促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞（ROB）分化成熟是否存在基因调节和非基因调节。方法：体外培养ROB，传代融合后经50Hz0．6mTPEMF处理1．5h，于0、3、6、9、12h检测碱性磷酸酶（ALP）的活性及其基因表达，以及骨形成相关因子Runx2、OSX的基因和蛋白表达。结果：50Hz0．6mTPEMF处理后3h，ROB中ALP的活性高于对照组（P〈0．01），而其基因表达在处理后6h才高于对照组。Runx2的基因表达在处理后立即升高，持续至处理后6h回归对照组水平，之后再次升高，其蛋白表达与之相对应但略有滞后。OSX的基因表达亦在处理后立即升高，持续至处理后6h回归对照组水平，至12h时显著降低，其蛋白表达与之相对应但略有滞后。结论：50Hz0．6mTPEMF促进体外培养ROB分化成熟存在对Runx2和OSX的基因调节以及对ALP活性的非基因调节。 展开更多
关键词 成骨细肜辐射效应 颅骨 电磁场 动物 新生 细胞 培养的 细胞 分化 基因 调节 大鼠 WISTAR
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低频率低强度电磁场对体外培养大鼠颅骨成骨细胞成熟和矿化的影响 被引量：1
7
作者 朱保应 周建 +5 位作者 高玉海 石文贵 魏振龙 李文苑 王媛媛 陈克明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期585-592,共8页
目的:比较研究50 Hz 1.8 mT正弦电磁场(SEMF)和50 Hz0.6 mT脉冲电磁场(PEMF)对大鼠颅骨成骨细胞成熟和矿化的影响。方法:原代培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为空白对照组、SEMF组和PEMF组。SEMF组和PEMF组每天接受电磁场处理一次,每... 目的:比较研究50 Hz 1.8 mT正弦电磁场(SEMF)和50 Hz0.6 mT脉冲电磁场(PEMF)对大鼠颅骨成骨细胞成熟和矿化的影响。方法:原代培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为空白对照组、SEMF组和PEMF组。SEMF组和PEMF组每天接受电磁场处理一次,每次90 min。电磁场处理2 d时,采用蛋白质印迹法和实时定量RT-PCR检测Ⅰ型胶原(Collagen-1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Osterix(OSX)和Runt相关转录因子2(Runx-2)的蛋白和基因表达;电磁场处理第6天和第9天时,采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性;电磁场处理第10天时采用偶氮偶合染色检测ALP活性;电磁场处理第12天时,以茜素红染色观察钙化结节形成情况并作定量分析。结果:与空白对照组比较,SEMF组和PEMF组的Collagen-1、BMP-2、OSX、Runx-2蛋白和基因表达水平均显著升高(P<0.01或P<0.05),且Collagen-1、BMP-2在PEMF组中的mRNA表达量显著高于SEMF组(均P<0.05)。电磁场处理第6天时,PEMF组ALP活性显著高于空白对照组(P<0.05),SEMF组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);第9天时,PEMF组和SEMF组ALP活性均显著高于空白对照组(均P<0.01),而PEMF组和SEMF组之间差异无统计学意义(P>0.05)。PEMF组和SEMF组偶氮偶合染色面积均大于空白对照组(均P<0.01),且PEMF组染色面积大于SEMF组(P<0.05)。茜素红染色结果显示,PEMF组和SEMF组钙化结节染色面积显著大于空白对照组(均P<0.01),且PEMF组钙化结节染色面积大于SEMF组(P<0.01)。结论:50 Hz 1.8 mT SEMF和50 Hz 0.6 mT PEMF均能促进大鼠颅骨成骨细胞成熟和矿化,其中PEMF效果更为明显。 展开更多
关键词 成骨细肜细胞学 颅骨/细胞学 电磁场 细胞分化
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