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组织蛋白酶K在酒精性心肌病小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制研究
被引量：
3
1
作者
唐一锋
刘志江
+3 位作者
许官学
赵然尊
陈文明
石蓓
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第13期1330-1337,共8页
目的探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,CatK)在酒精性心肌病(alcoholic cardiomyopathy,ACM)小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制。方法48只8周龄C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为对照组(n=12,等热量麦芽糖糊精对照液体饲料喂养)和模型组...
目的探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,CatK)在酒精性心肌病(alcoholic cardiomyopathy,ACM)小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制。方法48只8周龄C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为对照组(n=12,等热量麦芽糖糊精对照液体饲料喂养)和模型组(n=36,4%乙醇Lieber-DeCarli液体饲料喂养)。8周后,以超声心动图心脏收缩功能下降的模型组小鼠为ACM,按随机数字表法分为:ACM组、sh-NC组、sh-CatK组,每组12只。分别向sh-NC组和sh-CatK组小鼠鼠尾静脉注射1×10^(9) vg(100μL)Scramble-shRNA和CatK-shRNA的重组腺病毒。在第12周末,采用M型超声心动图测量心功能。免疫组织化学检测CatK和Nox4蛋白表达。体外实验以H9c2心肌细胞为研究对象,评价CatK-shRNA介导的CatK沉默对乙醇诱导的心肌细胞损伤的影响。采用蛋白质印迹法分析AMPK/Nox4信号通路蛋白表达;采用流式细胞仪分析H9c2细胞凋亡情况。应用荧光染料二氢乙胺测定小鼠心肌组织和体外培养的H9c2细胞的活性氧水平。结果ACM组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均较对照组显著增加(P<0.05)。与ACM组相比,sh-CatK组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均显著降低(P<0.05)。体外结果显示,随着暴露于乙醇中的时间不断延长,H9c2细胞中CatK蛋白表达不断增加(P<0.05)。CatK抑制处理显著降低了H9c2细胞凋亡和氧化应激水平(P<0.05),并上调了AMPK磷酸化(P<0.05),进而导致Nox4蛋白、纤维细胞胶原COL-1和TGF-β表达降低(P<0.05)。结论CatK参与ACM小鼠心功能不全的病理过程,其机制与促进AMPK/Nox4信号通路介导的氧化应激有关。
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关键词
组织蛋白酶K
小鼠
酒精性心肌病
心功能
AMPK/Nox4信号
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题名
组织蛋白酶K在酒精性心肌病小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制研究
被引量：
3
1
作者
唐一锋
刘志江
许官学
赵然尊
陈文明
石蓓
机构
六盘水市人民医院心血管内科
遵义医科大学附属
医院
心血管
内科
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第13期1330-1337,共8页
基金
贵州省卫生健康科研基金项目(20190124)。
文摘
目的探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,CatK)在酒精性心肌病(alcoholic cardiomyopathy,ACM)小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制。方法48只8周龄C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为对照组(n=12,等热量麦芽糖糊精对照液体饲料喂养)和模型组(n=36,4%乙醇Lieber-DeCarli液体饲料喂养)。8周后,以超声心动图心脏收缩功能下降的模型组小鼠为ACM,按随机数字表法分为:ACM组、sh-NC组、sh-CatK组,每组12只。分别向sh-NC组和sh-CatK组小鼠鼠尾静脉注射1×10^(9) vg(100μL)Scramble-shRNA和CatK-shRNA的重组腺病毒。在第12周末,采用M型超声心动图测量心功能。免疫组织化学检测CatK和Nox4蛋白表达。体外实验以H9c2心肌细胞为研究对象,评价CatK-shRNA介导的CatK沉默对乙醇诱导的心肌细胞损伤的影响。采用蛋白质印迹法分析AMPK/Nox4信号通路蛋白表达;采用流式细胞仪分析H9c2细胞凋亡情况。应用荧光染料二氢乙胺测定小鼠心肌组织和体外培养的H9c2细胞的活性氧水平。结果ACM组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均较对照组显著增加(P<0.05)。与ACM组相比,sh-CatK组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均显著降低(P<0.05)。体外结果显示,随着暴露于乙醇中的时间不断延长,H9c2细胞中CatK蛋白表达不断增加(P<0.05)。CatK抑制处理显著降低了H9c2细胞凋亡和氧化应激水平(P<0.05),并上调了AMPK磷酸化(P<0.05),进而导致Nox4蛋白、纤维细胞胶原COL-1和TGF-β表达降低(P<0.05)。结论CatK参与ACM小鼠心功能不全的病理过程,其机制与促进AMPK/Nox4信号通路介导的氧化应激有关。
关键词
组织蛋白酶K
小鼠
酒精性心肌病
心功能
AMPK/Nox4信号
Keywords
cathepsin K
mice
alcoholic cardiomyopathy
cardiac function
AMPK/Nox4 signaling
分类号
R345 [医药卫生—基础医学]
R363.21 [医药卫生—病理学]
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
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1
组织蛋白酶K在酒精性心肌病小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制研究
唐一锋
刘志江
许官学
赵然尊
陈文明
石蓓
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
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